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《上海交通大学》 2008年
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玉米弯孢叶斑病菌致病性分化定向选择机理与致病相关基因鉴定

翟羽红  
【摘要】: 玉米弯孢菌叶斑病是由新月弯孢霉(Curvularia lunata (Wakker) Boed)引起的,自上世纪90年代末,该病害在我国各玉米产区不断蔓延,成为制约我国玉米安全生产的主要病害之一。关于该病害的发生规律、品种资源抗性鉴定、病原流行学已有一些研究,然而关于寄主对该病原菌选择效应和致病相关基因却缺少深入研究。 本文通过人工继代接种寄主和蛋白质组学技术相结合的方法,以弱致病类型的玉米弯孢叶斑病菌(Curvularia lunata (Wakker) Boed.)瓦试18(WS18)和C107为材料,反复接种(6代)玉米抗病自交系沈135,Mo17,78599-1,分析病菌致病性动态变化。在接种前二个世代,病情指数和菌丝蛋白图谱没有发生明显变化,到了第三代,病情指数明显增加,蛋白质图谱的差异蛋白数量和表达水平也同步发生变化。到接种第五代时,随着病情指数的增加,蛋白质图谱上的差异蛋白数量大幅增加。利用MALDI-TOP/MS鉴定出10个差异蛋白点,包括4个上调蛋白、4个下调蛋白和2特异诱导蛋白。其中3个蛋白点与致病性分化密切相关,包括两个与黑色素合成相关蛋白(下调蛋白Brn1,上调蛋白Scytalone dehydratase)和1个甘油合成相关蛋白(上调蛋白NAD-dependent glycerol-3-phosphate);2个过敏性相关蛋白(上调蛋白Serine/threonine protein kinase,上调蛋白Iron/manganese superoxide dismutases),另外4个蛋白参与了能量代谢和信号转导过程(Triosephosphate isomerase, Phosphoglycerate mutase, RNB domain, Ran/TC4 subfamily)。此外,还发现1种未知蛋白(hydrolases or acyltransferases)。这些特异诱导或表达上调的蛋白与致病性分化关系密切,一方面可反映出抗病寄主对病菌的定向选择效应,另一方面可做为致病性分化标记,为深入研究致病性分化机理提供线索和技术方法。 关于病菌致病相关基因的研究,本文利用限制性内切酶介导基因整合技术,用带有潮霉素和氨卞抗性基因的线性化质粒pv2和限制性内切酶HindⅢ转化经合适PEG浓度处理的弯孢菌CX3原生质体,构建获得200多个REMI突变体,经选择性培养基继代培养筛选出10株遗传稳定的白色转化子,对这10株白化菌株进行致病性测定,接种结果显示具有很弱的致病性,从而形成了优化的弯孢菌异源基因转化体系。将单拷贝插入的白化菌株A-2进行质粒拯救,得到的特异性整合载体包含了430bp的弯孢菌基因组DNA序列信息,经NCBI数据库检索发现,插入位点侧翼序列与不饱和脂肪酸脱氢酶(FAD3)基因具有很高的同源性(93%),该酶是形成不饱和脂肪酸的关键酶类,可能与病菌孢子和菌丝的形成与萌发相关。
【学位授予单位】:上海交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S435.131

【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 黄秀丽;玉米弯孢菌叶斑病抗性相关蛋白质鉴定及功能研究[D];上海交通大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 王嘉渊;玉米弯孢霉叶斑病菌Clm1基因的克隆与功能分析[D];上海交通大学;2011年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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10 宋立秋;王振营;何康来;白树熊;;玉米上主要害虫为害与玉米穗腐病的发生关系及其籽粒中霉菌毒素产毒为害的研究进展[A];植物保护科技创新与发展——中国植物保护学会2008年学术年会论文集[C];2008年
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1 李红霞;几种抗病毒药剂对烟草花叶病毒的抑制作用及相关机理研究[D];河北农业大学;2010年
2 蔡孟浩;海洋灰绿曲霉发酵生产灰绿霉素及真菌聚酮合成酶基因Tspks1的异源表达[D];华东理工大学;2011年
3 傅晓萍;美洲商陆镉吸收和耐性机理研究[D];浙江大学;2011年
4 江琼;细胞周期调控蛋白cyclin D1基因靶向microRNAs的预测、系统验证及西洋参提取物处理人乳腺癌细胞的表达谱分析[D];浙江大学;2010年
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6 杨艳丽;外源茉莉酸影响马铃薯对晚疫病抗性的初步研究[D];湖南农业大学;2010年
7 陈雷;可控SERS基底制备及其在蛋白质检测方面的应用[D];吉林大学;2011年
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10 孙正龙;低温胁迫下高山离子芥差异蛋白质组学研究[D];兰州大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张敏;猪圆环病毒2型感染猪肺泡巨噬细胞的蛋白质组学研究[D];华中农业大学;2010年
2 刘冉冉;枫香遗传转化体系的优化及转化PaFT基因的研究[D];华中农业大学;2010年
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4 陈镇;长、短光周期敏感雄性不育水稻幼穗育性相关蛋白差异分析[D];华中农业大学;2010年
5 袁亭亭;嫁接栽培与施肥水平对番茄生长发育及养分吸收利用特性的影响[D];山东农业大学;2010年
6 蒲媛媛;白菜型冬油菜抗寒性的生理特性与蛋白质组的电泳分析[D];甘肃农业大学;2010年
7 王威;玉米瘤黑粉病抗性的遗传特点及生化特性研究[D];甘肃农业大学;2010年
8 郑许华;不同贮藏方式对马铃薯微型薯活力及生理生化特性的影响[D];甘肃农业大学;2010年
9 张丽娟;桃儿七离体培养体系的建立与发状根诱导研究[D];甘肃农业大学;2010年
10 张杨军;南丰蜜橘离体再生及生理生化特征研究[D];江西师范大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 邓文红;张风娟;金幼菊;;反相高效液相色谱法测定植物组织中的水杨酸[J];北京林业大学学报;2007年01期
2 王阳梦;董银卯;何聪芬;;蛋白质组学核心技术研究进展[J];北京工商大学学报(自然科学版);2006年04期
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前3条
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中国硕士学位论文全文数据库 前6条
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【二级引证文献】
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1 赵妍;黄炳茹;王兆龙;杜红梅;;蛋白质组学及其在植物非生物胁迫研究中的应用[J];上海交通大学学报(农业科学版);2011年06期
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1 赵妍;狗牙根干旱相关蛋白及代谢产物研究[D];上海交通大学;2011年
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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10 王金辉;李轶女;刘惠芬;张志芳;沈桂芳;;叶绿体蛋白质组学研究进展[J];生物技术通报;2011年02期
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中国重要报纸全文数据库 前10条
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3 黎明;科学新宠——蛋白质组学[N];医药经济报;2001年
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5 麦国荣;蛋白质组学[N];中国医药报;2001年
6 王雪飞 吴志军;首建人类器官蛋白质组“蓝图”[N];健康报;2006年
7 特约记者 郝成涛 记者 于春光;为肿瘤疾病的防治研究开辟新途径[N];解放军报;2009年
8 本报特约记者 吴志军 郝成涛;为科学攀登搭建精神高地[N];解放军报;2010年
9 阳光;中科院大连化物所为蛋白质组学研究提供新方法[N];中国医药报;2007年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 翟羽红;玉米弯孢叶斑病菌致病性分化定向选择机理与致病相关基因鉴定[D];上海交通大学;2008年
2 高照;大鼠缺血再灌注心肌蛋白的蛋白质组学二维凝胶电泳分析及卡维地洛的干预作用[D];重庆医科大学;2005年
3 柳晓东;蛋白质组学在结直肠癌早期诊断中的研究与应用[D];青岛大学;2005年
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5 韩娟;SELDI技术检测子宫内膜癌患者血清差异蛋白的表达及临床意义[D];青岛大学;2006年
6 刘海霞;检测卵巢癌患者血清中差异表达蛋白的研究[D];青岛大学;2006年
7 张妍;HCMV致婴儿肝炎综合征的血清蛋白标志物研究[D];青岛大学;2006年
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9 庞小刚;氧化胁迫下拟南芥根的蛋白质组学研究[D];山东师范大学;2006年
10 庞盼姣;2型猪链球菌强毒株与无毒株比较蛋白质组学研究[D];吉林大学;2007年
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