收藏本站
《上海交通大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及血液学指标的检测

余飞  
【摘要】: 本研究对猪附红细胞体(EH)的不同实验室检测方法、小鼠模型建立以及附红细胞体感染小鼠后的血液学免疫学变化进行了较深入的探讨。 一、猪附红细胞体实验室检测方法的建立 本研究采用了光学显微镜镜检(包括鲜血滴片镜检和瑞氏-姬姆萨染色镜检)、透射电镜观察以及PCR检测方法检测猪EH。鲜血滴片镜检和瑞氏-姬姆萨染色涂片均能清晰地观察到EH的形态结构,但此两种方法易产生假阳性,需要透射电镜检测或者是PCR检测作为辅助诊断。通过透射电镜可以观察到EH的超微结构,发现EH附着于红细胞表面从而引起红细胞内陷,其结果可以作为诊断依据,但此法操作复杂,成本较高,不宜作为临床普及使用。 本研究根据已有的猪EH特异性片段设计引物,成功地扩增得到810 bp的PCR产物。本实验所建立的猪EH的PCR检测方法具有高度的特异性和敏感性,可以用于猪附红细胞体病的流行病学调查。同时,本研究初步建立了猪EH的SYBR Green荧光定量PCR检测方法。根据已有的猪EH特异性片段设计引物,通过条件的优化,建立的方法简便快速,特异性高。 二、猪附红细胞体小鼠感染模型的建立 本研究分别采用感染猪附红细胞体病的猪全血和分离纯化的猪EH作为感染源攻毒SPF昆明小鼠,感染后通过血液压滴片镜检,PCR检测及透射电镜检测鉴定模型建立成功。结果显示采用分离纯化的猪EH作为感染源的攻毒小鼠在感染后3 d左右感染率(感染附红细胞体的红细胞所占红细胞总数的比率)达到了高峰,而后又下降。而采用感染猪EH的猪全血作为感染源的攻毒小鼠一直维持一种低的感染状态。表明采用分离纯化的猪EH作为感染源可以取得更为良好的效果,此模型可用于附红细胞体病致病机制和药物筛选等方面的研究。 三、人工感染猪附红细胞体对小鼠血液学及免疫学指标的影响 在构建猪EH小鼠感染模型的基础上,研究了感染后血液常规指标,RBC-IC花环率和脾淋巴细胞转化功能的变化,旨在为附红细胞体病跨种间感染机制研究以及免疫功能变化研究提供借鉴。研究结果显示小鼠感染EH后红细胞总数减少,血红蛋白含量降低,红细胞比容降低,RBC-IC花环率上升,其他指标没有显著变化。提示EH感染可能并不能引起机体强烈的细胞免疫应答,但是可能对非特异的红细胞免疫系统有影响。具体机制有待进一步研究。 通过本研究,建立了猪EH光镜、透射电镜及PCR检测方法,并建立了EH的SPF小鼠感染模型,研究了EH感染对血液常规指标,红细胞免疫粘附功能以及淋巴细胞转化功能的影响,初步探索了附红细胞体病免疫致病机理,为防止附红细胞体病的爆发流行提供了前期的理论与技术储备,对附红细胞体病的综合防治措施制订具有重要意义。
【学位授予单位】:上海交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S858.28

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 宋俊华;;启动建立转基因作物检测方法数据库[J];农药科学与管理;2011年06期
2 吴凤笋;李文刚;;基因芯片技术在动物疫病检测中的应用[J];郑州牧业工程高等专科学校学报;2011年02期
3 宋瑞;张彩云;何立宁;张蕾;;猪肉中“瘦肉精”盐酸克伦特罗残留危害及检测方法[J];科技资讯;2011年15期
4 张建群;申丽静;陶昆;贺伟强;;莱克多巴胺对健康的危害及其检测方法研究[J];中小企业管理与科技(上旬刊);2011年07期
5 钱炜林;叶广胜;王玉燕;陈伟强;;戊型肝炎病毒诊断方法概述[J];广东农业科学;2011年12期
6 张瑞玲;郝杰;罗世芝;张云霞;刘云国;;肉毒梭菌的荧光定量PCR检测方法[J];农产品加工(学刊);2011年10期
7 马晓燕;张会彦;宋明明;张先舟;王羽;张伟;;环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌的研究[J];安徽农业科学;2011年14期
8 高丽娜;马丹;;饲料中沙门氏菌的污染现状及检测方法探究[J];河北渔业;2011年08期
9 祝相梅;秦海波;;禽流感(AIV)的实验室检测方法[J];养殖技术顾问;2011年09期
10 王彩丽;匡红艳;荣俊;熊团林;;多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的建立[J];黑龙江畜牧兽医;2011年15期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨磊;;尼尔基水利枢纽沥青混凝土心墙施工现场质量控制[A];2004水利水电地基与基础工程技术[C];2004年
2 李吉平;刘文森;徐静;万家余;高宏伟;;高效液相色谱(HPLC)对葡萄球菌肠毒素A、B检测方法的研究[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
3 汪凡文;罗丽华;张伟;;公路填石路堤的施工工艺与检测方法[A];计算机模拟与信息技术会议论文集[C];2001年
4 李张明;练继建;;大体积混凝土质量无损检测方法研究[A];中国地球物理学会年刊2002——中国地球物理学会第十八届年会论文集[C];2002年
5 孙侠菲;余景池;丁泽钊;郭培基;;超光滑硅柱面反射镜的加工和检测[A];现代光学制造技术论文集[C];2002年
6 李丽娟;李伟;;采用最大实体要求、可逆要求零件的检测方法研究[A];第七届青年学术会议论文集[C];2005年
7 李树清;易建平;胡永强;李健;王巧全;陈志飞;罗满林;周筱华;夏谦;潘晓钟;方怡;陈敏;;套式PCR和实时荧光PCR在检测胸膜肺炎放线杆菌上的应用[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
8 于旭华;冯定远;黄志毅;;细菌来源和真菌来源阿拉伯木聚糖酶的酶学性质[A];酶制剂在饲料工业中的应用[C];2005年
9 符养杰;;粉喷桩处理公路软土地基施工工艺与质量检测的探讨[A];海南省公路学会2005年年会学术交流论文集[C];2005年
10 蔡智华;郭正元;;三唑类杀菌剂的研究进展[A];首届全国农业环境科学学术研讨会论文集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 王惜纯;4天是怎样浓缩为4小时的[N];中国质量报;2005年
2 浙江 赵登科;集成霍尔传感器简介与检测方法[N];电子报;2003年
3 本报记者 蔡 方;我国主动出击应对欧盟绿色指令[N];中国环境报;2005年
4 闫家魁;俄罗斯首创金属磁记忆检测方法[N];中国机电日报;2002年
5 鲁检;山东局成功建立炭疽芽孢杆菌PCR检测方法[N];中国国门时报;2005年
6 郑 耘;深圳局烟草环斑病毒检测方法通过鉴定[N];中国国门时报;2005年
7 记者 曾星;快速猪链球菌检测方法问世[N];中国国门时报;2005年
8 本报记者 严子健;EPO检测方法找到了[N];解放日报;2000年
9 陈晓静苏志明;精检细查微生物[N];中国质量报;2007年
10 康启来;油墨的性质与检测方法[N];中国包装报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵春霞;基因序列变异分析的方法研究及其临床应用[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2004年
2 孟祥艳;牛肉物理特性与品质的检测方法研究[D];吉林大学;2010年
3 孙秀兰;食品中黄曲霉毒素B_1金标免疫层析检测方法研究[D];江南大学;2005年
4 林岭;运动性心理疲劳的概念模型、多维检测、影响因素及干预措施[D];北京体育大学;2006年
5 马昌杯;分子信标技术在生物酶和ATP等重要生物分子检测中的应用[D];湖南大学;2007年
6 魏世明;岩体变形光纤光栅传感检测的理论与方法研究[D];西安科技大学;2008年
7 路浩;蛋白质芯片检测病原微生物与毒素的研究[D];吉林大学;2009年
8 王晓宇;葡萄酒抗氧化活性及其检测方法的研究[D];西北农林科技大学;2008年
9 刘碧波;微囊藻毒素的检测及其在水、沉积物和农田中的环境行为研究[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2006年
10 陈小霞;氯霉素分子烙印固相萃取柱的制备及应用研究[D];华南理工大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李艳鹏;电压跌落检测方法与控制技术的研究[D];西南交通大学;2007年
2 陈莹;水果中苯并咪唑类农药检测方法和残留现状研究[D];中国农业科学院;2008年
3 马玉婷;转Xa21基因抗病水稻抗优97特异性检测技术研究[D];中国农业科学院;2008年
4 马明妍;猪附红细胞体感染对红细胞免疫相关因子的影响研究[D];辽宁医学院;2012年
5 余飞;猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及血液学指标的检测[D];上海交通大学;2008年
6 田晶;猪附红细胞体感染动物模型Th17相关因子的实验研究[D];辽宁医学院;2011年
7 苏乾莲;牛血巴尔通氏体PCR检测方法的建立及牛血巴尔通氏体和附红细胞体16S rRNA基因的克隆[D];广西大学;2007年
8 张先青;全自动引线键合机产品检测方法的研究[D];华中科技大学;2004年
9 郭建顺;鸡痘病毒分子生物学检测方法的建立及其致病机理研究[D];吉林大学;2005年
10 唐成;重庆地区牛附红体病分子流行病学调查及黄牛附红体RAPD-SCAR标记的建立[D];西南大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026