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《上海交通大学》 2008年
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现代液相色谱和质谱联用技术用于半边莲药材的研究

周颖  
【摘要】: 半边莲是传统的抗蛇毒中药,它还用于治疗各种炎症和癌症。本文对半边莲中有效成分的提取条件进行了筛选,并确定了色谱条件,首次建立了半边莲的高效液相色谱指纹图谱。应用了相似度分析,聚类分析,和主成分分析对不同产地半边莲的质量进行了评价。还首次建立了全二维液相色谱耦连混合离子源模式质谱用于分离分析半边莲中的化学组分,应用这一新的方法,至少有536个组分得到了分离和检测,成功地对半边莲中的黄酮类和多炔类的成分进行了分离和鉴定。 本论文共分四章,主要内容包括: 第一章介绍了选题背景和意义。主要介绍了半边莲的化学成分和药理活性。综述了中药指纹图谱的重要意义,和多维液相色谱技术的原理和研究进展。阐述了发展二维液相色谱技术对复杂样品特别是中草药分离的重要意义。 第二章的工作,主要是建立了半边莲中有效成分的提取方法和分离的色谱条件。 半边莲的提取方法的建立:以色谱总峰数和色谱峰的总面积作为提取效率的指标,考察了以下三个指标:提取溶剂、提取方法、提取时间,对提取效率的影响,最终确定的最佳样品制备的方法为:称取1.0 g半边莲样品粉末,以甲醇为提取溶剂50 mL,在60℃下加热回流60 min。 半边莲提取液的色谱条件的建立:通过对检测波长,流动相,梯度条件,流速四个方面的考察,最终建立的色谱条件为:流速1 mL / min;流动相为CH3OH - H2O;梯度条件:0% - 100% - 100% CH3OH,0 - 40 - 50 min的线性梯度洗脱。半边莲提取液在此条件下能够得到较好的分离,得到了11个分离效果比较好的色谱峰。 第三章的工作,首次建立了半边莲的HPLC指纹图谱,采用了国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件对不同产地半边莲进行了相似度的评价,评价的结果显示除5号、10号样品的相似度为0.672,0.750外其他八批药材的相似度均在0.96以上,相似度高,说明这八批药材的质量是相对稳定的。另外还应用了主成分分析和聚类分析对不同产地半边莲进行了分类,结果与专家生药鉴别结果、相似度评价结果都是较为一致的,说明本文建立的半边莲HPLC指纹图谱的研究方法与传统的按产地分类的方法有一定的差异,更强调样品的内在化学特征,为半边莲药材的质量分析和控制提供了可靠的依据。 第四章主要研究了二维液相色谱耦连混合离子源模式质谱对半边莲中的组分的分离分析。以氰基柱作为第一维色谱柱,C18柱作为第二维色谱柱,再串联二极管阵列监测器和ES/APCI混合离子源质谱用于半边莲甲醇提取物的分离分析。峰容量和分离效率都大大提高,实验结果表明,至少检测到了536个组分,根据检测到的各组分的紫外色谱和质谱信息,其中6个组分得到了初步鉴定。 本文通过应用现代色谱技术进行了半边莲药材的中药现代化研究,首次建立了半边莲的HPLC指纹图谱,并且对其质量进行了评估,发展了二维液相色谱技术对半边莲进行了分离和鉴定研究,为中药分离提供了新思路和新方法。
【学位授予单位】:上海交通大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R284

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