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《华东理工大学》 2011年
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抗肝纤维化中药扶正化瘀方体内效应成分研究

沈丹萍  
【摘要】:中药复方的临床疗效通过严格随机对照的临床试验,越来越多的获得循证医学证据与国际医学的认可,相关作用机制研究通过动物试验等也取得了显著进步。但是,中药复方成分复杂,且中药复方发挥体内效应的物质基础及其代谢特点,则依然是困扰中药复方现代化的原因之一。 本文结合液相色谱/电喷雾质谱联用(HPLC/ESI-MS)技术分析体内的入血成分和高内涵筛选分析检测药物体外活性的方式,发现扶正化瘀方中抗纤维化作用的部分体内效应成分。 本研究应用液相色谱/电喷雾质谱联用技术,检测分析灌胃扶正化瘀方大鼠含药血清中的成分,明确扶正化瘀方入血成分。并以胎牛血清刺激人正常肝星状细胞(LX-2)增殖,各入血成分干预,MTT法检测各成分对LX-2细胞增殖的影响;同时以肿瘤坏死因子-α/放线菌素D诱导人正常肝细胞系(HL-7702)凋亡,各入血成分干预,以高内涵多指标凋亡试剂盒1检测各成分对HL-7702细胞凋亡的影响。结果显示如下。 1.灌胃扶正化瘀方大鼠含药血清中共鉴定和推断了23种扶正化瘀方入血成分,其中8种丹参水溶性化合物,如丹酚酸B、丹参素钠、咖啡酸和迷迭香酸等等;4种丹参脂溶性化合物,如隐丹参酮,丹参酮V等等;8种木脂素类化合物,如五味子醇甲,五味子醇乙和五味子酯甲等等;另外2种隐丹参酮代谢产物和苦杏仁苷。 2.6种丹参水溶性化合物(丹酚酸B、丹参素钠、咖啡酸、迷迭香酸、原儿茶酸和原儿茶醛)体外活性研究,发现丹酚酸B、丹参素钠及咖啡酸可抑制血清诱导的LX-2细胞增殖;各药均可抑制肿瘤坏死因子-α/放线菌素D诱导的HL-7702细胞凋亡;迷迭香酸促进HL-7702细胞生长,对LX-2细胞有一定毒性作用。 结论:丹酚酸B、丹参素钠、咖啡酸及迷迭香酸是扶正化瘀方抗纤维化的部分效应成分;液相色谱/电喷雾质谱联用技术和高内涵筛选分析检测结合的技术手段研究体内效应成分是一种简单、快速、有效的方式。
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