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《华东理工大学》 2012年
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中度嗜盐菌Martelella sp.AD-3菲降解酶的特性研究

董斐  
【摘要】:水杨酸-5-羟化酶和双加氧酶在多环芳烃的好氧微生物降解过程中起着非常重要的作用,它们在非嗜盐菌属中研究较多,而在耐盐及嗜盐菌属中的报道较少。其中,人们也较多关注水杨酸-5-羟化酶在单环和双环芳烃类化合物降解中的作用,在三环芳烃类化合物降解过程中的作用研究较少。本论文研究好氧、中度嗜盐菌Martelella sp.AD-3降解三环化合物—菲的过程中,降解菲的特性、降解酶的活性、水杨酸-5-羟化酶的最佳激活条件、以及双加氧酶基因的序列特征。 HPLC分析表明,AD-3菌在0.5%-15%的盐度下降解菲,最佳降解条件为盐度3%、pH9.0,6天内降解率达100%。酶活分析表明,在降解菲的AD-3菌粗酶液中可以检测到1-羟基-2-萘甲酸羟化酶、1-萘酚羟化酶、水杨酸-5-羟化酶的活力,水杨酸-5-羟化酶达到最高酶活力的条件为菲浓度200mg/L、生长盐度3%、pH9.0,酶活力为132.8nmol/min/mg。利用半巢式PCR方法扩增得到双加氧酶基因phn592,与嗜盐菌株Marinobacter sp.NCE312萘-1,2-双加氧酶铁硫蛋白基因(nahAc)同源性为95%。 本研究表明,AD-3菌生长盐度宽泛,菲降解速率快;在降解菲过程中,水杨酸-5-羟化酶活力明显提高,其活性与菲降解速率有正相关性;AD-3菌与非嗜盐菌降解多环芳烃具有不同的分子机制,为进一步研究中度嗜盐菌多环芳烃降解酶的特性提供了重要参考信息。
【学位授予单位】:华东理工大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:X172

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