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《东华大学》 2011年
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镉抗性菌DX-T3-01的筛选鉴定与吸附镉机理及其降解苯酚特性研究

付瑾  
【摘要】:镉是有广泛应用价值的剧毒重金属,因其应用广泛,引起的环境污染尤显严重。重金属镉污染区往往存在大量抗镉微生物群体,从中筛选高抗镉细菌,并研究其抗性、吸附和积累镉的能力及机理,在实际应用中具有深远意义。由于环境中污染物组成的复杂性,污染多具伴生性和综合性,在研究重金属污染的同时还应该考察其与有机物的复合污染问题。本文针对筛选出的抗镉菌株,研究了其抗镉性能及重金属吸附和富集机理,并经驯化发现其对苯酚也有很好的降解性能,进一步对菌株降解苯酚的特性进行了研究和探讨。 从德兴铜矿尾矿库土壤中筛选到一株强抗镉菌株DX-T3-01,根据菌株形态学特征、生理生化性质、BIOLOG碳源利用情况及16SrRNA系统发育学结果,鉴定并命名为皮氏罗尔斯通氏菌菌株DX-T3-01(Ralstonia pickettii strain DX-T3-01) 菌株DX-T3-01对Cd2+最小抑制浓度(MIC)为4 mmol·L-1,在固体、液体培养基对Cd2+的最高耐受浓度(MTC)分别为18 mmol·L-1和16 mmol·L-1,显示出很强的抗镉特性。菌株DX-T3-01对重金属Zn2+、Cu2+,抗生素青霉素和链霉素也表现出较高的抗性,抗性水平分别达到20 mmol·L-1、3 mmol·L-1、1500 mg·L-1、250 mg·L-1。经实验可知菌株生长及抗镉的最佳条件为:温度35℃、pH 7.0、振荡速度150 r·min-1、葡萄糖为碳源。 考察了活菌体生长过程中和成熟菌体及冻干菌体对镉的积累和吸附情况,生长过程中的菌体表现出对Cd2+的积累作用大部分发生在菌株生长稳定期,主要依赖于菌体细胞大量增殖。成熟活菌体及冻干菌体吸附Cd2+的最佳条件为:温度40℃,pH 4.0,在30 min吸附达到80%,趋向于吸附饱和状态,活菌体和冻干菌体吸附Cd2+的过程符合准二级速率方程。扫描电镜观察菌体吸附Cd2+后以胞外聚集物存在,菌体表面粗糙,菌体间杂质较多,有较大结晶颗粒附在其上,EDX能谱检测出菌体表面有Cd元素存在。通过红外光谱分析表明,DX-T3-01菌株参与积累Cd2+的化学官能团主要有-P043-、胺基中的-C-N-、-M-O(O-M-O)、C=O和酰胺基(-CO-NH-)基团。 研究了皮氏罗尔斯通氏菌DX-T3-01菌株苯酚降解条件及降酚特性,并分析其降解苯酚动力学模型。正交实验确定了菌株DX-T3-01降解苯酚最佳条件为30℃、pH 7.0、转速150 r/min、接种量1%。菌株最高可降解浓度为800 mg/L的苯酚,500 mg/L以下的苯酚能在60h内完全降解;菌株苯酚降解动力学符合Monod方程零级反应形式,且具有较高的相关系数;低浓度的葡萄糖可以促进菌株的生长,却抑制苯酚的降解;重金属离子Ni2+、Zn2+、Cu2+对菌株的生长和苯酚降解的抑制明显,而菌株对苯酚降解同时仍对Cd2+有一定的耐受能力。
【学位授予单位】:东华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:X703

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