收藏本站
《东华大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

不同纳米材料对PCR优化作用的研究及机制探讨

陈晶晶  
【摘要】:聚合酶链式反应(PCR)在分子生物学研究领域已经得到了广泛的应用,聚合酶链反应(PCR)是现代生物学和医学领域最常用的分子生物学技术之一,可以把一个单拷贝的目的DNA片段扩增到几百万倍。但在实际运用中,PCR技术存在一定的局限,例如对复杂体系的扩增会出现非特异性产物扩增以及扩增效率等问题。因此,寻找可以提高PCR特异性和效率的添加剂具有很大的潜力和发展前景。 实验中,我们以283bp的λDNA的再扩增PCR体系和非特异性扩增体系为测试体系,对树状大分子包裹的金纳米颗粒对PCR的作用进行研究。本实验采用第五代树状大分子纳米金颗粒(Au DENPs)为研究对象,金原子与树状大分子的摩尔比为25:1,50:1,75:1,100:1,125:1五种Au DENPs作为添加剂。实验证明,包裹有不同浓度胶体金的树状大分子都能对PCR反应起到优化作用,而且随着胶体金浓度的增大,相应树状大分子的优化作用增强,最优浓度越来越低。 据我们推断,Au DENPs的优化机制是胶体金的加入使树状大分子的“硬度”增大,当树状大分子与PCR各组分相互作用时,由于其表面的有效反应基团增多,提高周围PCR各组分有效反应浓度以及促使游离的聚合酶越来越倾向于与完全配对的引物和模板形成复合物的能力得到增强,从而增强反应的效率及特异性。 在此,我们以聚乙烯亚胺修饰的不同表面电荷多壁碳纳米管(CNT/PEI)为添加剂,探讨了不同表面电势对PCR优化的影响。试验结果表明再扩增体系的特异性和效率明显受到聚乙烯亚胺修饰的碳纳米管的表面电荷的影响。即使浓度为0.39 mg/L时,表面修饰正电荷的碳纳米管也能有效的优化PCR;电中性的CNT/PEI.Ac不能优化该体系;尽管带负电荷的CNT/PEI.SAH可以优化PCR,但是它的最优浓度为630 mg/L,比CNT/PEI最优浓度的103还要高。该实验结果表明CNT/PEI表面的正电荷和CNT/PEI.SAH的表面负电荷与PCR反应组分之间的电荷作用可以提高PCR扩增的特异性和效率,碳纳米管的热传导性在PCR优化过程中没有起主导作用。
【学位授予单位】:东华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:TB383.1

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张捷;林燕;汪畅;梁勇;江桂斌;周群芳;;富勒烯对PCR反应的抑制作用[J];环境科学学报;2008年12期
2 邓平建,赵锦,刘建军,房师松,何雅青,黄自然;转基因食品安全性检验的核酸检测技术研究[J];卫生研究;2002年01期
3 沈志坚,丁子上;纳米材料与纳诺技术[J];材料导报;1992年06期
4 刘纯杰,杨瑞馥,刘明远,潘耀谦,苏维萍,周志江,王承宇,郑明光,李普霖;应用通用引物PCR法检测葡萄球菌A、D和E型肠毒素基因[J];山东食品科技;1994年04期
5 文自立;新兴纳米功能材料[J];青海科技;1995年04期
6 朱念,朱建国,朱果扣;纳米材料的特性及开发[J];今日科技;1996年10期
7 唐电,陈士仁,蔡传荣,王平;Ti-17%Si氧化物纳米材料的形态与结构特点[J];中国有色金属学报;1997年02期
8 全宏声;用纳米材料对士兵进行生化防护[J];材料工程;2001年12期
9 李景新,黄因慧,沈以赴;纳米材料的加工技术[J];材料科学与工程;2001年03期
10 刘伯元,黄锐,赵安赤;非金属纳米材料[J];中国粉体技术;2001年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 谭诗文;余波;冉懋韬;蔡一鸣;艾玉萍;王璇;张华;;牛源HBV套式PCR方法建立及其S靶基因同源性分析[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
2 王平;王辉;许文兵;朱元珏;;肺组织结核分枝杆菌巢式PCR快速检测[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
3 回文广;赵廷昌;孙福在;张卉;王建荣;高孝强;田丽;;实时荧光定量PCR原理及其应用[A];中国植物病理学会第六届青年学术研讨会论文集——植物病理学研究进展(第五卷)[C];2003年
4 张立德;;纳米材料的可控制备与表征[A];中国颗粒学会超微颗粒专委会2011年年会暨第七届海峡两岸超微颗粒学术研讨会论文集[C];2011年
5 李宁;李晨;;单步水热法合成空心Fe_3O_4磁球纳米材料的探讨[A];中国颗粒学会第七届学术年会暨海峡两岸颗粒技术研讨会论文集[C];2010年
6 车顺爱;;纳米材料在pH响应性药物释放中的应用(特邀报告)(英文)[A];生物颗粒与粉体制备、应用技术研讨会论文集[C];2010年
7 ;全国第二届纳米材料和技术应用会议[A];纳米材料和技术应用进展——全国第二届纳米材料和技术应用会议论文集(上卷)[C];2001年
8 ;全国第二届纳米材料和技术应用会议[A];纳米材料和技术应用进展——全国第二届纳米材料和技术应用会议论文集(下卷)[C];2001年
9 周素红;姚蓓;芦庆新;陈颖;程晓松;;纳米材料的测量技术[A];纳微粉体制备与应用进展——2002年纳微粉体制备与技术应用研讨会论文集[C];2002年
10 赵廷凯;柳永宁;朱杰武;;纳米材料概述[A];第五届中国功能材料及其应用学术会议论文集Ⅱ[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 袁封;纳米材料是涂料的好帮手[N];中国化工报;2004年
2 杭州科瀚盟公司 黄海;正确认识纳米材料在纺织上的应用[N];中国纺织报;2008年
3 记者 方彬楠 通讯员 周麦玲;纳米材料绿色打印技术产业化基地落户怀柔[N];北京商报;2010年
4 记者 冯永锋;我纳米材料领域获重要突破[N];光明日报;2000年
5 刘菊花;首批纳米材料国家标准 于4月1日起正式实施[N];中国有色金属报;2005年
6 胡爱武 傅志红;纳米材料与纳米技术[N];中国包装报;2004年
7 罗刚;神奇的纳米材料安全吗[N];健康报;2005年
8 仲科;科技部部署纳米材料研究项目[N];中国化工报;2008年
9 刘英楠;新方法捕获纳米材料详细信息[N];中国高新技术产业导报;2005年
10 记者 王大军;纳米材料有助微观诊断[N];新华每日电讯;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵斌;特殊形貌TiO_2/钛酸盐纳米材料的合成与生成机理[D];华东理工大学;2011年
2 何开华;低维氮化硼纳米材料中杂质和电场行为的第一性原理研究[D];中国地质大学;2010年
3 苏勇;一维金属氧化物纳米材料的气相合成与发光性能研究[D];合肥工业大学;2011年
4 宋运涛;金属氧化物纳米材料的液相合成研究[D];山东大学;2010年
5 王金兴;不同结构In_2O_3基纳米材料的合成及其气敏特性研究[D];吉林大学;2010年
6 郭明义;硅基多孔纳米材料的功能化及其药物传输研究[D];吉林大学;2011年
7 公茂刚;低维氧化锌纳米材料的合成及浸润性研究[D];中国科学技术大学;2011年
8 侯士丽;硫化物半导体纳米材料的制备及特性研究[D];华东师范大学;2010年
9 张晓东;准一维SiC和Si_3N_4纳米材料的合成与表征[D];哈尔滨工业大学;2010年
10 张弘楠;一维二氧化钛纳米材料的构筑及其性能的研究[D];吉林大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈晶晶;不同纳米材料对PCR优化作用的研究及机制探讨[D];东华大学;2011年
2 王稳;利用RT-PCR验证基于小鼠外显子芯片发现的脑缺血相关基因表达的研究[D];西北农林科技大学;2010年
3 刘新军;表达布氏杆菌sodc基因的重组沙门氏菌的构建及不同种布氏杆菌鉴别PCR检测方法的建立[D];华中农业大学;2010年
4 郭世奎;实时荧光定量PCR技术对结直肠癌患者肠道微生态的研究[D];昆明医学院;2011年
5 金戈;博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达和p24片段荧光定量PCR试剂盒的研制开发[D];重庆医科大学;2011年
6 刘志国;实时多重荧光PCR快速鉴别布鲁菌方法的建立[D];内蒙古农业大学;2010年
7 郑升博;猪链球菌多重PCR检测方法的建立及屠宰场样品感染率的调查研究[D];上海交通大学;2010年
8 章定恒;水滑石前体法制备Fe掺杂ZnO纳米材料及其发光性能研究[D];北京化工大学;2010年
9 宋虎;三羰基锝标记富勒醇的制备及其生物体内行为研究[D];中国工程物理研究院;2010年
10 刘宁;PCR扩增16srRNA基因以快速诊断败血症及分型细菌[D];南昌大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026