收藏本站
《东华大学》 2013年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

混合菌群FF对活性黑5的脱色降解研究

范凤霞  
【摘要】:近年来,随着染料生产和纺织印染工业的迅速发展,其产生的废水已成为当今最难处理的废水之一,其中偶氮染料又是染料废水中重要的污染物。混合菌群在染料废水处理中具有效果稳定、降解染料彻底等优点,已成为染料废水处理技术研究的热点。因此筛选和研究具有优良脱色性能混合菌群将为染料废水大规模生物处理提供理论基础。本研究利用梯度浓度压力驯化法,从运行良好的印染废水生物处理系统(A+OSA剩余污泥减量系统)二号厌氧反应器活性污泥中筛选驯化出对活性黑5具有良好脱色性能的混合菌群FF,针对其染料脱色性能、脱色机理及菌群结构进行了一系列研究。 研究了混合菌群FF对染料活性黑5的脱色性能及脱色动力学。结果表明,混合菌群FF在活性黑5初始浓度为200mg/L的脱色培养基中,在35℃、pH8.0的条件下,静置培养12h,测定其平均脱色率为84.6%,24h后其最高脱色率可达94.8%,连续培养150代以后其脱色效果依然非常稳定:同时混合菌群FF对活性蓝19,活性艳橙X-GN,活性红239等多种小分子活性染料具有较好脱色性能,静置培养24h时,脱色率都达到了90.0%以上,说明其对偶氮类活性染料脱色具有一定的普适性。耐盐性结果表明,混合菌群FF最高耐受NaCI浓度为4%,24h后脱色率仍保持在91.0%。混合菌群FF还具有较强的持久脱色能力,连续脱色6个批次仍能保持57.3%的脱色率。同时研究了混合菌群FF脱色动力学,在活性黑5浓度小于1500mg/LFF脱色降解的前12h,其生物脱色反应按照(Monod)方程属于表观零级动力学反应。 研究了培养基中不同碳、氮源以及添加不同外源物对混合菌群FF生长和脱色的影响。在碳源试验中,当碳源为蔗糖时脱色效果最好为82.1%;在氮源试验中,当氮源为蛋白胨时,生长和脱色总体效果最好,脱色率为73.1%。各种碳、氮源试验结果表明混合菌群FF在不同碳氮源条件下的无机盐培养基中生长和脱色效果都不如在牛肉膏蛋白胨培养基中好,这可能与一开始筛选驯化时采用了牛肉膏蛋白胨培养基有关。研究了不同金属离子的影响,结果表明金属离子Zn2+、Sn2+、Co2+等浓度为1mmol/L时,会严重抑制菌群的生长;金属离子Mn2+、k+、Mg2+、Ca2+在脱色初期(前8h),对脱色有激活作用,而Sn2+、Co2+对脱色有抑制作用,但在后续的脱色中,各种离子均未对脱色造成明显影响,24h时脱色率基本相同为91.0%。研究了不同电子受体的影响,发现电子受体柠檬酸铁、硝酸钠能稍微促进菌群生长,氧化铁对菌群生长没有明显影响,而亚硝酸钠、硫代硫酸钠会轻微抑制FF的生长;在脱色前12h,柠檬酸铁、硝酸钠、氧化铁、亚硝酸钠、硫代硫酸钠均能明显降低细菌对活性黑5的脱色速率。考察不同电子供体(主要是辅酶NADH和NADPH)对混合菌群FF生长和脱色的影响,结果表明在NADH和NADPH浓度为0.5mmol/L寸,整个过程中FF的生长与未加辅酶时基本相同,但是脱色率有所下降,48h后,未加任何辅酶的其脱色率为95.4%,而加了NADPH和NADH的降为90.7%和85.1%。说明在静置培养条件下FF脱色降解活性黑5的过程不依懒于NADH和NADPH。以上结果可为混合菌群应用过程中激活剂的选择方面提供数据基础。 利用LC-MS测定混合菌群作用过程中活性黑5的脱色降解中间产物,初步推测其脱色降解机理。结果表明可能存在两种降解途径,第一种:活性黑5首先在水解的作用下,脱落-OH、-NH3、-SO3-等助色基团和Na+,然后-N=N-双键在催化的作用下还原裂解生成芳香胺类化合物,其中两个-N=N-的裂解是逐一进行的,并且有先后顺序,最后,一部分芳香胺在有氧的条件下矿化为小分子代谢物;第二种:活性黑5在厌氧的条件下将-N=N-双键还原裂解,生成芳香胺类化合物。以上降解机理与已报道单菌作用机理有所区别。同时,对不同脱色降解阶段的脱色液,由大肠杆菌平板毒性试验可知,混合菌群FF在脱色降解活性黑5的同时会逐渐降低染料的毒性。 最后,通过变性梯度凝胶电泳(DGGE)、限制性片段长度多态性分析(RFLP)、纯培养16S rDNA鉴定等技术对混合菌群FF的群落结构进行解析。DGGE和RFLP结果表明,混合菌群FF中优势菌群主要为变形菌纲(Gamma-proteobacteriα)的变形杆菌属(Proteus)细菌和梭菌纲(Clostridia)的梭菌属(Clostridium)细菌。同时利用纯培养技术从混合菌群FF中随机筛选分离鉴定了21株具有不同脱色效率的单菌株,发现这21株全部为变形菌纲(Gamma-proteobacteria)田菌,并且71.4%属于克雷伯氏菌属(Klebsiella),28.6%属于变形杆菌属(Proteus),其中有脱色最佳的两株菌分别为Klebsiella sp.和Proteus sp.。以上结果说明:混合菌群FF中存在可培养的功能性优势菌属如Klebsiella菌属和Proteus菌属细菌,以及不易培养的生长优势菌属如Clostridium。而Proteus菌属在混合菌群FF中既是生长优势菌属又是功能优势菌属,且易于分离培养,利于应用。
【学位授予单位】:东华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:X703;X172

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 荚荣,周业亭,刘自平;染料脱色真菌的选育及其对合成染料的脱色作用[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年01期
2 丁虹;高景峰;林世静;;染料废水的微生物脱色研究进展[J];北京石油化工学院学报;2010年04期
3 晏再生;王世和;吴慧芳;;不同环境条件下偶氮染料酸性大红GR的生物降解性能[J];城市环境与城市生态;2008年05期
4 陈益宾,王绪绪,付贤智,李玉林;偶氮染料刚果红在水中的光催化降解过程[J];催化学报;2005年01期
5 陈跃,吴峰,邓南圣;藻引发水中偶氮染料的光降解[J];重庆环境科学;2003年05期
6 蒋姬,姜佩华;分散染料的生物降解性能[J];东华大学学报(自然科学版);2003年06期
7 柳广飞;周集体;王竞;曲媛媛;宋智勇;;细菌对偶氮染料的降解及偶氮还原酶的研究进展[J];环境科学与技术;2006年04期
8 付学琴;龙中儿;黄文新;;染料脱色微生物的筛选及其脱色条件的研究[J];环境科学与技术;2009年09期
9 邱丽娟;黄满红;杨煜东;陈刚;陈亮;;活性黑KN-B染料的生物降解研究[J];环境科学与技术;2010年06期
10 陈晔;陈刚;陈亮;黄满红;;活性黑5高效脱色菌的分离鉴定和生长特性研究[J];环境科学与技术;2011年02期
中国博士学位论文全文数据库 前4条
1 王铮;复合光催化剂的制备及其降解水中染料的应用研究[D];同济大学;2007年
2 杨朝晖;基于分子生态学技术的环境微生物群落结构与功能的研究[D];湖南大学;2007年
3 刘友勋;耐碱真菌Myrothecium sp.IMER1对染料脱色的机理研究[D];华中科技大学;2008年
4 徐芳芳;柔性金属对大肠杆菌毒性机理的研究[D];东华大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 施胜华;介孔材料的超支化改性及其对偶氮染料的吸附性能研究[D];东华大学;2011年
2 于文娟;脱色偶氮染料细菌筛选及固定化强化SBR生物脱色的研究[D];东华大学;2012年
3 杨东虎;染料脱色细菌的筛选与脱色条件的研究[D];河北大学;2003年
4 张金平;微生物混合培养体系对染料脱色的研究[D];河北大学;2006年
5 吴来燕;驯化大肠杆菌对镍离子的去除及三种细菌对染料脱色行为研究[D];中南民族大学;2008年
6 郑慧;光生物转盘—好氧移动床生物膜工艺处理染料废水的研究[D];哈尔滨工业大学;2008年
7 贾玉红;菌株Dyella sp.LA-4降解底物广谱性及其在土壤修复中的应用[D];大连理工大学;2009年
8 沈国;基于PCR-DGGE技术的脱氮除磷系统微生物群落结构分析[D];东华大学;2010年
9 封培;高效生物絮凝剂产生菌的分离鉴定及其应用研究[D];南京农业大学;2009年
10 焦晨;PCR-DGGE法在抚州市西湖水体微生物多样性研究中的探讨[D];内蒙古大学;2010年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴利;余育和;冯伟松;;PCR-DGGE技术在环境微型生物群落研究中的应用[J];合肥师范学院学报;2010年06期
2 张庆宁;胡明;朱荣生;任相全;武英;王怀忠;刘玉庆;王述柏;;生态养猪模式中发酵床优势细菌的微生物学性质及其应用研究[J];山东农业科学;2009年04期
3 柳尧波;凌泽春;;猪胃肠道微生物菌群的研究现状浅析[J];山东农业科学;2011年10期
4 倪中秀;吕律;龚潇;;即时合成层状双氢氧化物法去除阴离子染料活性艳蓝[J];安徽职业技术学院学报;2007年03期
5 杨宝德,韩学柱;高浓度Cl~-含酚废水综合利用初探[J];安徽化工;2000年05期
6 陈长琦;岑科达;殷福才;程建萍;潘成荣;郑志侠;;酸性大红GR染料废水超声降解的实验研究[J];安徽化工;2007年01期
7 胡天媛;陶博;孟庆凡;章琪;;染料废水COD_(Cr)去除工艺的比较[J];安徽化工;2009年03期
8 杨帆;宋小杰;韦文美;;农产品废弃物对染料废水处理研究进展[J];安徽建筑工业学院学报(自然科学版);2009年04期
9 赵新亮;马强;;玉米SRAP反应体系的建立与优化[J];安徽农业科学;2006年15期
10 刘素霞;洪达;高武军;邓传良;卢龙斗;;石榴RAPD反应体系优化及亲缘关系研究[J];安徽农业科学;2007年36期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘超;宋鹏;郭家秀;楚英豪;尹华强;;印染废水的物理和化学处理技术的研究进展[A];2011中国环境科学学会学术年会论文集(第二卷)[C];2011年
2 高丽琼;张宇峰;张朝晖;;膜技术在纺织印染废水处理中的应用[A];第八届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2008年
3 周志刚;石鹏君;姚斌;何夙旭;苏永全;;海水鱼消化道菌群结构研究进展[A];饲用酶制剂开发与应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
4 马晓东;陈珊珊;李重九;;丙酰紫草素对烟草花叶病毒外壳蛋白的钝化作用研究初探[A];2008年全国有机质谱学术会议论文集[C];2008年
5 丰亦军;;牛仔纱线染浆废水处理新工艺[A];2008广东牛仔深加工技术创新研讨会论文集[C];2008年
6 王学川;贺宝元;薛海燕;强涛涛;;壳聚糖/明胶微球的制备及对酸性染料吸附性能[A];2010年全国皮革化学品会议论文集[C];2010年
7 黄占林;邓桦;潘红琴;周文良;;TiO_2溶胶对基布负载TiO_2薄膜光催化活性的影响[A];第六届全国工业催化技术及应用年会论文集[C];2009年
8 李昕;杨昌英;;磷钨酸光催化作用的研究[A];湖北省化学化工学会第十一届分析化学专业年会论文集[C];2007年
9 吴海;张朝红;张志琼;董殿波;赵哲;张华春;;印染废水处理技术[A];中国环境科学学会2006年学术年会优秀论文集(下卷)[C];2006年
10 王宇峰;毛文雄;白小华;;MBR工艺中曝气量的研究[A];土木建筑学术文库(第11卷)[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈林;铜绿假单胞菌内在耐药性相关基因的筛选及研究[D];西北大学;2010年
2 王冬菊;RNAi阻断乙型肝炎病毒在人胎盘滋养细胞中复制的作用[D];暨南大学;2010年
3 池小琴;酿酒酵母海藻糖代谢工程与抗逆性相关机制研究[D];浙江大学;2010年
4 梁东;苹果山梨醇代谢相关基因的分子特性研究[D];西北农林科技大学;2010年
5 闵红;大棚蔬菜连作障碍机理研究[D];西北农林科技大学;2010年
6 肖升木;分子生态学技术在环境微生物群落与功能基因中的应用研究[D];东华大学;2010年
7 谢学辉;德兴铜矿污染土壤重金属形态分布特征及微生物分子生态多样性研究[D];东华大学;2010年
8 刘秀娟;典型有机污染物绿色环保分析技术与降解研究[D];华中师范大学;2011年
9 王元芳;聚环氧氯丙烷胺及其聚合氯化铝复合混凝剂的脱色性能研究[D];山东大学;2011年
10 胡振;缺氧—好氧生物脱氮系统中N_2O的释放机理与减量化控制研究[D];山东大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈静颖;双能场/生物法降解废水中苯酚的研究[D];安徽工程大学;2010年
2 黄江胜;改性茶叶对工业废水的吸附性能研究[D];安徽工程大学;2010年
3 魏小玲;染料废水与造纸废水混合处理对A/O工艺的影响研究[D];山东科技大学;2010年
4 李巧连;海绵放线菌抑菌活性菌株的筛选及HVG 29菌株代谢产物的分离与结构鉴定[D];辽宁师范大学;2010年
5 李玮;甲醛和乙二醛接枝聚丙烯酰胺聚合物的合成和絮凝性能研究[D];广西师范学院;2010年
6 苏晓东;氯化汞对大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白和抑制素表达的影响[D];郑州大学;2010年
7 许晨烨;铜感应转录因子基因MAC1抗热激和其他氧化刺激机理的研究[D];郑州大学;2010年
8 曾磊;杜氏盐藻叶绿体双筛选载体pchlN-CAT-BAR的构建及转化[D];郑州大学;2010年
9 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
10 何钦雅;含磺酸基离子交换纤维的合成、表征及吸附性能研究[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 荚荣,周业亭,刘自平;染料脱色真菌的选育及其对合成染料的脱色作用[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年01期
2 江芸;高峰;徐幸莲;周光宏;;PCR-DGGE技术及其在发酵食品微生物研究中的应用[J];安徽农业科学;2007年21期
3 伍阳;谢晴;龙用波;谢勇丽;段莎丽;邓仕槐;;从活性污泥中提取微生物总DNA的方法比较[J];安徽农业科学;2008年11期
4 季立才,胡培植;漆酶的结构、功能及其应用[J];氨基酸和生物资源;1996年01期
5 唐开华;何宝富;;水产养殖病害的发生及防治措施[J];现代农业科技;2008年15期
6 花日茂,岳永德,李学德,张冬青,何利文;几种偶氮染料的光催化降解研究[J];安徽农业大学学报;2000年02期
7 段学军,闵航;稻田土壤细菌对重金属镉的氧化应激反应研究[J];安全与环境学报;2005年02期
8 何宝燕,尹华,彭辉,叶锦韶,卢显妍,杨峰,张娜;酵母融合菌-活性污泥曝气处理含镍废水研究[J];安全与环境学报;2005年04期
9 郭杰,曾光明,张盼月,李明;微电解法对高浓度染料废水的脱色作用研究[J];安全与环境学报;2005年05期
10 壮亚峰;曹桂萍;张潇潇;;氢氧化镁-壳聚糖复合絮凝剂对印染废水的脱色研究[J];环境科学与管理;2008年01期
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 张茂林;纳米ZnO/SnO_2等复合光催化剂的制备及其降解有机污染物研究[D];中国科学院研究生院(广州地球化学研究所);2004年
2 宋智勇;偶氮染料高效降解基因工程菌构建与特性研究[D];大连理工大学;2006年
3 刘彬彬;高效废水处理生物反应器中优势功能菌的分子识别与鉴定[D];上海交通大学;2006年
4 杨朝晖;基于分子生态学技术的环境微生物群落结构与功能的研究[D];湖南大学;2007年
5 苏俊峰;异养型同步硝化反硝化脱氮技术及微生物特性研究[D];哈尔滨工业大学;2007年
6 张云霞;新型MBR-PBBR组合系统捷径生物脱氮研究[D];大连理工大学;2009年
7 柳广飞;偶氮还原酶AZR的结构模型与功能研究[D];大连理工大学;2009年
8 尹亮;混合菌群共培养对偶氮染料的协同脱色及降解的研究[D];华南理工大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 张洪玲;废生物体资源化利用吸附处理低浓度重金属废水研究[D];南京理工大学;2004年
2 罗方;复合纳滤膜的应用研究[D];浙江大学;2006年
3 何宝燕;重金属铬、镍废水的生物吸附研究[D];暨南大学;2006年
4 郭晓彬;广东省城市湖泊氮、磷污染特征研究[D];暨南大学;2006年
5 巴淑丽;光合细菌固定化包埋颗粒产氢特性实验研究[D];重庆大学;2007年
6 张慧;改良型Fenton试剂杀菌效果及其产生羟基自由基的规律性研究[D];东华大学;2008年
7 钱陈;偶氮染料脱色菌的筛选以及脱色条件优化研究[D];浙江大学;2009年
8 邱丽娟;厌氧颗粒污泥对活性黑KN-B染料的生物降解脱色研究[D];东华大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 齐云阶;张国欣;崔宝臣;李睿;杨鹤红;;光合细菌混合菌群产氢影响因素[J];大庆石油学院学报;2010年04期
2 李立敏;黎刚;李柳;;高效优势菌在焦化废水处理中的应用[J];燃料与化工;2006年03期
3 胡凌燕;孙东平;邵涛;陈纪昆;周伶俐;;混合菌群的筛选及其与白腐真菌串联降解石油的效果初探[J];化学与生物工程;2007年05期
4 王电站;周立祥;;好氧颗粒污泥法降解苯胺的特性[J];中国环境科学;2010年04期
5 王亮;王磊;李风亭;张士萍;刘华;;机油高效降解菌群筛选及降解效果初探[J];环境污染与防治;2007年06期
6 康健;高健;吴学玲;丁建南;邱冠周;;混合菌群诱变及诱变菌群对闪锌矿浸出的影响[J];中南大学学报(自然科学版);2007年03期
7 唐玉斌;孙常宇;陈芳艳;郁昉;;木糖氧化无色杆菌及混合菌群对多环芳烃的降解特性[J];环境工程学报;2010年07期
8 于艳玲;冯玉杰;高霏;于丽新;徐琛;;降解未处理纤维素厌氧混合菌群的筛选及功能[J];哈尔滨工业大学学报;2011年02期
9 刘建忠;王乾;颜家保;秦晓蓉;李凌凌;;苯酚高效降解菌的筛选及其降解特性研究[J];武汉科技大学学报;2011年04期
10 冯玉杰;李冬梅;任南琪;;混合菌群用于纤维素糖化和燃料酒精发酵的试验研究[J];太阳能学报;2007年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 马挺;李丹;李国强;梁凤来;刘如林;;混合菌群对石油烃的协同降解作用研究[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
2 何丽媛;唐霞;党志;易筱筠;;高效石油降解菌群的构建及降解特性的研究[A];第五届全国环境化学大会摘要集[C];2009年
3 何丽媛;党志;;混合菌对石油的降解及其降解性能的研究[A];第三届全国农业环境科学学术研讨会论文集[C];2009年
4 萨如拉;贾晓珊;杨小毛;;六氯苯厌氧降解混合菌群群落结构分析[A];持久性有机污染物论坛2008暨第三届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集[C];2008年
5 冯玉杰;李冬梅;张秋桌;;混合菌群用于木质纤维素糖化的实验研究[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];2005年
6 吴奕瑞;胡忠;伦镜盛;;海洋沉积物来源的混合菌S6降解苯并[a]芘的研究[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
7 张金平;阚振荣;;混合菌群对实际染料废水的脱色与降解[A];“环境与健康”学术研讨会论文摘要集[C];2007年
8 雷志敏;东耀峻;钟林生;龙星;;产黑色素普氏菌核酸探针的制备、鉴定[A];全国第四次牙体牙髓病学术会议论文汇编[C];1995年
9 李颖;蔡宝立;;通过质粒分子育种培育高效降解阿特拉津的菌株[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
10 佘跃惠;张凡;舒福昌;张学礼;王正良;周玲革;赵勇;赵立平;;油田污水污泥中以液蜡和聚丙烯酰胺(PAM)为营养源的微生物群落及功能分析[A];首届全国微生物基因组学学术研讨会会程与论文摘要集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前2条
1 安徽省饲料工作办公室 王明辉;抓饲料安全,如何才能“纲举目张”[N];中国畜牧兽医报;2006年
2 本报记者 高杰;驯化“小精灵” 专啃“硬骨头”[N];中国环境报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 江皓;甲烷氧化混合菌群的富集培养及其治理瓦斯工艺研究[D];清华大学;2010年
2 张放;混合菌群厌氧发酵的代谢模型及其过程控制[D];中国科学技术大学;2013年
3 尹亮;混合菌群共培养对偶氮染料的协同脱色及降解的研究[D];华南理工大学;2009年
4 王亮;机油降解菌群的驯化及其活性与结构分析[D];同济大学;2007年
5 黄振兴;厌氧菌群发酵制氢的定向强化及其机制解析[D];江南大学;2013年
6 王楠希;微生物降解除草剂苯磺隆的相关研究[D];中国科学技术大学;2013年
7 宗文明;暗—光耦联两步法生物制氢及相关技术的研究[D];安徽农业大学;2009年
8 蔡萌萌;剩余活性污泥中的微生物利用实际废液合成聚羟基烷酸酯[D];哈尔滨工业大学;2009年
9 胡娟;强化生物活性炭工艺深度处理MTBE微污染水源水的基础研究[D];华东理工大学;2012年
10 戚峰;生物质高效水解及发酵产氢的机理研究[D];浙江大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄媛媛;混合菌处理乳制品废水的效能研究[D];湖南农业大学;2011年
2 姜丹;高PHB含量的甲烷氧化混合菌群筛选及开放培养[D];哈尔滨商业大学;2012年
3 杨丽卿;偶氮染料派脱色菌的选育及脱色效果研究[D];吉林大学;2013年
4 施展;海洋柴油降解菌性能的优化及其生物载体的研究[D];苏州大学;2012年
5 范凤霞;混合菌群FF对活性黑5的脱色降解研究[D];东华大学;2013年
6 董丽娟;聚乙烯醇生物降解性能的研究[D];南京理工大学;2005年
7 周瑞;高效溶藻细菌混合溶藻特性的初步研究[D];华中师范大学;2006年
8 高霏;纤维素厌氧降解菌群的筛选及其降解性能分析[D];哈尔滨工业大学;2007年
9 张运海;利用混合菌群合成聚羟基烷酸酯工艺条件优化[D];哈尔滨工业大学;2010年
10 王毅;光合细菌产氢基质代谢实验研究[D];河南农业大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026