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《东华大学》 2009年
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RP-HPLC法测定化妆品中黄芪、甘草、丹参有效成份的研究

王改香  
【摘要】:当今世界化妆品的发展趋势是倡导绿色、环保和安全并追求功效,近年来,以作用温和又具有一定功效的中草药提取物为天然添加剂应用于化妆品中已成为新产品开发的热点。目前国家有关部门对化妆品的质量管理,仅限于对化妆品的安全性方面的检测,而对中草药化妆品有效成份的定性定量分析,尚属空白。 本文利用衍生化试剂,对于黄芪主要功效成份—黄芪甲苷和甘草的主要功效成份—甘草酸进行了柱前衍生,首次建立了反相高效液相色谱测定化妆品中黄芪甲苷、甘草酸、丹参酮ⅡA(丹参功效成份)的方法。详细考察了衍生化反应及色谱分离分析的最佳条件。通过单因素分析,讨论了衍生化试剂的用量、衍生化反应时间、衍生化反应温度对衍生化反应效果的影响,优化了最佳衍生化反应条件;通过对流动相、流速、柱温及检测波长的研究,优化了最佳色谱分离分析条件。 在最佳衍生化和色谱条件下,建立了黄芪甲苷、甘草酸和丹参酮ⅡA的反相高效液相色谱测定法,考察了所建方法的线性范围、精密度、检出限和准确度,并将所建方法用于三种草药提取液和含三类草药化妆品中相应功效成份的分析,研究了所建方法的可行性。同时考察了所建方法用于实际样品测试的重现性。 对于黄芪甲苷,以3,5-二硝基苯甲酰氯为柱前衍生化试剂,Phenomemex C_(18)(5μm,4.6mm×150mm)柱分离,甲醇:0.01mol·L~(-1)磷酸二氢钾(H_3PO_4调节pH=3.5)=60:40(v/v)洗脱,紫外(230nm)检测。所建黄芪甲苷分析方法的线性范围为5.0~100.0μg·mL~(-1),回归方程为y=478944+2132x(其中y为衍生物的峰面积,x为黄芪甲苷的浓度),相关系数R=0.9986,精密度为1.56%(c=40.0μg·mL~(-1),n=6),检出限为1.2μg·mL~(-1),平均加标回收率为98.6%。 对于甘草酸,用对硝基溴化苄作为柱前衍生化试剂,PhenomemexC_(18)(5μm,4.6mm×150mm)柱分离,乙腈:3%冰醋酸=60:40(v/v)为流动相,紫外(290nm)检测。柱温为室温,流速为1.0mL·min~(-1)。所建甘草酸分析方法的线性范围为10.0~100.0μg·mL~(-1),回归方程为y=4032x+269413(其中y为衍生物的峰面积,x为甘草酸的浓度),相关系数R=0.9951,精密度为1.67%(c=10.0μg·mL~(-1),n=6),检出限为1.5μg·mL~(-1),平均加标回收率为97.7%。 对于丹参酮ⅡA,本文采用Phenomemex C_(18)(5μm,4.6mm×150mm)柱分离,甲醇:水=85:15(v/v)洗脱,紫外(270nm)检测,柱温为30℃,流速为1.0mL·min~(-1)。所建丹参酮ⅡA分析方法的线性范围为1.0~10.0μg·mL~(-1)和10.0~10.0μg·mL~(-1),回归方程分别为y=280591+72704x和y=81572+97483x(其中y为色谱峰面积,x为丹参酮ⅡA的浓度),相关系数R均为0.9992。
【学位授予单位】:东华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:TQ658

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