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《上海海洋大学》 2012年
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半滑舌鳎多倍体的人工诱导及三倍体生长与发育的研究

李文龙  
【摘要】:半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)隶属于鲽形目(Pleuronectiformes)舌鳎科(Cynoglossidae),是我国特有的一种名贵经济海水鱼类,属于近海温水性底层鱼类,我国沿海均有分布,以黄海、渤海为多。市场价值极高,养殖前景非常广阔,是目前我国北方沿海海水鱼类养殖的主要品种之一。不过,研究表明,半滑舌鳎雌性个体和雄性个体,在生长速率上存在很大差别,其雌性个体比雄性个体大3-4倍,由于雄性个体生长过慢,降低了半滑舌鳎的养殖产量,增加了养殖成本,严重影响了半滑舌鳎苗种的推广及养殖产业的发展,因此,培育优质、高产、抗逆性强的新品种,对于半滑舌鳎苗种的推广及其养殖业的发展具有重要意义。 由于三倍体鱼潜在的不育性,而四倍体与二倍体杂交又可获得大量的三倍体,运用染色体操作技术进行半滑舌鳎多倍体诱导技术的研究无疑是一个有效手段。因此,我们采用静水压休克法对半滑舌鳎四倍体及三倍体的人工诱导技术进行了研究,并以诱导获得的半滑舌鳎三倍体鱼为材料,对其性腺发育、性别比例及生长方面进行了跟踪研究。现将主要研究结果报道如下: 开展了人工诱导半滑舌鳎四倍体鱼苗的研究,采用静水压处理抑制半滑舌鳎受精卵卵裂进行染色体加倍,筛选出有效的静水压处理起始时间、处理强度及其持续时间。结果表明在孵化水温23±0.2℃时,受精后21.5min,采用40MPa的静水压压力,持续休克处理4.5min,四倍体诱导效果最好,鱼苗四倍体率达到68.3%。采用流式细胞仪分析了四倍体鱼苗细胞DNA相对含量,表明四倍体鱼苗细胞DNA相对含量为二倍体对照组鱼苗的2倍。通过染色体制作分析表明四倍体鱼苗的染色体数为84条,而二倍体对照组鱼苗的染色体数为42条。本研究采用静水压方法,在国内外首次建立了半滑舌鳎四倍体诱导方法。 针对半滑舌鳎雌雄个体生长差异过大、雌性性腺发育成熟后腹部凸起、影响舌鳎生长和商品鱼质量等问题,本文开展了人工诱导半滑舌鳎三倍体的研究。采用静水压处理抑制半滑舌鳎受精卵第二极体排出进行染色体加倍,筛选出有效的静水压处理强度及其持续时间。结果表明在孵化水温23±0.2℃时,受精后5min,采用36MPa的静水压压力,休克处理4min,三倍体率最高,达到100%。采用该诱导条件,大批量获得了半滑舌鳎三倍体鱼苗。采用流式细胞仪分析了三倍体鱼苗细胞DNA相对含量,表明三倍体鱼苗细胞DNA相对含量为二倍体对照组鱼苗的1.5倍。通过染色体分析表明三倍体鱼苗的染色体数为63条,而二倍体鱼苗的染色体数为42条。本研究采用静水压方法,在国内外首次建立了半滑舌鳎三倍体鱼苗诱导方法,诱导鱼苗的三倍体率最高可达100%。 以人工诱导获得的半滑舌鳎三倍体群体为材料,对其性腺发育、性别比例及生长方面进行了跟踪研究。对240日龄的半滑舌鳎三倍体性腺发育的研究发现,无论是从解剖学观察还是从组织学观察,三倍体半滑舌鳎的性腺发育与同时期二倍体鱼相比明显受阻;对240日龄的半滑舌鳎三倍体进行表型性别和遗传性别鉴定,均显示三倍体鱼雌性比例仅为11%,显著低于二倍体群体;而对生长方面的初步研究结果是,在240日龄以前,半滑舌鳎三倍体与二倍体在全长、体重两方面增长速度较一致,没有显著差异。这些研究结果为半滑舌鳎多倍体育种技术的理论基础提供了数据支持。
【学位授予单位】:上海海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S965

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【参考文献】
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