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《上海海洋大学》 2012年
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养殖许氏平鲉两种细菌性病原的分离、鉴定及组织病理学研究

王庚申  
【摘要】:许氏平鲉是我国北方地区海水网箱养殖的重要经济鱼类之一,因其生长快、耐低温、肉质鲜美,深受养殖者和消费者的喜爱。然而,随着养殖规模的扩大、集约化程度的提高,加之疾病防控技术水平不高,造成许氏平鲉病害尤其是细菌性疾病时有发生,给广大养殖业者造成了较大的经济损失。 2011年8月,青岛某养殖场网箱养殖许氏平鲉爆发皮肤溃疡病,累积死亡率达到30%,病鱼主要症状为体表全身性充血、溃烂,解剖可见腹腔有血色积水,肝脏不同程度肿胀、充血,脾、肾肿大,呈糜烂状;2011年7月,烟台某养殖场网箱养殖许氏平鲉爆发鱼肠道弧菌病,死亡率达到30%~40%,主要表现为嘴部、鳃盖及鳍条充血,胸鳍及尾鳍腐烂,解剖发现腹腔有积液,肝脏大面积充血,肠道有黄绿色脓液流出。从两例病鱼样品中分别分离得到1株优势菌,其中分离自青岛病例的菌株标号为SS-1,分离自烟台病例的菌株标号为SS-3。本研究对两株致病菌的形态学特征、生理生化特性、16S rRNA基因序列同源性、致病性和药物敏感性进行了研究,并对病鱼的组织病理变化进行了观察分析。 菌株SS-1为革兰氏阴性菌,弧形短杆状,两端钝圆,极生单鞭毛;生理生化结果表明该菌与鳗利斯顿氏菌生理生化指标相符;对该菌16S rRNA基因序列分析,结果显示该菌与鳗利斯顿氏菌同源性最高,因此,将其鉴定为鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)。经人工感染实验证实该菌对健康的许氏平鲉具有较强的致病性,且感染症状与自然发病症状相似。该菌对复达欣、氟罗沙星、萘啶酸、新生霉素等抗生素药物高度敏感。 对感染皮肤溃疡病的许氏平鲉进行组织病理观察,结果显示病鱼鳃丝的鳃小片充血,上皮细胞和粘液细胞增生、坏死、脱落,造成鳃小片变短、变粗、相互粘连;肌纤维断裂、坏死,结构溶解,肌纤维之间有血细胞浸润;肝脏组织发生明显的脂肪变性,肝细胞坏死、溶解、结构模糊;脾脏组织坏死,结构不整,出现褐色斑块;肾小管结构模糊,相互融合,管腔消失,红细胞数量减少;肠粘膜上皮细胞脱落,固有层坏死,肠壁肌肉层充血、发炎,明显的组织增生。 菌株SS-3为革兰氏阴性菌,短杆状,两端钝圆,端生一根鞭毛;通过测定该菌的16S rRNA基因序列,并结合细菌形态学和生理生化实验结果,将该菌鉴定为鱼肠道弧菌(Vibrio ichthyoenteri)。经人工感染实验证实该菌对健康的许氏平鲉具有较强的致病性,感染症状与自然发病症状相似。药敏实验结果表明该菌对青霉素、菌必治、氟罗沙星、克拉霉素、丁胺卡那、美满霉素等多种药物高度敏感。 感染该菌的许氏平鲉病鱼鳃丝充血,鳃小片上皮细胞增生、坏死、脱落,炎性细胞浸润,鳃小片相互粘连;肌肉组织淤血,血细胞富集,肌纤维细胞变性、坏死,炎性细胞浸润,形成结节;肝细胞空泡变性,细胞结构模糊,肝血窦、毛细血管淤血;脾脏充血,细胞坏死,结构模糊,HE染色呈褐色;肾小管萎缩,上皮细胞脱落,管腔消失,肾间质充斥大量红细胞;肠绒毛严重萎缩,上皮细胞坏死、脱落,肌肉层出血,炎性细胞浸润。 根据细菌分离和组织病理学观察结果,两种致病菌感染许氏平鲉后都能造成鱼体多种组织和器官的损伤,并引起大量死亡,对养殖生产危害较大。 本论文率先对许氏平鲉皮肤溃疡病和鱼肠道弧菌病的流行症状、病原及组织病理变化进行了报道。确定了两种疾病的致病原、测定了其药物敏感谱、分析了两种疾病的组织病理特征,为许氏平鲉的健康养殖和疾病防控提供科学依据和参考。
【学位授予单位】:上海海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S943

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