收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

丝瓜籽核糖体失活蛋白的纯化及其性质的研究

王小娟  
【摘要】:Luffin-B 是一种从丝瓜(Luffa cylindrica)籽中分离纯化出来的单链核糖体失活蛋白,是目前发现的活性最高的单链核糖体失活蛋白之一。但是以往纯化 Luffin-B的常规方法中的得率并不高,只有0.01%左右。所以本研究在前人纯化Luffin-B的方法基础上作了一些改进:1、由于Luffin-B的等电点在10左右,属于碱性蛋白质,所以本研究用冰醋酸将其粗提液的pH值调节到4.2,进行了一次酸性沉淀,以除去大部分酸性蛋白质,然后又采用50-85%的硫酸铵分级饱和沉淀法除去大部分杂蛋白,这样Luffin-B粗提液中的杂蛋白就少了很多,便于更好的纯化Luffin-B。2、在将Luffin-B的粗提液进行CM-52阳离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析后,首次尝试采用Superdex 75 HR 10/30高效凝胶过滤层析进一步纯化Luffin-B,取得了很好的纯化效果,可以从100 g丝瓜籽中纯化到42.92g Luffin-B,得率接近于0.043%,比以往纯化方法的得率要高很多。这为以后开展Luffin-B的进一步深入研究提供了很好的基础。 用SDS-PAGE蛋白质变性电泳测定Luffin-B的分子量约为28KDa,这与文献中报道的一致。大鼠肝核糖体在Luffin-B和苯胺作用后产生明显的特征性的R-片断,表明Luffin-B属于典型的RNA N-糖苷酶型核糖体失活蛋白。它对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有强烈的抑制作用,半抑制剂量IC_(50)约为2.1×10~(-11)M,其活力比天花粉蛋白的IC_(50) (约为2.8×10~(-10)M)强很多,有望成为肿瘤导向药物的高效“弹头”。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘桂智,刘微,宋士清,高书国;丝瓜的药用价值[J];北方园艺;2003年03期
2 潘东曙;;灵验便方四则[J];农村新技术;2011年19期
3 盛锋;丝瓜籽油的提取[J];农牧产品开发;1999年09期
4 宋士清,刘桂智,刘微,高书国;丝瓜的药用价值研究概述[J];中国农学通报;2004年02期
5 樊常宝;巧用菜种治病[J];农村新技术;1996年01期
6 ;蔬菜种子可治病[J];云南农业;1999年02期
7 赵爱国,赵应征;丝瓜浑身是宝[J];农村新技术;1997年06期
8 郎进宝;张永成;汪红燕;朱万云;孙颖;梁开杰;;翠妃等4个苦瓜良种[J];长江蔬菜;2010年09期
9 秀容;冬前是驱蛔的最好时机[J];致富之友;1994年12期
10 ;民间小偏方[J];农村.农业.农民(B版);2010年04期
11 李莲芳,孙怀志;丝瓜的食用与药用[J];蔬菜;1999年09期
12 陈杏禹,王敬华;丝瓜及其栽培技术[J];西北园艺;1999年06期
13 李子清;鲜食百香果品种——紫星[J];农村实用技术;2003年05期
14 于翠兰,田洪,高喜才;蔬菜新品种──金丝瓜1号及其育苗栽培技术[J];农业科技通讯;1998年09期
15 张振林;开发潜力极大的无蔓金丝瓜[J];中国农村科技;2000年10期
16 刘斌,杨远柱,刘选明,牛福清,刘俊;不同激素组合对丝瓜离体快速繁殖的调控[J];生命科学研究;2002年S2期
17 王增如;最后的玫瑰[J];中国花卉园艺;2002年12期
18 王小荣,刘选明,刘斌;不同激素组合对苦瓜离体快速繁殖的调控[J];湖南师范大学自然科学学报;2003年04期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 李丰;夏恒传;杨欣秀;卫军;李臻;平蓓芳;张祖传;;丝瓜籽中一种新型具有多种生物活性的多肽的分离、纯化及性质研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
2 李丰;卫军;李臻;杨欣绣;夏恒传;平蓓芳;张祖传;;一种新的具有多种(体外)生物活性的丝瓜籽多肽[A];中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会第4次、中国生物化学与分子生物学会毒素专业组第5次学术研讨会论文摘要[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 李丰;丝瓜籽和栝楼籽中的小分子核糖体失活蛋白(肽)的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2003年
2 邰宁文;葫芦科植物种子中两种新型小分子核糖体失活蛋白的分离、纯化和性质研究[D];中国农业科学院;2000年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 王小娟;丝瓜籽核糖体失活蛋白的纯化及其性质的研究[D];华东师范大学;2004年
2 徐小蓉;丝瓜籽蛋白Luffin-a的基因克隆和表达[D];浙江大学;2005年
3 倪英萍;丝瓜籽及柏子仁中有效成分的研究[D];华东师范大学;2007年
4 杜洽军;丝瓜核糖体失活蛋白luffin-b基因的快速克隆、表达及体外定向进化的初步研究[D];兰州大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 姚继霞;丝瓜药用知多少[N];上海中医药报;2002年
2 河南省洛阳正骨医院 张虹;巧用中药外治腰痛[N];中国中医药报;2008年
3 周继红;盛夏丝瓜赛人参[N];检察日报;2000年
4 郭振东;丝瓜的药用[N];山西科技报;2003年
5 李强;哥斯达黎加大力推广丝瓜种植[N];国际经贸消息;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978