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《华东师范大学》 2004年
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金耳胞外多糖的结构分析及其生物学活性的探讨

邓云霞  
【摘要】:本文首先对从发酵液中提取的金耳胞外多糖进行了分离纯化并对其结构作了初步研究。经化学方法测定,金耳胞外多糖含多糖51.8%,硫酸基0.64%,糖醛酸12.8%。经TLC和高效液相色谱(HPLC)分析金耳胞外多糖由岩藻糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组成。金耳胞外多糖经DEAE-Sephadex A-25、Sephadex G-200分离纯化后得到两个多糖单组分a、b;并通过薄层层析、高碘酸氧化、Smith降解、α-淀粉酶酶解、纤维素酶酶解、红外光谱(IR)等初步分析了其结构。结果表明:金耳胞外多糖组分a、b均有半乳糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、岩藻糖组成,且分子中均存在1→3、1→4及1→6糖苷键或分枝末端基,α-糖苷键和β-糖苷键并存。 为了弄清金耳胞外多糖的生理作用,进而对动物血糖的影响进行了研究。正常小鼠每天以100mg/kg、200mg/kg、300mg/kg剂量灌服金耳胞外多糖,发现对正常小鼠血清葡萄糖无影响;3w时金耳胞外多糖给药组的胆固醇水平均较对照组低。其中200mg/kg、300mg/kg剂量组与对照组相比均有显著性差异。采用L-α-丙氨酸进行糖异生实验结果显示:对照组血糖升高幅度大于给药组,其糖异生率值最高,灌药各组均有抑制糖异生的作用。 连续灌胃金耳胞外多糖21d(剂量同前),然后腹腔注射200mg/kg的STZ诱导高血糖模型鼠,其血清葡萄糖水平与对照组无显著差异,但造型死亡率却显著降低。 57mg/kg剂量腹腔注射STZ致高血糖大鼠模型实验中,全程28d,金耳胞外多糖组按150mg/kg.d、二甲双胍组按200mg/kg.d剂量灌胃。14d、21d、28d时金耳胞外多糖组血清葡萄糖水平均低于对照组,但却未达到显著水平(P0.05)。28d时金耳胞外多糖组大鼠的血清葡萄糖、血清胆固醇、甘油三酯、果糖胺水平及体重与对照组相比无显著性差异(P0.05)。 按130mg/kg剂量腹腔注射Alloxan致高血糖大鼠模型实验结果显示金耳胞外多糖灌胃组与阳性对照组相比无差异(P0.05)。 本文为了探究上述实验结果出现的机理,进一步利用体外实验进行了研究。 对H_2O_2诱导红细胞氧化溶血作用的影响实验显示,金耳胞外多糖在浓度大于0.8(终浓度大于0.11mg/ml)时能显著抑制诱导大鼠红细胞氧化溶血。对大鼠肝 摘要 组织自发性MDA的影响及对FeZ十一Vitc诱导大鼠肝脂质过氧化的影响实验结果显 示浓度为0.5、0.7mg/m1(终浓度为0.045、0.064mg/ml)的金耳胞外多糖组的大 鼠肝组织自发性MDA含量均显著低于对照组(P0.01);抑制率分别达到41.1%、 50.9%。金耳胞外多糖各组大鼠肝组织中的产生MDA含量均显著低于Fe2+一vitc 对照组(P0 .05、P0 .01)。此外,大鼠肝线粒体经Vc和 Fe2+诱导后,模型组肿 胀程度增加,随着反应时间的延长肿胀越明显。加入不同浓度的金耳胞外多糖后, 在相同的时间里,线粒体的膨胀受到明显地抑制。 体外Q一葡萄糖普酶实验揭示金耳胞外多糖对Q一葡萄糖昔酶无抑制作 用。 体外蛋白糖基化的影响实验显示:金耳胞外多糖具有抑制体外蛋白质非酶糖 基化的作用,但作用不显著(与AG、M阳相比),最高抑制率仅达27%。 碳粒廓清实验测定巨嗜细胞吞噬功能发现:金耳胞外多糖组廓清指数显著高 于对照组(P0 .05),脾指数在统计学上无显著差异(P.05),但有增加趋势。 综合上述实验结果,金耳胞外多糖对动物的血糖水平无影响,无改善高血糖 状态下动物的血清葡萄糖水平作用。但金耳胞外多糖具有较高的轻基自由基清除 能力,对蛋白质非酶糖基化有一定抑制作用。预防实验金耳胞外多糖能显著降低 STZ诱导高血糖模型小鼠的死亡率。同时,金耳胞外多糖有增进机体免疫功能的 作用。
【学位授予单位】:华东师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:Q946

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