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《华东师范大学》 2009年
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ATP生物发光法检测水中细菌数的研究

毛映丹  
【摘要】: 水中菌落总数的测定是水质监测的一项重要指标,它直接反映了水体的细菌污染程度。目前水体菌落总数测定采用国标平皿计数法即37℃恒温培养24h,该方法耗时长且操作复杂,不利于水质的即时监测。因此,确定一套快速有效的菌落总数测定方法有可能成为未来水质监测的发展方向。 本论文作为对ATP生物发光法的实际应用研究,通过测定实验室已知菌种不同OD_(600)值,并对相应的OD_(600)值同时进行平板计数和ATP生物发光强度的测定,得到两种方法的相关方程,继而测定细菌数较多的水样以及细菌含量较少的市售矿泉水;提高ATP生物发光法检测微生物数量的极限值,从而使得该方法在方便快速的同时,达到卫生学检验的要求。 本论文运用ATP生物发光技术,首先研究实验室已有的菌种(大肠杆菌和金黄葡萄球菌)不同OD_(600)值(0.05、0.1、0.2、0.3和0.4)各稀释度的菌液的平板计数和发光强度之间的关系,得到了较好的线性关系,并得到了大肠杆菌的ATP含量平均为1.38×10~(-18)mol/cfu,最低检测极限OD_(600)为5.0×10~(-7);金黄葡萄球菌的ATP含量平均1.25×10~(-18)mol/cfu,金黄葡萄球菌的最低检测极限OD_(600)为2.0×10~(-5)。 在实验室已知菌种的实验基础上,通过测定待测水体样品的发光强度,根据得到的每个细菌ATP含量和ATP生物发光强度与平板计数之间的方程式,推算出细菌含量,达到快速测定水体中细菌数的目的。本论文将该技术实际应用在不同类型水体(淡水水体、市售矿泉水和饮水机出水)中,并系统分析了反应中的各种影响因素,包括浮游生物、游离态ATP等几种影响因素对反应的影响程度的大小,并提出相应的措施,去除干扰,以优化ATP生物发光法,为ATP生物发光法检测水中细菌数的实际应用提供科学依据。结果表明:丽娃河、银锄湖和苏州河三种水体测定结果显示两种方法差异较大;对于细菌含量较少的矿泉水和桶装水,受试剂和仪器灵敏度的限制,未能检测出;而对矿泉水加一定浓度的细菌后,两种方法测定的结果比较吻合。因此,ATP方法对实验室菌种具有很好的应用价值,而对于复杂的包含多种微生物的样品,则需要进一步探索研究。
【学位授予单位】:华东师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R123.1

【引证文献】
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【参考文献】
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【同被引文献】
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