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《华东师范大学》 2009年
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香桃木叶非精油组分清除自由基、抗氧化及抗肝癌细胞BEL7404的作用研究

方献平  
【摘要】: 现已研究证实许多疾病的诱发促进机制涉及到自由基的产生。自由基清除剂在清除机体自由基、保护机体免受氧化损害中起重要作用。因此,近年来自由基清除剂的研究深受关注,其中芳香植物的抗氧化作用是研究热点之一。目前国内外对芳香植物精油含量和精油成分的研究较多,但对芳香植物非精油组分清除自由基、抗氧化作用及对癌细胞的作用研究甚少。 本研究选取香桃木干燥叶片,在提取精油后对其残渣分别采用水、甲醇-水和乙酸乙酯提取法进行提取,采用6种生物化学发光法和2种分光光度法比较系统地检测了3种提取物直接清除自由基、抗脂质过氧化及对羟自由基(·OH)引起DNA氧化损伤的保护作用。并以体外培养的肝癌细胞(BEL7404)为实验材料,检测香桃木叶非精油组分水提取物、甲醇-水提取物对BEL7404内源性超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,以及对还原型谷胱苷肽(GSH)、丙二醛(MDA)和过氧亚硝基(ONOO~-)浓度的影响,并通过MTT法和流式细胞仪检测香桃木叶非精油组分水提取物、甲醇-水提取物对BEL7404生长状态的影响。 直接清除自由基的实验结果表明,香桃木叶非精油组分的3种提取物不但能直接清除超氧阴离子自由基(O_2~-·),也能有效地清除·OH、H_2O_2、二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)、ONOO~-和碳酸根阴离子自由基(CO_3~-·),并且均能抑制脂质过氧化反应和明显抑制及延缓DNA的氧化损伤。 细胞学实验结果表明:香桃木叶非精油组分的水提取物、甲醇-水提取物可抑制BEL7404的增殖并改变其细胞周期,也可剂量依赖性地提高BEL7404内SOD、CAT活性及GSH水平,同时抑制细胞内外的ONOO~-和MDA的产生。表明香桃木叶非精油组分的水提取物、甲醇-水提取物具有提高BEL7404抗氧化酶的活性及直接清除活性氧(ROS)、活性氮(RNS)的双重作用,提示其有可能具有减轻和预防与自由基相关的肝部疾病的作用。 本研究也检测了香桃木叶提取物的组分,发现水提取物、甲醇-水提取物和乙酸乙酯提取物都含有一定含量的黄酮类和酚类物质,且发现3种提取物抗氧化能力强弱与黄酮类含量多少有一定相关性,提示黄酮类化合物是其抗氧化的有效成分之一。 上述实验结果表明香桃木叶非精油组分是一种有效的多功能的自由基清除剂和天然抗氧化剂,有着良好的应用前景,本研究为进一步的开发香桃木的应用价值,提高其利用率,特别是拓展其在医疗和营养保健方面的功用提供了重要的应用依据。
【学位授予单位】:华东师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R285;R735.7

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