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农药2,4-D与通用Ⅱ型拟除虫菊酯完全抗原和多克隆抗体制备

许啸晨  
【摘要】:随着农业产业的快速发展,农药杀虫剂与除草剂等降低虫害和提高产量农药产品在农业领域中广泛应用。由于农药使用不当和过量使用,导致过量的农药残留而引发食品安全问题,引起了全世界食品安全领域的广泛重视。所以美国、欧盟等发达国家相继严格限用和禁止使用农药,从而产生对农残检测的需求。而传统的农药残留分析方法需要复杂的仪器和专业技术人员,不能满足在大批量检测的要求。因此建立高效、灵敏的残留分析方法具有重要意义。因此,本文利用酶联免疫分析法(Elisa)技术,建立2,4-D与通用Ⅱ型拟除虫菊酯检测Elisa检测体系。 对采用两种2,4-D合成方法免疫原注射4只新西兰兔,抗2,4-D兔血清采用直接Elisa法测定效价,并对其中对3号兔血清进行间接Elisa竞争法测定。结果表明采用混合酸酐法的3号兔抗2,4-D兔血清半抑制率分别为半数最大抑制浓度为121.9ng/ml(IC50=121.9ng/ml)。对不同免疫原免疫,效价不同的抗2,4-D血清进行荧光淬灭检测,获得抗体结合常数为3529.393mol/l和252.8716mol/l。 对2只新西兰兔采用DCC法合成通用Ⅱ型拟除虫菊酯免疫原,获得通用Ⅱ型拟除虫菊酯抗血清,采用通用Ⅱ型拟除虫菊酯兔抗血清采用直接Elisa法测定效价,结果为1024000,间接竞争法测定IC50对氯氰菊酯为0.313μg/ml,氰戊菊酯IC50为0.374μg/ml,氰氟菊酯IC50为0.354μg/ml,氯菊酯IC50为0.375μg/ml。


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