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《上海师范大学》 2004年
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洋桔梗叶片再生体系的建立及农杆菌介导的NPRI基因转化洋桔梗的初步研究

毛元荣  
【摘要】: 通过正交等实验对洋桔梗品种LisaBlue叶片再生体系进行了系统的研究。结果表明:洋桔梗叶片不定芽诱导最适培养基为MS+ZT 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L,培养基pH值6.3,光照强度60μmol.m~(-2).s~(-1);不定芽诱导生根最适培养基为1/4MS+IBA 1mg/L,糖浓度50g/L,琼脂浓度4g/L,不添加活性炭。 通过洋桔梗抗生素敏感性实验,确定了洋桔梗转化不定芽筛选抗生素(潮霉素,Hyg)浓度为50mg/L:抑菌抗生素采用浓度为250mg/L的头孢霉素。 以洋桔梗叶盘为外植体,通过根瘤农杆菌菌株EHA105介导,用构建于质粒pCambia 1301的NPR1基因转化洋桔梗。实验结果表明:叶片预培养2d,农杆菌浸染20min,与农杆菌共培养2d时,筛选培养基上洋桔梗叶盘不定芽分化频率最高,达13.3%。 随机选取4株移栽成活的具有Hyg抗性的洋桔梗植株进行GUS染色和PCR分子检测,均为阳性,初步证明外源NPR1基因已整合到洋桔梗基因组中。
【学位授予单位】:上海师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:Q943

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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1 何毅敏;海藻糖基因表达载体构建及转化洋桔梗研究[D];昆明理工大学;2009年
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【参考文献】
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【共引文献】
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8 马艳芝;张玉星;;梨属植物基因组DNA提取部位对RAPD扩增的影响[A];第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集[C];2009年
9 钟淮钦;黄敏玲;林兵;叶秀仙;吴建设;;鹤望兰花色素合成相关结构基因的克隆与初步分析[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
10 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
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5 冯守千;红梨着色机理的研究[D];山东农业大学;2011年
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2 张庆福;枳精氨酸脱羧酶基因(PtADC)转化烟草提高抗脱水研究[D];华中农业大学;2010年
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4 张鲁军;离子束诱导普通小麦小偃81 HMW-GS 1Ax1缺失突变家系突变机制研究[D];郑州大学;2010年
5 刘无双;拟南芥种子特异表达基因启动子分析[D];山东农业大学;2010年
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9 赵云霞;马铃薯L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶基因在番茄中的功能分析[D];山东农业大学;2010年
10 霍凤梅;洋葱种质资源遗传多样性的SRAP分析与查尔酮合成酶基因的分子克隆与表达研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 詹革胜,黄新,傅玉兰;植物激素在洋桔梗组培快繁中的应用效果[J];安徽农学通报;2004年06期
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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【二级引证文献】
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1 袁霖;魏迟;贾桂霞;;花青素合成调节基因Rosea1转化东方百合索邦的研究[J];广东农业科学;2012年10期
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3 周雨隆;as和chr基因表达载体构建及转化洋桔梗研究[D];昆明理工大学;2009年
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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5 徐培洲;油葵再生体系的建立及葡聚糖酶和几丁质酶双价基因转化的研究[D];新疆农业大学;2003年
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9 周祥明;欧美杨等再生体系的建立及其抗逆境基因转化的研究[D];东北林业大学;2003年
10 黄建;农杆菌介导S6PDH基因转化枣树(Zyziphus jujube Mill.)的研究[D];西北农林科技大学;2006年
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