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《上海师范大学》 2005年
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霍山石斛遗传稳定性RAPD研究及位点特异性PCR鉴别

刘石泉  
【摘要】:我国现有的76 种石斛属植物中,具药用的就有40 多种。其药理主要是强阴益精、补肾益力、明目和延年益寿。霍山石斛(Dendrobium huoshanense.C.Z.Tanget S.J.Cheng)又名米斛,兰科石斛属植物,原产安徽霍山,是药用石斛中的极品。由于石斛是一种附生植物,对生态环境要求比较严格,自然繁殖频率极低(5%),加上长期采集,野生植株已濒临灭绝。近年来,对药用石斛资源进行了大量研究,特别是利用组织培养的方法对多种石斛材料进行了一定的研究,很显然组织培养不但能挽救濒临灭绝的物种,而且能实现对所需求物种的快速、批量生产而满足市场需求。但对离体条件下的遗传稳定性和生理稳定性缺乏基础性研究,未能获得规范化石斛繁殖技术体系和工艺流程,从而极大的阻碍了这一名贵中草药走向市场。本研究首次报道了霍山石斛无性快繁过程中的遗传稳定性RAPD 分析及霍山石斛的位点特异性鉴别研究结果: 1. 霍山石斛不同蒴果内遗传稳定性及蒴果间的差异性:利用从20 个随机引物筛选出来的3 个稳定性较好的10 碱基引物对来自五个不同蒴果的霍山石斛种群进行RAPD 检测。结果发现五个蒴果内遗传相似系数较大,在92.5926%至100.00%之间,其中H1、H10、H9、H14 存在一定程度的变异,H23 是一个较为稳定的群体。五个蒴果间H1、H9、H10、H23 的遗传距离较小,H14 与其它四个蒴果的则较大。说明建立霍山石斛稳定的无性快繁系是切实可行的,同时说明霍山石斛种内存在一定的变异,H14 与其它蒴果的差异最大。 2. 霍山石斛同一蒴果内不同生长时期遗传稳定性:利用上述3 个引物对已继代七到八次仍然维持的不同生长阶段、来自同一蒴果的霍山石斛H23 种群进行RAPD检测。结果发现不同阶段内遗传相似系数较大,在85.4093%和98.3606%之间,其中在原球茎、萌芽期和一叶期存在的变异比两叶期、开花期要显著,但程度都极其微弱。说明来自同一蒴果的变异非常小,用组织培养的方法建立霍山石斛稳定的无性快繁系是切实可行的。 3. 2,4-D、6-BA、IBA、NAA 对霍山石斛试管苗分化及对其遗传稳定性的
【学位授予单位】:上海师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S567.239

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【引证文献】
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【同被引文献】
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