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《上海师范大学》 2005年
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产氨短杆菌Corynebacterium ammoniagenes转化乳清酸(OA)生成尿苷酸(UMP)的研究

李慧  
【摘要】:尿嘧啶核苷酸(Uridine 5’monophosphate,UMP)是一种重要的药物、药物前体和食品添加剂。本论文的目的在于研究以乳清酸为底物,利用微生物转化生成UMP。 本研究采用HPLC 法和液质联用法确证了产氨短杆菌Corynebacterium ammoniagenesR248 能将底物乳清酸转化生成UMP。研究了发酵转化和细胞转化反应体系中几种因素对R248 菌株转化UMP 的影响,结果表明,乳清酸1g/L、生物素50μg/L、pH 5.0、25℃转化培养4 天后, UMP 生成能力为420mg/L。乳清酸20g/L、细胞量20%、pH 7.2、250ml 三角瓶装液量5ml、32℃反应26 小时后,R248 的细胞转化能力为991mg/L。 采用链霉素抗性、卡那霉素抗性和产物结构类似物抗性等作为筛选手段,对产氨短杆菌R248 进行离子束和紫外诱变,选育出一株UMP 生成能力比出发菌株R248 提高7 倍突变株M14。 对高活性突变株M14 的细胞转化和发酵转化条件进行优化。结果表明,发酵转化中突变株M14 转化能力为0.98g/L;突变株M14 在乳清酸20g/L、细胞量30%、pH 8.06、葡萄糖50g/L、磷酸盐15g/L、21×180mm 试管装液量5ml、32℃细胞转化6 小时后UMP 的转化能力为2.1g/L。 产氨短杆菌R248 发酵转化和细胞转化生成UMP,高活性突变菌株M14 的选育,以及突变株M14 转化条件的优化,对进一步研究产氨短杆菌Corynebacterium ammoniagenes 转化乳清酸生成UMP 具有重要意义。
【学位授予单位】:上海师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R37

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