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《上海师范大学》 2009年
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免疫荧光法及红外光谱法在食源性致病菌检测中的研究

叶明强  
【摘要】: 食源性致病菌是指以食物为载体而导致人类发生疾病的一大类细菌。食源性致病菌的检测一直是食品检测中的最总要的检测部分之一。随着科技的进步及食品检测中要求的提高,食品检测技术在不断的朝着准确化、效率化、多元化的方向发展。 纳米科技是是20世纪80年代兴起的一门新兴交叉学科,在生物、医学、化学、环境等方面有着广泛的应用前景,纳米材料的开发和利用一直是纳米科技发展的重点,尤其是近年来,将纳米技术与生物技术相结合所产生的纳米生物技术更成为纳米科技研究的焦点之一。 本文主要研究了一种新型的免疫荧光食源性致病菌检测技术,基于纳米免疫磁珠富集,免疫量子点标记,建立了一种快速检测食品中沙门氏菌含量的方法。本文同时通过红外光谱技术结合统计分析方法对食源性致病菌进行研究。 (1)采用反相微乳液法,通过二氧化硅包裹磁性γ-Fe2O3微粒,得到高分散性,粒径均匀的核壳型磁性纳米粒子。通过修饰氨基硅烷使磁性纳米粒子具有生物相容性,然后通过连接上多克隆抗体,使得制备出的磁性纳米粒子具有生物特异性。使用EDAC作为交联剂,NHSS作为保护剂,使表面修饰有羧基的荧光量子点与多克隆抗体交联,从而制备出免疫化的荧光量子点。实验的结果表明,制备出的免疫化的磁珠分散性较好,并具有较好的生物特异性;制备出的荧光免疫量子点有较好的荧光性与生物特异性。 (2)免疫荧光技术是食源性致病菌检测中重要的方法之一。本文研究了一种新型的免疫荧光检测技术,基于免疫磁珠富集,免疫量子点标记,建立了一种快速检测食品中沙门氏菌含量的方法。在富集过程中免疫磁珠能与目标致病菌形成“磁珠-细菌”复合物。基于抗原抗体的特异性反应,免疫量子点被标记到目标致病菌上,形成(磁珠-细菌-量子点)“三明治”式复合物。通过荧光显微镜来观察量子点的荧光来测试体系中致病菌的污染情况。实验结果表明,该方法能快速的检测出污染样品中的致病菌。 (3)利用红外光谱技术(FTIR)化学分析法分析生物大分子是近年化学分析法研究的热点之一,本文中利用该技术同时结合统计分析技术的方法对多种食源性致病菌进行研究,结果表明,通过该方法能对大量的致病菌进行快速的分类,且与实际致病菌的亲缘关系一致。通过该方法如果能对大量菌种进行数据分析,就可以建立人工神经网络系统(数据库)来非常快速的检测出未知菌种的菌种以及血清型(约几分钟)。
【学位授予单位】:上海师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R155.5

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