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《上海体育学院》 2013年
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低氧对大鼠大脑皮层细胞VEGF和BDNF表达水平的影响

周跃辉  
【摘要】:研究目的 观察不同氧浓度环境下、不同时间处理对大脑皮层细胞VEGF和BDNF及其mRNA表达的影响。 研究方法 原代培养SD大鼠大脑皮层细胞,5d后将低氧组细胞转移至低氧工作站,在1%和4%氧浓度环境下分别处理3h和6h,其相应的常氧对照组细胞则继续放置于CO2孵箱中。ELISA法检测细胞上清液中蛋白的浓度,细胞内mRNA水平通过RT-PCR法检测,免疫组化双重染色法鉴定皮层细胞表型及蛋白表达情况。两组差异性比较采取t检验。每个实验独立重复3次。 研究结果 1.与对照组相比,4%和1%氧浓度环境3h组细胞VEGF mRNA及蛋白表达无明显变化(P0.05),但均有增加趋势;而6h组均引起VEGF mRNA及蛋白表达明显增高(P0.05),且1%氧浓度6h组增幅更大(P0.01)。 2.与对照组相比,4%和1%氧浓度环境3h组细胞BDNF mRNA及蛋白表达无显著变化(P0.05),但都有升高趋势;而6h组均引起BDNF mRNA及蛋白表达明显增高(P0.05),其中1%氧浓度环境下6h组BDNF蛋白增幅较大,而4%氧浓度下6h组BDNF mRNA增幅更大。 3.大脑皮层细胞在低氧处理后出现了不同程度的聚集成团生长现象。 4.低氧后,Anti-VEGF和Anti-BDNF免疫阳性的蛋白荧光信号强度增强,且与GFAP免疫阳性的星形胶质细胞重合率分别约达78%h和70%。 研究结论 1.低氧可诱导大鼠大脑皮层细胞表达VEGF和BDNF,且皮层细胞的反应性与低氧浓度和低氧刺激时间有关。 2.低氧环境可以导致皮层细胞更加倾向于聚集生长,可能与细胞的起始接种密度是否恰当相关。 3.低氧诱导皮层细胞表达的VEGF和BDNF,主要来源于神经元和星形胶质细胞,但更多来源于星形胶质细胞。
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