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《苏州大学》 2013年
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抑制自噬对内皮祖细胞促进静脉血栓机化再通的影响的实验研究

尚斌  
【摘要】:目的:研究特定浓度的3-甲基腺嘌呤(3-methlyadenine,3-MA)作用后的血管内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)对于促进大鼠静脉血栓再通的影响,为临床治疗肢体深静脉血栓形成(Deep vein thrombosis)提供一种全新有效的思路和实验依据。 方法:1. Ficoll密度梯度离心法获取SD(Sprague-Dawley)大鼠(80-100g)的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells,BMMNCs),内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为EPCs并进行鉴定。2.将60只SD(Sprague-Dawley)大鼠(250-300g)分成四组,每组15只,对大鼠下腔静脉采用近端丝线结扎法加远端三氯化铁腐蚀法,成功制作下腔静脉血栓模型;动物下腔静脉血栓模型做好后,每组动物模型自一侧股静脉注射药物或细胞:A组:15只,空白对照组,注射生理盐水;B组:15只,注射移植EPCs1ml(含细胞1×106);C组:15只,注射3-MA1ml(浓度为5mmol/l);D组:15只,注射经浓度为5mmol/l3-MA处理的EPCs;在不同时间点处死动物并取出动物血栓标本,送苏木精—伊红染色(HE染色),高倍显微镜下计数超薄标本切片血栓再通的毛细血管密度,观察不同药物及种子细胞对静脉血栓机化再通的作用;对不同时间点处死的动物血栓标本行Western blot法检测VEGF、bFGF、Ang-1、MCP-1四种促进血栓机化与再通的细胞因子的蛋白表达。采用SPSS17.0统计软件进行分析,P0.05,差异有统计学意义。 结果:1.新分离的骨髓单个核细胞(BMMNCs)呈圆形,大小不一,第3天左右大部分细胞开始贴壁,形态有梭形、三角形、纺锤形或不规则形,第5-8天左右出现细胞集落和细胞线状排列,第8-12天接近融合,呈典型鹅卵石样外观。贴壁细胞的CD34、VEGFR、vWF、CD133均表达阳性。说明体外诱导培养的细胞是血管内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)。2.在400倍光学显微镜下各时间点血栓标本切片内可见血栓干燥收缩或部分溶解而出现裂隙,新生的血管内皮细胞长入并被覆于裂隙表面形成新的管腔样结构,经大鼠股静脉注射使用0.5ml浓度为5mmol/l的3-MA处理后的EPCs组动物模型血栓标本可见大量管腔样结构的纵切面及横切面,管腔内可见数量不等的红细胞;血栓标本石蜡切片HE染色显示在建模10天后的第7、14、28天形成的管腔样结构多于建模10天后的第0天;本组各时间点血栓标本石蜡切片HE染色均显示毛细血管形成密度比B组(注射移植EPCs组)、A组(注射生理盐水组)及C组(注射3-MA组)为多,有统计学意义(P0.05);注射浓度为5mmol/l3-MA处理的EPCs的血栓模型标本中,VEGF、bFGF、Ang-1、MCP-1四种促进血栓机化与再通的细胞因子蛋白表达量明显高于其他组,有统计学意义(P0.05)。 结论:少量浓度为5mmol/l的自噬抑制剂3-MA(3-甲基腺嘌呤)可提高EPCs在血栓内部的存活率,提高血栓内部毛细血管密度;并可刺激VEGF、bFGF、Ang-1、MCP-1四种促进血栓机化与再通的细胞因子的释放。适当抑制自噬可促进血栓局部EPCs的增殖,减少其凋亡,进而能促进血栓内部毛细血管生成,促进血栓的机化与再通。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R654.4

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 朱人大;李晓强;孟庆友;刘辉;雷锋锐;张晔青;;3-甲基腺嘌呤对大鼠内皮祖细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响[J];中华普通外科杂志;2011年07期
2 刘全;王建军;潘永成;孟利峰;詹曦;郑庆丰;;自噬相关基因Beclin1和MAPLC3在肺癌组织中的表达及其意义[J];癌症;2008年01期
3 ;Effects of bone marrow-derived endothelial progenitor cell transplantation on vein microenvironment in a rat model of chronic thrombosis[J];Chinese Medical Journal;2007年24期
4 谷涌泉;张建;苏力;郭连瑞;齐立行;徐娟;李建新;冀冰心;俞恒锡;李学锋;崔世军;罗涛;汪忠镐;;自体外周血单个核细胞移植治疗下肢缺血53例的临床研究[J];中华普通外科杂志;2006年12期
5 谷涌泉,郭连瑞,张建,徐娟,冀冰心,齐立行,李建新,俞恒锡,李学锋,崔世军,董宗俊,汪忠镐;自体骨髓干细胞移植治疗严重下肢缺血1例[J];中国实用外科杂志;2003年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 谷涌泉;郭建明;;下肢动脉硬化闭塞症的外科治疗现状与未来发展[J];中国医师杂志;2017年12期
2 熊筱璐;朱大龙;;干细胞和糖尿病的临床研究现况[J];中华糖尿病杂志;2016年04期
3 吕晓霞;张精勇;陈帼玲;高培显;王茂华;吴学君;金星;;自体骨髓干细胞移植治疗重度下肢缺血性疾病的疗效分析[J];中华细胞与干细胞杂志(电子版);2015年04期
4 杨婷;王凯峰;孙瑶;刘彦辉;王瀚锐;范东旭;金松;窦鹏挥;刘彦东;;血管内皮生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子对大鼠后肢动脉硬化闭塞血管再生机制的研究[J];中国普外基础与临床杂志;2015年08期
5 刘永兰;邹和群;周丽娜;;PI3K-Akt信号通路在内皮祖细胞移植减轻大鼠缺血再灌注肾损伤中的作用[J];国际泌尿系统杂志;2015年04期
6 白俊龙;王江宁;;血栓闭塞性脉管炎的治疗进展[J];实用医学杂志;2015年10期
7 张伟;李娟;丁海;张学义;;甲状腺癌中Beclin-1蛋白和PTEN蛋白的表达及临床意义[J];中国实验诊断学;2015年03期
8 白超;杨琨;李新喜;王洋;田野;罗军;;骨髓间充质干细胞移植治疗肢体缺血的机制[J];中国组织工程研究;2015年06期
9 谷涌泉;佟铸;郭连瑞;;干细胞移植治疗下肢重度缺血[J];中华普通外科学文献(电子版);2015年01期
10 许斌;孟媛;姜彦多;;自噬相关基因Beclin-1与抑癌基因PTEN、p53在大肠癌中的表达和意义[J];现代肿瘤医学;2015年04期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 叶爱芳;尹丽慧;倪吴花;章圣辉;吴建波;;白藜芦醇对人白血病细胞增殖和细胞周期的影响[J];实用医学杂志;2009年12期
2 ;Effects of bone marrow-derived endothelial progenitor cell transplantation on vein microenvironment in a rat model of chronic thrombosis[J];Chinese Medical Journal;2007年24期
3 段振玲;彭芝兰;王赞宏;闫乃红;;自噬基因Beclin1与上皮性卵巢癌发生、发展的相关性研究[J];癌症;2007年03期
4 谷涌泉;张建;齐立行;郭连瑞;汪忠镐;张淑文;李建新;徐娟;苏力;冀冰心;俞恒锡;李学锋;崔世军;罗涛;武欣;董宗俊;;自体骨髓干细胞移植治疗慢性下肢缺血94例不同病变分期患者的效果比较[J];中国临床康复;2005年38期
5 郭连瑞,谷涌泉,张建,张淑文,吴英锋,崔叶青,郭德玉,汪忠镐;不同途径移植骨髓单个核细胞治疗大鼠后肢缺血[J];中国临床康复;2005年10期
6 杨晓凤,吴雁翔,王红梅,许忆峰,吕欣,张轶斌,王法,张悦;自体外周血干细胞移植治疗62例缺血性下肢血管病的临床研究[J];中华内科杂志;2005年02期
7 谷涌泉,张建,郭连瑞,汪忠镐,张淑文,齐立行,徐娟,冀冰心,李建新,俞恒锡,李学锋,崔世军,罗涛,武欣,董宗俊;自体骨髓干细胞移植治疗下肢严重缺血:32例报告[J];中国临床康复;2004年35期
8 郭连瑞,谷涌泉,张建,徐娟,冯凯,齐立行,李建新,冀冰心,张淑文,俞恒锡,李学锋,崔世军,罗涛,董宗俊,汪忠镐;自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病足13例报告[J];中华糖尿病杂志;2004年05期
9 黄平平,李尚珠,韩明哲,肖志坚,杨仁池,邱录贵,钱冠清,付仁敏,郑亚丽,刘春华,徐秀强,李君凡,韩忠朝;自体外周血干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症[J];中华血液学杂志;2003年06期
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1 冷一平;;血管内皮祖细胞治疗动脉粥样硬化的研究现状[J];长沙医学院学报;2009年01期
2 倪荣镇;凌霜;李玉凤;党延启;王源;梁爽;马婧;冯怡;许锦文;;促进血管内皮祖细胞分化的中药的研究进展[J];时珍国医国药;2016年04期
3 崔芬;杨志寅;;血管内皮祖细胞与冠状动脉硬化性心脏病危险因素的研究现状[J];国际内科学杂志;2009年09期
4 陈柏松;张胜利;耿红全;潘骏;吴少峰;陈方;;血管内皮生长因子表达载体的构建及在内皮祖细胞中的表达[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年50期
5 陈慧芬;王红;;氧化应激环境中自噬相关基因对内皮祖细胞功能的影响[J];西南国防医药;2017年05期
6 罗庆祎;;内皮祖细胞与冠心病[J];现代实用医学;2006年10期
7 黎金凤;霍亚南;;基质细胞衍生因子-1对外周血内皮祖细胞功能影响的研究进展[J];江西医药;2013年04期
8 王峰;田晶;谭孟群;;内皮祖细胞的研究进展[J];现代临床医学生物工程学杂志;2006年03期
9 刘冉;兰玲;于静;;内皮祖细胞研究进展[J];中华实用诊断与治疗杂志;2011年07期
10 王代红;袁发焕;;内皮祖细胞与肾脏病[J];重庆医学;2009年22期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 方英;傅国胜;宋筱筱;张文斌;;外周血内皮祖细胞的分离、培养和扩增[A];2005年浙江省内科学学术年会论文汇编[C];2005年
2 赵怡芳;贾俊;张文峰;何三刚;;脐血中内皮祖细胞的分离培养[A];2004年口腔颌面肿瘤基础研究学术研讨会会议日程及论文集[C];2004年
3 熊福银;陈昭烈;刘红;刘兴茂;;造血干/祖细胞体外的三维培养[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
4 张怀勤;季亢挺;杨德业;黄晓燕;林捷;黄伟剑;徐力辛;;内皮祖细胞培养条件的正交设计研究[A];2004年浙江省心血管病学学术年会论文汇编[C];2004年
5 张秋华;尹洪超;张俊华;刘佩毛;张华;佘铭鹏;;血浆高密度脂蛋白对内皮祖细胞生长特性的影响[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
6 沈洋;陈光;李飞;郑德兴;李翔;赵文军;;内皮祖细胞的研究现状[A];2015年浙江省外科学学术年会暨国家级肝胆胰疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2015年
7 商书霞;卫峻枫;李志勇;;内皮祖细胞与糖尿病大血管病变的研究现状[A];中国转化医学和整合医学研讨会论文综合刊[C];2015年
8 吴仁华;徐志锋;肖叶玉;吴仁华;;核磁共振频谱技术对神经干/祖细胞代谢特征的研究现状及相关问题[A];中华医学会第16次全国放射学学术大会论文汇编[C];2009年
9 唐佩弦;;造血干祖细胞移植的细胞生物学基础[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
10 赵刚;宋明宝;于学军;朱光旭;于世勇;董红梅;康华利;黄岚;;肝细胞生长因子对低密度脂蛋白损伤内皮祖细胞功能的影响[A];中国心脏大会(CHC)2011暨北京国际心血管病论坛论文集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 第二军医大学附属长海医院临床神经医学中心主任 刘建民;内皮祖细胞影响动脉瘤发生[N];健康报;2012年
2 张灿灿 杨英莉;内皮祖细胞可促血管新生[N];健康报;2006年
3 项盈;王金福;作用于不同周期 参与细胞增殖分化 中药多环节影响造血干/祖细胞[N];中国医药报;2005年
4 葛秋芳;心脏中“祖细胞”:受刺激后可长成心脏新组织[N];新华每日电讯;2007年
5 记者 李洁尉 通讯员 周飞;花榈木通过“自噬”杀死癌细胞[N];科学时报;2011年
6 王建新 主持;“自噬”的快车刚刚启动[N];医药经济报;2016年
7 记者 周洁;解密“自噬”,抗癌治病更近一步[N];河北日报;2016年
8 ;吸半小时“二手烟”,足以损害非吸烟者血管[N];新华每日电讯;2008年
9 张道生;细胞移植促进肺部毛细血管再生[N];中国医药报;2005年
10 记者 陆琦 见习记者 谷双双;细菌通过诱导线粒体自噬求存活[N];中国科学报;2019年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 袁白银;WDR1调控的肌动蛋白动态在小鼠心肌细胞生长与维持以及第二心场祖细胞发育过程中的功能研究[D];南京大学;2015年
2 李好;内皮祖细胞移植联合辛伐他汀对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤修复作用的研究[D];南京大学;2013年
3 于鹏;孕酮对内皮祖细胞血管形成能力的影响和去骨瓣减压术对脑创伤的治疗作用[D];天津医科大学;2017年
4 师莹;ABCG1通过调控内皮祖细胞的功能改善糖尿病血管病变的作用研究[D];天津医科大学;2017年
5 王文荣;有氧运动对绝经后女性血管内皮功能和内皮祖细胞转录组的影响[D];北京体育大学;2018年
6 孔杰;内皮祖细胞来源的外泌体对大鼠颈动脉球囊拉伤的作用及机制[D];北京协和医学院;2018年
7 朱飞;hERG1蛋白表达及口腔癌—内皮祖细胞融合在肿瘤新生血管中作用的初步研究[D];武汉大学;2013年
8 李蛟;机械力决定肺泡上皮细胞的分化方向[D];中国农业大学;2018年
9 靳妍;内皮祖细胞移植通过miR-141-3p-Notch-Nrf2轴减轻百草枯中毒所致急性肺损伤的研究[D];中国医科大学;2018年
10 张赫男;慢性淋巴细胞白血病骨髓造血障碍及其机制的实验研究[D];中国医科大学;2018年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 尚斌;抑制自噬对内皮祖细胞促进静脉血栓机化再通的影响的实验研究[D];苏州大学;2013年
2 朱人大;自噬抑制对内皮祖细胞影响的实验研究[D];苏州大学;2010年
3 陈常军;人脐血内皮祖细胞移植治疗下肢缺血的实验研究[D];福建医科大学;2011年
4 刘辉;雷帕霉素对内皮祖细胞的影响的实验研究[D];苏州大学;2010年
5 周汝航;探讨内皮祖细胞大自噬和分子伴侣介导自噬相互作用的实验研究[D];苏州大学;2012年
6 方立建;人脐带血内皮祖细胞的培养与鉴定[D];吉林大学;2008年
7 程单单;CXCL12协同VEGF促进内皮祖细胞的增殖迁移及血管新生[D];皖南医学院;2018年
8 陆玉婷;慢病毒介导的TRPC4基因沉默犬内皮祖细胞对其功能影响的研究[D];广西医科大学;2018年
9 涂强;沉默C/EBP同源蛋白基因对高糖作用下内皮祖细胞功能活性的影响[D];湖北医药学院;2018年
10 成阳洋;肝脏功能、心血管病变和内皮祖细胞在失代偿期肝硬化疾患中的相互影响[D];川北医学院;2018年
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