收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

胡萝卜(Daucus carota.L.)细胞外周糖蛋白结构及翻译后修饰的研究

商承伟  
【摘要】: 细胞外周糖蛋白(EDGP)是一种在SDS-PAGE中显示分子量为57000Da的糖蛋白,它由两种多肽构成,其氨基酸组成相似但等电点不同,pI分别为8.8和9.5。用层析法和层析等电点聚集法,从胡萝卜细胞悬浮培养液中提取和纯化了目的蛋白EDGP。应用MALDI-TOF-MS对纯化的蛋白质进行了鉴定。同时,将光谱测定数据与蛋白质数据库进行了符合率鉴定(MS-Fit),结果表明纯化的蛋白质确为EDGP。利用电喷雾质谱法对未变性的纯化EDGP的分子量进行鉴定,EDGP中含有4种分子量,分别为:48119 Da,48282 Da,48479 Da,和48705 Da。通过MALDI-TOF-MS,证实检测的氨基酸序列与佐藤等(1992)推导的EDGP氨基酸全序列相一致。测定结果表明,EDGP前20个氨基酸残基为信号肽序列,它在EDGP的成熟过程中被切除;成熟EDGP的N-末端被焦谷酰胺磷酸化修饰;EDGP的氨基酸序列中有11个潜在的磷酸化位点,其中7个没有被磷酸化修饰;在EDGP胰蛋白酶的水解产物中,这些未被磷酸化的多肽是T1、T5、T11、T15、T19、T23和T25。 通过用正碘乙酰-(5-硫基-1-奈基)乙二氨(1,5-I-AEDANS)对半胱氨酸的特异性荧光标记,并结合MALDI-TOF-MS对EDGP是否含有自由半胱氨酸进行了鉴定,结果表明:在EDGP中不含有自由半胱氨酸,即在EDGP序列中的12个半胱氨酸,形成分子内二硫键。通过比较存在或缺少还原剂条件下的肽谱差异,并依据MALDI-TOF-MS的分析结果,证实EDGP的半胱氨酸70与半胱氨酸158之间形成了二硫键。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 刘智慧;李洪启;;透心红胡萝卜的栽培[J];农民致富之友;2008年08期
2 陳自強,試驗站;瓜地間種胡蘿蔔[J];新疆农业科学;1964年04期
3 ;胡萝卜青贮方法简介[J];甘肃畜牧兽医;1975年03期
4 肖文一;;甜瓜套种胡萝卜生产技术试验报告[J];黑龙江农业科学;1982年05期
5 余展深 ,周光来 ,柳俊;胡萝卜引种试验初探[J];湖北民族学院学报(自然科学版);1992年00期
6 王宝玉;;延津胡萝卜的栽培技术[J];河南农业;1993年04期
7 李长林;胡萝卜栽培 技术要点[J];现代农业;1994年08期
8 张新玉;透心红胡萝卜栽培技术[J];山西农业;1994年05期
9 张士刚;四季胡萝卜[J];河北农业科技;1995年02期
10 王立明;;胡萝卜甜奶冻[J];农村实用科技信息;1996年01期
11 梁青;胡萝卜及其系列产品加工技术[J];农牧产品开发;1997年10期
12 张生,严莉;胡萝卜丰产栽培技术[J];新疆农业科技;1997年04期
13 郭新发;出口鲜胡萝卜的种植技术与市场要求[J];农村科技开发;1997年06期
14 祝美云;胡萝卜系列加工技术(上)[J];农家参谋;1997年10期
15 谭振;山钵;;脱水胡萝卜粒生产技术[J];农村.农业.农民;1997年06期
16 张淑玲;胡萝卜的营养与栽培技术[J];农业科技通讯;1999年03期
17 梁毅;国内外胡萝卜研究生产与发展状况[J];蔬菜;1999年11期
18 ;饲料胡萝卜栽培[J];黑龙江科技信息;1999年02期
19 季明根;怎样使胡萝卜早出苗、早齐苗[J];长江蔬菜;2000年03期
20 徐爱东;胡萝卜的贮藏技术[J];农村百事通;2000年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王勇;陈源闽;梁艳荣;张艳萍;杜刚强;廉勇;;胡萝卜育种研究进展[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
2 刘科辉;刘金凤;卢庄;王京兰;隋少卉;蔡耘;钱小红;;糖蛋白荧光试剂盒用于正常人肝细胞规模化糖蛋白质组的研究[A];中国蛋白质组学第三届学术大会论文摘要[C];2005年
3 宋强;张立伟;冯前进;刘亚明;;黄芪蛋白类提取物对动物免疫功能影响的实验研究[A];全国中医药创新与发展研讨会专辑[C];2005年
4 李越希;吕敏;潘明洁;戚菁;王正茂;潘英;;HSV1 gD及HSV2 gD两种糖蛋白真核表达载体的构建及表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
5 王毅;刘立新;方秀娟;徐欣;;低温对黄瓜幼苗叶片细胞中糖蛋白和系膜颗粒的影响[A];中国科学技术协会第二届青年学术年会园艺学论文集[C];1995年
6 万崎;冯勇;章晓联;陈新文;吴建国;;丙型肝炎病毒E2糖蛋白糖基化位点突变体的研究[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年
7 王茜;曾抗;孙乐栋;周再高;刘凤岩;;单纯疱疹病毒2型糖蛋白G的基因扩增、克隆及其B细胞抗原表位分析[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
8 郭立征;项金忠;卢晓燕;张鹏飞;章以浩;郭存三;;水痘-带状疱疹病毒糖蛋白Ⅰ基因在昆虫细胞中的表达及纯化[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
9 刘恒国;罗南萍;;血清THP、β2-MG与高脂血症的关系[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
10 任国艳;;海蜇头糖蛋白理化性质及抗氧化活性研究[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姚琪;蛋白质翻译后修饰及不同修饰间相互调控研究[D];武汉大学;2011年
2 魏利龙;受精15.5天胎鼠血清和新生鼠血清蛋白质组学比较研究[D];北京协和医学院;2011年
3 党永军;微管相关蛋白1轻链蛋白3家族翻译后修饰方式的研究[D];复旦大学;2003年
4 尹明安;胡萝卜(Daucus carota)抗冻蛋白基因的克隆及其对番茄(Lycopersicon esculentum)的转化[D];西北农林科技大学;2001年
5 聂爱英;基于质谱的组蛋白翻译后修饰与定量蛋白质组学方法研究[D];复旦大学;2012年
6 赵海涌;转录因子p53、Sox2的翻译后修饰调控研究[D];北京协和医学院;2010年
7 李宁;基于串联质谱数据的肽序列鉴定、翻译后修饰鉴定和蛋白质装配的质量控制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
8 张丽华;药用多肽基因植物表达载体的构建及其对胡萝卜和番茄的遗传转化[D];西北农林科技大学;2002年
9 郑回勇;人乳铁蛋白基因在胡萝卜(Daucus carota L.)中的表达及其功能研究[D];福建农林大学;2002年
10 司家钢;利用原生质体非对称融合转移胡萝卜瓣化型细胞质不育性的研究[D];中国农业科学院;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 商承伟;胡萝卜(Daucus carota.L.)细胞外周糖蛋白结构及翻译后修饰的研究[D];苏州大学;2002年
2 刘浏;正常人尿蛋白质组翻译后修饰的鉴定[D];北京协和医学院;2013年
3 郭云云;胡萝卜天然活性物质含量变化的研究[D];石河子大学;2009年
4 马晓娟;乳酸菌发酵胡萝卜原浆技术及其产品性能研究[D];南昌大学;2013年
5 张其骏;胡萝卜类胡萝卜素及其品质的研究[D];浙江大学;2002年
6 韩岩岩;VSV糖蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建和初步鉴定[D];吉林大学;2009年
7 赵梅;甘薯水溶性糖蛋白的分离纯化及结构初探[D];江南大学;2005年
8 祁会彩;水疱性口炎病毒糖蛋白截短后在大肠杆菌中的表达和诊断技术的研究[D];西北农林科技大学;2006年
9 闫雪梅;南瓜糖蛋白的提取与纯化研究[D];江苏大学;2004年
10 吕明恩;血小板膜糖蛋白基因多态性与脑梗死的相关性研究[D];苏州大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;新拨乡发展胡萝卜产业实现富民增收[N];承德日报;2007年
2 美国加州大学研究员 薛东;为胡萝卜争第一[N];保健时报;2005年
3 ;胡萝卜施肥技术[N];河北农民报;2005年
4 东海县农技推广中心 花文苏 蒋明德 赵宁桂;棉花、胡萝卜高效套种[N];江苏农业科技报;2007年
5 保定定州市农牧局 王虎;土窑贮藏胡萝卜4要点[N];河北农民报;2007年
6 张小林;如何种好胡萝卜[N];瓜果蔬菜报.农业信息周刊;2006年
7 谢雪芳;胡萝卜常规良种要注意提纯复壮[N];云南科技报;2007年
8 上蔡县大路李乡政府 付中雨;胡萝卜高产栽培技术要点[N];驻马店日报;2008年
9 胡启山;胡萝卜需肥特点与施肥技术[N];农资导报;2009年
10 本报记者 徐瑞哲;“小白菜”心犹在 “胡萝卜”根更深[N];解放日报;2011年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978