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克隆法研究放射性核素内照射和γ射线外照射诱发HPRT基因突变

崔凤梅  
【摘要】: 目的:本实验主要是用克隆法研究放射性核素内照射诱发Wistar大鼠外周血淋巴细胞和脾淋巴细胞次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因突变及γ射线外照射诱发健康成年人外周血淋巴细胞HPRT基因突变情况。方法和步骤:实验共分三个部分。第一部分是研究晚期混合裂变产物不同累积剂量和不同剂量率内照射后大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因突变频率。第二部分是研究晚期混合裂变产物不同累积剂量和不同剂量率内照射后大鼠脾淋巴细胞HPRT基因突变情况。不同的累积剂量:将一定活度的晚期混合裂变产物自尾静脉注入大鼠体内(对照组相应注射生理盐水),3、9、15、21天后心脏穿刺采血及脾脏刮擦分离得到淋巴细胞,用克隆法测定各个不同累积剂量组大鼠HPRT基因突变频率;不同剂量率:将四种不同比活度的晚期混合裂变产物自尾静脉分别注入四组大鼠体内,当各组大鼠的内照射的累积剂量达到相同时(约12.5cGy),心脏穿刺采血及脾脏刮擦后分离得到淋巴细胞,再用克隆法测定各个不同剂量率组大鼠HPRT基因突变频率。第三部分的实验内容是抽取一健康成年男子的静脉血,分为等量的5组,除对照组外,其余各组分别接受不同剂量的γ射线(相同的剂量率)照射,再用克隆法测定各个不同剂量组淋 克隆法研究放射性核素内照射和丫射线外照射诱发HPRT基因突变中文摘要 巴细胞HPRT基因的突变频率。结果:第一部分的结果表明:随着 内照射累积剂量的增加,大鼠外周血淋巴细胞玉护Rr基因突变频率随 之升高,剂量效应关系符合线性平方模型:Y二5.1217一1.0004D 司.0988D,,RZ二0.9804。在累积剂量相等时,随着内照射剂量率的增 加,大鼠的外周血淋巴细胞川〕RT基因突变频率也随之增加,剂量率 与突变频率的剂量效应关系式为:y一3.9779十o.5769D一0.oo55D2,刃 二0.9756。第二部分实验结果显示:随着内照射累积剂量的增加,大 鼠脾淋巴细胞HPRT基因突变频率随之增加,剂量效应关系符合线性 平方模型:Y=4.5060+o.5635D+o.0606D2,RZ=0.9944。在累积剂量 相等时,大鼠的脾淋巴细胞HPRT基因突变频率随剂量率的增加而上 升,剂量率与突变频率的剂量效应关系式为:y二2.6638十 0.5 1 77D一o.0008D2,RZ二0.9942。第三部分的实验结果表明:不同剂量 的Y射线外照射健康成年男子的外周血也可使其淋巴细胞的圣护Rr 基因突变频率相应提高,HPRT基因突变频率与照射剂量呈正相关, 相关模型为Y二0.0469+l .53 16D,R,=0.9908。结论:克隆法是一种检测 放射性核素内、外照射诱发HPRT基因突变的方法,HPRI,基因突变 剂量效应关系理想,有可能作为辐射生物剂量计。


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