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《苏州大学》 2004年
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人胚胎干细胞的分离、体外培养及初步鉴定

朱旻  
【摘要】:目的:用组织块培养法,在不添加细胞因子的情况下,培养观察原代人胚胎干细胞(EG细胞)生长,进行初步鉴定。以探讨体外培养原代EG细胞的新方法。 方法:取5~10周流产胚胎的背侧肠系膜、生殖腺嵴及中肾嵴,进行组织块培养。用源于自身胚胎组织的成纤维细胞作为饲养层,在不添加任何细胞因子的条件下,观察EG细胞生长及集落形成的情况,利用Giemsa染色法及组织化学方法对其进行鉴定。 结果:培养12小时后,成纤维细胞开始在组织块周围出现;24小时后,EG细胞散在出现;4~20天后,在成纤维细胞上逐渐出现EG细胞集落,细胞生长良好。EG细胞碱性磷酸酶活性高表达;染色体核型分析为正常二倍体核型。本实验共收集5~10周人胚胎42例,29例观察到原代EG细胞集落生长。 结论:用组织块培养法,体外培养人胚胎背侧肠系膜、生殖腺嵴及中肾嵴,利用源于自身胚胎组织的成纤维细胞作为饲养层,在不加任何细胞因子的条件下,可分离培养得到原代EG细胞,成功率高。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R329

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李芳;人胚胎生殖干细胞的生物学鉴定[D];苏州大学;2005年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 梁英杰;人的类胚胎干细胞中碱性磷酸酶的检测方法和条件[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2001年04期
2 华进联,窦忠英,李松,李相运,雷安民,杨春荣,高志敏,张若平;原始生殖细胞的人类ES细胞的分离克隆[J];农业生物技术学报;2002年01期
3 徐令,黄绍良,李树浓,吴旋;人胚胎成纤维细胞对人胚胎干细胞生长的作用[J];中国病理生理杂志;2001年01期
4 何志旭,黄绍良,李予,张清学;人胚胎干细胞系的初步建立[J];中华医学杂志;2002年19期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 薛敏,鲁树坤,王双双;超声探测颈项透明层检测早期胎儿异常[J];中国超声诊断杂志;2005年05期
2 倪晓兵;;超声诊断胎儿腭裂的临床价值[J];中国超声诊断杂志;2005年12期
3 刘善荣,刘厚奇,汤淑萍,惠宁,冀凯宏,蒋正,戚中田,冯根生;不同发育阶段人胚胎原始生殖细胞的定位及体外培养[J];第二军医大学学报;2003年09期
4 刘小蓉,安靓,李进;昆明胚鼠生殖腺发育的形态学观察[J];第一军医大学学报;2004年04期
5 黄登清,余秀平,郑鸣,康仲涵;胎儿鼻软骨及其他组织的发育[J];福建医科大学学报;2001年01期
6 徐海波!430022武汉,孔祥泉!430022武汉,熊茵!430022武汉,肖学宏!430022武汉,杨炼!430022武汉,周承凯!430022武汉;高场磁共振仪评估新生儿和婴儿的正常脑髓鞘[J];放射学实践;1999年04期
7 徐向阳,韩萍,冯敢生,史河水,田志梁,刘永华,刘刚,代文;先天性耳畸形和正常颞骨的螺旋CT三维成像分析[J];放射学实践;2002年06期
8 陈信坚,邱怀明;脉络膜裂蛛网膜囊肿的CT、MRI诊断价值[J];放射学实践;2005年06期
9 王樯,黄中新;人胎肺细胞增殖与凋亡及其与发育分化的关系[J];解剖学研究;1998年02期
10 高岚,黄中新,覃莉;胎儿胰腺发育中CgA和NSE的表达及其意义[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2005年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 张丽瑞;李旭;陈葳;;人胚胎干细胞建系的方法学研究进展[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
2 成钢;冯书堂;牟玉莲;;五指山猪近交系精原干细胞体外分离、培养实验研究[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年
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1 刘晓萍;小鼠胚芽干细胞的分离培养和向肝细胞定向诱导分化的实验研究[D];山东大学;2005年
2 后晓南;小鼠囊胚体外侵袭肿瘤细胞现象的初步解析[D];重庆医科大学;2002年
3 戴宜武;骨髓基质细胞定向分化为神经干细胞及自体移植治疗中脑损伤研究[D];第一军医大学;2002年
4 董晓;猪胚胎干细胞(EG)建系影响因素的研究[D];中国农业大学;2003年
5 刘传康;糖皮质激素局部注射治疗婴幼儿先天性斜颈机理的研究[D];重庆医科大学;2003年
6 姜颖;兔肉腥味物质的鉴定及其形成机理初探&人胎肝磷酸化蛋白质表达谱的构建[D];南京农业大学;2003年
7 王丽;胚泡着床三维模型的建立及子宫内膜容受性影响因素的研究[D];复旦大学;2003年
8 应万涛;基于凝胶电泳的蛋白质组研究策略及应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
9 曾琪;子宫内膜容受性信号途径中NFκB作用的研究[D];复旦大学;2004年
10 况玲;猪胚胎干细胞的分离、培养、鉴定和分化的研究[D];甘肃农业大学;2004年
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1 李长科;不同浓度普鲁卡因对大脑皮层锥体神经元延迟整流型K~+通道的影响[D];第一军医大学;2000年
2 王歆;人胎盘组织Fcγ 受体Ⅲ及HBsAg-抗-HBs复合物的免疫组织化学检测[D];第四军医大学;2001年
3 王莉;菘蓝对小鼠胚胎发育及生殖细胞损伤的保护作用[D];新疆医科大学;2001年
4 王凤超;重组蛋白tMDC-Ⅲ、SP-10、AEG的免疫原性及其生殖作用[D];东北农业大学;2002年
5 图雅;蒙古绵羊原始生殖细胞用于胚胎干细胞培养的研究[D];内蒙古农业大学;2003年
6 刘芳;bFGF及FGF-R2在大鼠颅缝闭合过程中表达的研究[D];中国医科大学;2001年
7 董微;初探二维超声测量胎儿肾脏体积预测出生体重的方法[D];天津医科大学;2003年
8 劳滔滔;人和小鼠多能干细胞的分离和培养[D];浙江大学;2003年
9 冯勇淼;蒙古绵羊胚胎肝、脾的组织学发生[D];内蒙古农业大学;2004年
10 谭冬梅;小鼠囊胚体外着床三维模型的建立[D];重庆医科大学;2004年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 梁英杰;人的类胚胎干细胞中碱性磷酸酶的检测方法和条件[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2001年04期
2 谢常青,卢光琇;人胚胎干细胞建系和分化研究进展[J];解剖科学进展;2001年03期
3 华进联,窦忠英,李松,李相运,雷安民,杨春荣,高志敏,张若平;原始生殖细胞的人类ES细胞的分离克隆[J];农业生物技术学报;2002年01期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 徐令,乔春平,黄绍良,李树浓,吴旋;体外定向诱导胚胎干细胞为造血细胞[J];科学通报;2000年08期
2 李松,窦忠英,华进联,屈雷,杨春荣;从原始生殖细胞分离克隆牛胚胎干细胞的研究[J];农业生物技术学报;2000年04期
3 何志旭,黄绍良;胚胎干细胞及细胞工程研究的最新进展[J];中华儿科杂志;2001年10期
4 华进联,窦忠英,李松,屈雷;人胚胎干细胞研究进展[J];中国科学基金;2000年02期
【相似文献】
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1 曲文玉;谭季春;邱广蓉;孙开来;蒋丽;卓英梅;;在人子宫内膜饲养层上生长的人原始生殖细胞生物学特性[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年25期
2 刘善荣,戚中田;人胚胎多能干细胞研究中的几个问题[J];第二军医大学学报;2003年09期
3 唐晓鹏;陈丽敏;唐元媛;陈丁;张旻;;人胚胎原始生殖细胞移植治疗大鼠急性肝损伤[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年12期
4 王晗;于海生;华进联;窦忠英;王华岩;;Oct-4和人端粒酶逆转录酶在不同胎龄人胚原始生殖细胞的表达变化[J];解剖学报;2008年01期
5 毛曦,雷治海;小鼠原始生殖细胞源胚胎干细胞的分离培养和建系[J];交通医学;2003年05期
6 张春冬;潘敏慧;李娜;孙志亚;谈娟;鲁成;;nanos基因的研究进展[J];细胞生物学杂志;2009年01期
7 王美芝;李泫;姚新梅;田雪梅;;小鼠雌性和雄性胚胎原始生殖细胞发育的比较研究[J];南方医科大学学报;2010年09期
8 段桂华;王成;张春妮;;微小核糖核酸与生殖关系的研究进展[J];中华男科学杂志;2009年06期
9 陈晶;人胚胎早期细胞外基质对正常植入的相互影响[J];国外医学.计划生育分册;1996年02期
10 ;我国出台《人胚胎干细胞研究伦理指导原则》[J];畜牧兽医科技信息;2004年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 于敏莉;葛楚天;张才乔;;维甲酸对鸡胚原始生殖细胞增殖的影响[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
2 程飚;刘宏伟;孙同柱;付小兵;;雌激素受体在人胚胎皮肤发育过程中的表达特征[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
3 刘雨潇;华进联;窦忠英;;小鼠原始生殖细胞研究进展[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
4 史小林;路欣;许晴;孟庆峰;上官芳芳;;培养小鼠原始生殖细胞饲养层体系的新方法-Sertoli细胞对小鼠原始生殖细胞营养作用的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
5 葛秀国;杨继建;窦忠英;;小鼠原始生殖细胞的迁移(英文)[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
6 华进联;窦忠英;张若平;李松;李相运;雷安民;杨春荣;高志敏;;源于原始生殖细胞的人类ES细胞的分离与克隆[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
7 潘伟康;高亚;;体外培养人胚胎肠神经嵴前体细胞的实验研究[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
8 葛楚天;张才乔;;人参皂甙通过PKC介导的NF-κB途径促进鸡胚原始生殖细胞的增殖[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
9 郭新;秦洁;唐爱发;余振东;桂耀庭;蔡志明;;生殖细胞分化相关基因在人胚胎干细胞中的表达及其意义[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年
10 郑闻亭;庄广伦;周灿权;方丛;染晓燕;张敏芳;;玻璃化冷冻提高活检后人胚胎的冻存率的探索[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 胡德荣;人胚胎早期器官形成由谁调控[N];健康报;2010年
2 葛进;日发现动物生殖细胞促成基因[N];科技日报;2008年
3 雪云;日发现抑制原始生殖细胞变成体细胞的蛋白[N];中国医药报;2008年
4 德;日本有条件允许治疗性克隆人胚胎研究[N];医药经济报;2004年
5 张孟军;美用人胚胎育出17个干细胞系[N];科技日报;2004年
6 张田勘;“人兽杂交”胚胎的技术和伦理突破[N];东方早报;2007年
7 吴一福;我国脊髓神经损伤治疗迈上新台阶[N];中国医药报;2007年
8 钱铮;特定脑蛋白或解“雨人”之谜[N];新华每日电讯;2008年
9 张荔子;中国伦理视角:治疗性克隆应当允许[N];健康报;2006年
10 刘浩然 曹津燕 高翔 甘荣兴 提供;人类干细胞研究的发展与伦理[N];中国知识产权报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 刘永刚;人EG细胞分离、培养及其定向诱导为造血细胞的实验研究[D];重庆医科大学;2005年
2 华进联;人类胚胎生殖细胞的分离克隆及生物学特性研究[D];西北农林科技大学;2005年
3 周振明;采用转染血液循环期原始生殖细胞方法和鸡—兔异种动物核移植方法制备转基因鸡[D];中国农业大学;2004年
4 王飞;人胚胎神经干细胞体外诱导分化及其分化相关基因表达的研究[D];苏州大学;2003年
5 严立波;线虫体细胞和生殖细胞命运的决定与维持需要细胞自我吞噬,LSY-2和SUMO化修饰通路的协同作用[D];中国协和医科大学;2007年
6 胡春光;新型人胚胎肝源性因子的提纯与鉴定[D];吉林大学;2004年
7 王新宇;人胚胎神经干细胞的分离培养及向多巴胺能神经元诱导分化的实验研究[D];山东大学;2004年
8 张易祥;2,2’5,5’-四氯联苯和雌二醇对鸡生殖功能的影响[D];中国农业大学;2005年
9 蒋吉英;胚胎肝干细胞的增殖、分化及其调控因素[D];四川大学;2004年
10 徐绘;17α-炔雌醇对斑马鱼生殖系统的影响及其机理的研究[D];复旦大学;2008年
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1 朱旻;人胚胎干细胞的分离、体外培养及初步鉴定[D];苏州大学;2004年
2 韩兵;原始生殖细胞来源的人胚胎干细胞分离、培养与鉴定[D];重庆医科大学;2004年
3 李芳;人胚胎生殖干细胞的生物学鉴定[D];苏州大学;2005年
4 乔江丽;人类原始生殖细胞的鉴定[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
5 于海生;人胚胎生殖细胞的分离培养与鉴定[D];西北农林科技大学;2006年
6 颜桂军;人胚胎生殖细胞的分离、培养及多能性的鉴定[D];扬州大学;2001年
7 董书伟;小鼠和人胚胎生殖细胞的分离与无血清培养[D];西北农林科技大学;2007年
8 廖礼彬;人胚胎三叉神经节细胞形态发育研究[D];新疆医科大学;2011年
9 葛秀国;牛和山羊胚胎生殖细胞的分离与培养[D];西北农林科技大学;2004年
10 吐尔逊江·达地汗;人胚胎三叉神经的形态及三维重建[D];新疆医科大学;2010年
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