收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人IL-24基因的克隆、表达及活性鉴定

陈雄艳  
【摘要】:目的:克隆人IL-24基因,在原核和真核系统中进行重组表达并检测表达蛋白的生物学活性。 方法:采用RT-PCR技术克隆人IL-24基因。将其重组到pUC19质粒,经测序鉴定后,构建重组质粒pBV220-hIL-24和pcDNA3-hIL-24。经鉴定后分别导入原核和真核细胞进行表达。然后分别用SDS-PAGE、MTT、RT-PCR、FCM、TUNEL及ELISA等方法鉴定hIL-24基因的表达和研究表达产物的功能及生物学活性。 结果:成功获得621bp的人IL-24基因,序列测定结果与GenBank报道的完全一致,原核和真核重组表达质粒构建正确,原核表达产物经透析复性和初步纯化后,通过MTT、TUNEL和FCM等方法检测发现所表达的rhIL-24具有诱导A549肺腺癌细胞凋亡的作用。结果显示hIL-24基因不仅可在COS-7和CHO两种细胞中表达,而且表达的rhIL-24具有较强的诱导A549肺腺癌细胞凋亡的作用。 结论:该基因系国内首次获得并经序列测定证实的hIL-24基因。为进一步研究人IL-24抗肿瘤的分子机制及开发具有自主知识产权的抗肿瘤基因重组蛋白和基因治疗载体的国家Ⅰ类新药奠定了实验基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 赖燕来,孙朝晖,谢佐平;人神经营养素-3基因的克隆、表达及其活性检测[J];神经解剖学杂志;2004年01期
2 崔玉梅,张雅洁,李书华,李冰,张惠球;VEGFR-3 2-Ig反义多肽的原核表达及生物活性鉴定[J];现代临床医学生物工程学杂志;2003年03期
3 靳迪;饶恩于;李景鹏;赵勇;;小鼠OCILrP2基因的克隆、原核表达及抗血清的制备[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年01期
4 史影,郑树,胡晓晔,孙立峰,张苏展;新转移相关蛋白SNC19翻译后加工及其活性形式的研究[J];浙江大学学报(医学版);2005年01期
5 王岚;李玉英;蔡桂红;张政;王转花;;重组苦荞麦过敏蛋白TBa的原核表达及其免疫活性鉴定[J];中国生物化学与分子生物学报;2006年04期
6 屈延,章翔,吴景文,高大宽,梁景文,刘先珍;小鼠内皮抑素基因真核表达载体的构建和表达[J];第四军医大学学报;2000年09期
7 田美娜;李永亮;卢曾军;付元芳;袁明;刘湘涛;刘在新;;口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备及鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年07期
8 陆柔剑;齐建国;邓瑶;王世峰;王文玲;辛伟;李仁清;阮力;;人免疫缺陷病毒早期蛋白Nef的表达、纯化及免疫原性研究[J];生物技术通讯;2008年03期
9 李彦博;孙玉英;郭斯启;孙业平;张秀云;孔繁华;奚永志;;HLA-B*2705重链的原核表达和活性鉴定[J];中国实验血液学杂志;2007年05期
10 宋珊珊;胡国斌;董先智;;抗菌肽基因异源表达的研究进展[J];生物医学工程学杂志;2009年06期
11 洪帮兴,江丽芳,张欣,曹艳英,郭辉玉,张世英!518033;登革2型病毒NGC株E基因在NIH3T3细胞中的表达及初步鉴定[J];中华微生物学和免疫学杂志;2000年05期
12 胡兵,田聆,卢铀,杨莉,赵霞,刘继彦,魏于全;鼠表皮生长因子受体胞外段原核表达、纯化与复性[J];生物医学工程学杂志;2003年02期
13 齐建国,周为民,谷淑燕;EB病毒早期蛋白P54的原核表达及其免疫原性的研究[J];生物技术通讯;2003年05期
14 何於娟,欧一衡,张彦,刘小珊,马凌娣,涂植光,蒋纪恺;K562细胞未知基因KH的开放阅读框架在大肠杆菌中的表达[J];重庆医科大学学报;2004年02期
15 沈飞;董宁征;范磊;赵益明;谢丽倩;阮长耿;;人血管性血友病因子A1区单克隆抗体的研制[J];中国血液流变学杂志;2008年01期
16 赵丽晶;王学林;许多;梁作文;滕菲;郭恒;孙树民;赵淑华;赵雪俭;;原核表达HPV16 L1蛋白ELISA方法检测血清抗体[J];中国妇幼保健;2010年35期
17 胡以平,姚玉成;TNF家族的新成员TRAIL cDNA的克隆及其在E.coli中的表达[J];癌变畸变突变;2000年02期
18 刘智敏,陈俊杰,林佳,王若菡,游乐然,东云华;hBDNF基因原核表达重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达[J];生物医学工程学杂志;2001年01期
19 胡中波,邹萍,李爱香,肖娟,仲照东,刘凌波;一种小鼠可溶性Fas cDNA的克隆与表达[J];中国生物化学与分子生物学报;2002年03期
20 吴岚晓,李明,王萍,陈白虹;人胰岛素样生长因子-1基因的克隆及其表达[J];中国生化药物杂志;2002年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吕爱军;;牙鲆钙调素基因的克隆及其在原核和真核细胞中的表达[A];江苏省遗传学会第七届二次代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
2 辛英豪;高继明;刘标;李莎莎;姜世金;;Ⅰ型鸭病毒性肝炎VP1基因的克隆与原核表达[A];山东畜牧兽医学会禽病学专业委员会第一次学术研讨会论文集[C];2009年
3 焦石;贾立军;薛书江;刘明明;黄国明;张守发;;牛源犬新孢子虫MAG1基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会论文集[C];2011年
4 彭跃跃;丁燏;简纪常;鲁义善;;南极衣藻γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHI)基因的克隆,原核表达及定量分析[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
5 岳亮;王艺磊;张子平;林鹏;邹志华;谢芳靖;陈锦民;冯建军;;日本囊对虾Cathepsin B基因的克隆与原核表达[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
6 孟先明;潘艳;蔡新斌;陆专灵;梁湘;唐海波;杨剑;张红普;罗廷荣;;狂犬病毒ERA株基质蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年
7 赵刚;李刚;范晓娟;;狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
8 李凯;高宏雷;祁小乐;高玉龙;高立;邓小芸;王笑梅;;禽网状内皮组织增生病病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备[A];全球肉鸡产业论坛暨第二届中国白羽肉鸡产业发展大会会刊[C];2010年
9 宋艳;柳学广;朱晓苏;徐丽;司马杨虎;徐世清;;野桑蚕Bmand-Sxl基因的克隆及原核表达[A];中国蚕学会第六届青年学术研讨会论文集(1)[C];2009年
10 袁媛;周新;;HBG1和TFRC基因的克隆与原核表达[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 胡敬东;鸡白细胞介素18成熟蛋白基因克隆与表达的研究[D];山东农业大学;2004年
2 陈立志;牛源致病性坏死梭杆菌分离鉴定及其白细胞毒素免疫特性研究[D];吉林大学;2008年
3 赵宇军;猪戊型肝炎病毒结构蛋白基因表达及其基因特异性噬菌体展示肽库构建[D];中国农业科学院;2005年
4 韩俊友;牛蛙皮肤抗菌肽分离纯化、基因克隆表达及生物学特性的研究[D];吉林大学;2007年
5 李静;海洋酵母菌Metschnikowia reukaufii W6b酸性蛋白酶的生产、基因克隆和表达的研究[D];中国海洋大学;2008年
6 游向荣;龙眼成花转变与成花逆转的差异蛋白质组学研究[D];福建农林大学;2009年
7 许波;抗菌/抗内毒素多肽葛佬素的表达、纯化及其生物活性的初步研究[D];第四军医大学;2004年
8 孙照刚;传染性喉气管炎病毒糖蛋白G基因的克隆、表达、蛋白功能研究以及缺失该基因病毒的重组[D];中国农业大学;2005年
9 郑银英;苹果茎沟病毒和褪绿叶斑病毒分子变异研究[D];华中农业大学;2005年
10 姜秀云;牛分枝杆菌主要保护性抗原基因的克隆、表达及免疫研究[D];吉林农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 胡艳秋;人脑源性神经营养因子(hBDNF)的克隆与表达[D];华中农业大学;2004年
2 陈雄艳;人IL-24基因的克隆、表达及活性鉴定[D];苏州大学;2004年
3 杨卫冲;牛γ干扰素基因cDNA的克隆、表达及其表达产物单克隆抗体的研制[D];扬州大学;2005年
4 陈超;柔嫩艾美耳球虫ET-Rho-2基因在原核和真核细胞中的表达及免疫保护性研究[D];吉林大学;2006年
5 提金凤;用DNA免疫研制鸡白细胞介素-2单克隆抗体[D];扬州大学;2005年
6 陈振海;猪瘟病毒E0基因在原核与真核表达系中的表达[D];中国农业大学;2003年
7 李雷;人MBL的突变型哺乳细胞表达和野生型原核表达的研究[D];第一军医大学;2002年
8 赵春丽;人肝再生增强因子基因的克隆、真核表达载体构建及原核表达[D];东北农业大学;2003年
9 李燕舞;D28k钙结合蛋白基因真核表达质粒的构建及其表达效果的研究[D];扬州大学;2004年
10 赵艳丽;水稻中DNA甲基转移酶的原核表达及功能初步鉴定[D];东北师范大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 吴一福;我学者首次发现抗HBV末端蛋白杂交瘤细胞系[N];中国医药报;2006年
2 何珊;搏击市场数风流[N];中国企业报;2003年
3 世基投资;国药科技(600421):技术领先 医改受益[N];中国证券报;2007年
4 本报首席记者 任荃;一石三鸟“里葆多”[N];文汇报;2009年
5 宋冬 何玉玺;祖国的需要,就是我们最好的选择[N];科技日报;2009年
6 张中桥;四军医大西京医院成功建立胃癌GC9811P-GFP细胞株[N];中国医药报;2006年
7 张晓鹏 何秀丽;哈兽研构建起“猪蓝耳病”预防控制平台[N];中国畜牧兽医报;2008年
8 记者 张颖 伊洁;农林大学学生喜获“挑战杯”特等奖[N];福建日报;2005年
9 本报记者 伊洁 张颖;“挑战杯”的胜利者[N];福建日报;2005年
10 俞忠良;我国克隆出SARS病毒样颗粒[N];健康报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978