收藏本站
《苏州大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

构建骨髓间充质干细胞/牛骨形态发生蛋白/丝素蛋白组织工程骨的实验研究

徐卫袁  
【摘要】:一.兔骨髓间充质干细胞体外培养生物学特征的实验观察 目的探索骨髓间充质干细胞体外分离培养的最佳实验条件,并进行生物学特征的观察。 方法自股骨大转子及髓腔抽取新西兰大耳白兔骨髓,采用密度梯度离心法获取离心层单个核细胞,体外接种连续培养观察,原代接种后48 小时首次换液,此后每2~3 天全量换液;待细胞长至90%汇合时,用0.25%的胰酶和0.02%的EDTA 混合液消化传代。采用倒置显微镜下进行细胞生长形态观察,四唑盐MTT 法测定细胞活性并描绘细胞生长曲线;另选择P3代细胞进行成骨条件培养液培养4 周,进行细胞碱性磷酸酶(Gomori 钙钴法)染色和矿化结节(Von-Kossa 改良法)染色观察。 结果采用该方法分离培养的骨髓间充质干细胞生长形态和增殖活性良好,接种后的细胞有短梭形向长梭形、三角形乃至多角性发展,各代细胞有明显的生长潜伏期、对数增长期和平台期,细胞可以连续培养至P9代。经成骨诱导分化的细胞胞碱性磷酸酶染色阳性率为93%(对照组5%),矿化结节染色阳性。 结论骨髓间充质干细胞体外分离、扩增简单可行,可以定向诱导成成骨细胞,是很有希望的骨组织工程种子细胞。 二.骨髓间充质干细胞在丝素蛋白/牛骨形态发生蛋白载体系统中的生物学行为 目的实验室组合丝素蛋白与牛骨形态发生蛋白的载体系统,观察体外与骨髓间充质干细胞的相容性,初步评估载体系统的现实意义,同时进行骨组织工程三要素体外组合相互影响的初步观察,探索组织工程骨的有效构建方式 方法实验室组合丝素蛋白与牛骨形态发生蛋白的载体系统:将多孔丝素蛋白修剪成20×10×5mm长方体状物,置入6孔板中;将粉状bBMP用PBS液溶解制成2mg/ml混悬液,0.5ml 无菌移液管滴定于多孔丝素蛋白上(0.5ml/个)。按第一部分内容进行
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R318.0

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 史春梦,程天民;大鼠真皮多能间充质干细胞的分离培养[J];第三军医大学学报;2001年09期
2 李明忠,卢神州,张长胜,吴徵宇;明胶/丝素共混多孔膜的制备[J];东华大学学报(自然科学版);2002年03期
3 李明忠,吴徵宇,卢神州,张长胜,严灏景;多孔丝素材料的结构与性能研究[J];东华大学学报(自然科学版);2001年02期
4 张森林,毛天球,孟昭业,王会信;重组人骨形成蛋白-2和牛骨形成蛋白骨诱导活性的比较研究[J];华西口腔医学杂志;1998年03期
5 姚晖,杜昶,杨韶华,崔福斋,雷涛;纳米羟晶/胶原仿生骨修复家兔颅颌骨缺损的实验研究[J];透析与人工器官;2000年02期
6 唐开,党耕町,郭昭庆;组织工程复合骨移植材料椎体间脊柱融合实验研究[J];中国脊柱脊髓杂志;2002年05期
7 谭祖键!400038,李起鸿!400038,许建中!400038,杨柳!400038,戴刚!400038;聚乳酸作为骨形态发生蛋白载体修复骨缺损的实验研究[J];中华骨科杂志;2000年12期
8 傅文玉,路艳蒙,朴英杰;人骨髓间充质干细胞的培养及多能性研究[J];中华血液学杂志;2002年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 仵敏娟,刘善荣,刘厚奇;间充质干细胞特性与应用前景[J];生命科学;2004年03期
2 张建军,李兵仓;骨折愈合的现代研究与局部基因治疗[J];创伤外科杂志;2003年03期
3 赵建华,廖维宏,陈建梅;聚乳酸类骨修复材料的研究进展[J];创伤外科杂志;2003年03期
4 李楠;肖桃元;粟永萍;宗兆文;徐辉;王军平;冉新泽;刘志君;;人β防御素2腺病毒表达载体的构建及其在大鼠真皮多能干细胞中的表达[J];创伤外科杂志;2006年01期
5 叶勇;张剑韵;黄龙全;;甘油和戊二醛对丝素膜性能的改良效果[J];蚕业科学;2006年02期
6 李辉芹;仿生纤维增强复合材料[J];产业用纺织品;2004年08期
7 仵敏娟,刘善荣,刘厚奇 ,惠宁,杨玲,王凤玫,汤淑萍;人早期胚胎间充质干细胞的定位和体外初步分离培养[J];第二军医大学学报;2004年08期
8 史春梦,麦跃,程天民,粟永萍,徐辉,郑怀恩,王军平,黄跃生,蒋建新;真皮来源成体多能干细胞体外自发恶性转化现象及机制研究[J];第三军医大学学报;2004年01期
9 宗兆文,程天民,冉新泽,粟永萍,史春梦;全身照射大鼠骨髓提取液对真皮多能干细胞趋化作用的实验研究[J];第三军医大学学报;2005年04期
10 宗兆文;程天民;粟永萍;李楠;董世武;艾国平;冉新泽;徐辉;;真皮多能干细胞移植后向全身照射大鼠骨髓优势分布的机制研究[J];第三军医大学学报;2006年10期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 许秀真;;环保新型材料——壳聚糖和明胶多糖膜的研究进展[A];第五届全国绿色环保肥料新技术、新产品交流会论文集[C];2005年
2 邹勇;黄雅钦;夏宇正;;明胶与天然聚合物复合制备创伤敷料的研究进展[A];第五届中国功能材料及其应用学术会议论文集Ⅱ[C];2004年
3 柏涛;舒军;;兔自体细胞-载体复合物修复关节软骨缺损的实验研究[A];玉溪市第三届骨科学术研讨会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈晓;人骨髓间充质干细胞向造血细胞分化潜能的研究[D];吉林大学;2005年
2 李春明;bFGF基因修饰组织工程骨移植修复颌骨缺损及相关机制的实验研究[D];第四军医大学;2005年
3 谢松涛;内皮祖细胞促进组织工程复合皮和皮瓣缺血组织再血管化的研究[D];第四军医大学;2005年
4 周晓东;胎盘基质干细胞骨向分化及生物反应器构建骨组织的修复效果[D];第四军医大学;2005年
5 孟纯阳;纳米羟基磷灰石/聚酰胺66的生物学性能及修复骨缺损的实验研究[D];重庆医科大学;2005年
6 王启伟;恒河猴骨髓间充质干细胞的定向分化及其机制[D];第一军医大学;2004年
7 孙明林;磷酸钙骨水泥/BMP复合人工骨的研制及相关研究[D];第四军医大学;2001年
8 郭洪刚;可降解性膜材料引导长管状骨再生特点及机制的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
9 鲁红;应用组织工程方法促进牙周组织再生的实验研究[D];第四军医大学;2002年
10 董广英;hBMP_2基因转染牙龈成纤维细胞对牙周组织再生影响的实验研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 司娅萍;β-环糊精对聚乳酸的改性研究[D];汕头大学;2007年
2 林晓斌;鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化肝干细胞的研究[D];汕头大学;2005年
3 刘通方;注射型磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶/BMP注射型复合人工骨的研制及相关研究[D];第四军医大学;2005年
4 闫小龙;深低温冷冻气管移植的实验研究[D];第四军医大学;2005年
5 王律;rhBMP-2/I型胶原在犬气管移植中的缓释作用及其局部ALP影响[D];第四军医大学;2005年
6 高翔;补肾对骨髓形成肝细胞及其基因表达谱的影响[D];湖北中医学院;2005年
7 于多;中草药CD活性成分HS-1的体外抗癌活性研究[D];沈阳药科大学;2003年
8 岑航辉;骨髓间充质干细胞的培养与鉴定[D];浙江大学;2002年
9 高秋明;纤维蛋白胶载体复合骨形态发生蛋白和庆大霉素缓释药物治疗感染性骨缺损的实验研究[D];第四军医大学;2002年
10 羊书勇;以藻酸钙为载体的组织工程骨研究[D];第四军医大学;2002年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 李明忠,吴徵宇,卢神州,贾生贤,姚敏;多孔丝素膜的研制及性能研究[J];丝绸;2001年03期
2 蔡霞!200011,曹谊林,商庆新,关文祥;皮肤组织工程研究进展[J];中华实验外科杂志;2001年03期
3 宁丽,薛淼,黄海宁,孙皎,李亦文,顾国珍,钱云芳,孟爱英,李昌本,赵寿元;皮肤再生膜的生物相容性系列研究[J];中国修复重建外科杂志;2000年01期
4 李明忠,卢神州,李丛新,李锋,吴徵宇;复合丝素膜的制备[J];纺织学报;1998年06期
5 于同隐,邵正中,刘永成,钱江红,刘海鹰,邓家祺,胡德珍,赵慧玲;再生丝素和聚乙烯醇混合膜的结构、性能及其葡萄糖传感器的应用[J];高等学校化学学报;1996年04期
6 苏瑞军,黄绍良,周敦华,李树浓,梁晓燕;人胚胎骨髓基质细胞的体外培养观察[J];中国小儿血液;1999年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 邵华;金秀东;;骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展[J];医学综述;2008年04期
2 廖庆辉;黄震;蔡德鸿;;抗坏血酸、β-甘油磷酸钠和地塞米松联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年01期
3 许圣荣;赵劲民;苏伟;;骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[J];广西医科大学学报;2010年05期
4 孙源;董健;;诱导兔骨髓间充质干细胞成为内皮细胞[J];中国矫形外科杂志;2006年01期
5 薛龙;刘伟;李文芳;章杰;周佳;谢林海;李庆林;;BMSCs分化为阴道上皮细胞的可行性探索[J];江西医药;2010年09期
6 丁洋;万圣云;;体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞为血管内皮细胞的研究[J];安徽医药;2008年04期
7 刘博武;吕安林;燕学波;黄炜;候婧;李垚;;诱导骨髓间充质干细胞分化移植后的心脏电生理特性(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年32期
8 杜振宗;任华;张超纪;宋剑非;郑民;林峰;;骨髓间充质干细胞诱导为血管内皮样细胞的实验研究[J];北京医学;2008年12期
9 王小梅;穆长征;马云胜;;Wnt3a促进大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年23期
10 王亭忠,马爱群,徐正云,杜媛;心肌细胞对骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的影响[J];中南大学学报(医学版);2005年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘昱;宋健;陈锡昌;胡成俊;刘维新;;体外“心肌环境”诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
2 冯凯;陈健琳;乌仁娜;徐晨;李欲航;陈虎;;骨髓间充质干细胞抑制异体T细胞反应的实验研究[A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集[C];2003年
3 宫立众;夏顺中;张翼军;张红宾;史曦凯;钟大平;裴莉;张勇;;骨髓间充质干细胞中大小两群细胞的生物学特性比较[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
4 徐卫;李建勇;朱光荣;费晓明;孟丽娟;周小玉;汪承亚;;骨髓间充质干细胞体外培养的临床研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
5 孙树津;后晓南;胡江;龙勉;陶祖莱;;模拟微重力条件下骨髓间充质干细胞的培养[A];中国空间科学学会空间生命专业委员会2003年中国空间生命科学与航天医学会议论文摘要集[C];2003年
6 刘昱;宋健;陈锡昌;胡成俊;刘维新;;5-氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞体外分化的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
7 楼晓;陈虎;江飞子;冯凯;江岷;胡亮钉;徐晨;李欲航;李渤涛;俞志勇;;骨髓间充质干细胞支持造血重建的研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
8 孙树津;后晓南;龙勉;陶祖莱;;力学环境因素与骨髓间充质干细胞的增殖与分化[A];第七届全国生物力学学术会议论文集[C];2003年
9 张伟;葛薇;李长虹;韩钦;邓为民;尤胜国;赵春华;;骨髓间充质干细胞对单核细胞来源的树突状细胞分化、成熟和功能的影响[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
10 李艳华;张锐;秦立蓬;赵连旭;王蕴芳;岳文;裴雪涛;;重组腺病毒载体pAd-pdx-1的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 赵炜;骨髓间充质干细胞可减轻排异反应[N];健康报;2004年
2 记者 张焕利;既有身不由己 也有蓄意诱导[N];新华每日电讯;2001年
3 左亮;感性与理性的选择[N];医药经济报;2002年
4 记者 刘远达;“那氏诱导”妙不可言 “阳光农业”梦想成真[N];经济参考报;2001年
5 乐绍延;自贬日元为哪般[N];中国民族报;2002年
6 记者 黄凤珍;日本:叫苦是为了嫁祸[N];新华每日电讯;2002年
7 张建松;上海规定旅游“六不准”[N];工人日报;2000年
8 陆敏刚;牧童引牛还是老叟垂钓[N];中国教育资讯报;2002年
9 本报记者 吴洁;为实现“人体配件工厂”的梦想[N];科技日报;2002年
10 乔德芳;广告奇招录[N];经理日报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李海生;低氧促进人骨髓间充质干细胞增殖和分化及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
2 史达;木豆叶联合骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死的实验与相关临床研究[D];广州中医药大学;2007年
3 顾绍峰;兔骨髓间充质干细胞分化为角膜上皮样细胞的体外研究[D];中国医科大学;2008年
4 张伟;骨髓间充质干细胞免疫调节机制的研究[D];中国协和医科大学;2004年
5 张海峰;骨髓间充质干细胞移植对大鼠急性肝功能衰竭治疗作用的实验研究[D];山东大学;2007年
6 牟大鹏;抑制消减杂交技术筛选骨髓间充质干细胞诱导分化前后差异表达基因[D];吉林大学;2007年
7 景红;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导为肾脏系膜细胞样细胞的实验研究[D];中国协和医科大学;2008年
8 宋可新;黑色素细胞与骨髓间充质干细胞复合构建组织工程皮肤的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年
9 滕春燕;骨髓间充质干细胞对急性胰腺炎损伤修复及其机制的实验研究[D];吉林大学;2009年
10 任晓勇;人生长分化因子-5基因转染骨髓间充质干细胞及用于软骨缺损修复的初步研究[D];第四军医大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 许圣荣;自体骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨基质修复软骨缺损的前期研究[D];广西医科大学;2008年
2 林鹏;骨髓间充质干细胞的定向与共培养体系诱导[D];青岛大学;2007年
3 邵华;心肌细胞培养纯化与小鼠骨髓间充质干细胞分化诱导的研究[D];佳木斯大学;2007年
4 余其贵;犬急性心肌梗死后自体骨髓间充质干细胞移植对血管密度和心肌凋亡影响的实验研究[D];安徽医科大学;2008年
5 陈书尚;骨髓间充质干细胞移植治疗心力衰竭的实验研究[D];福建医科大学;2005年
6 刘宏志;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经前体细胞的研究[D];中国医科大学;2005年
7 王艳芳;生物反应器内培养兔骨髓间充质干细胞[D];大连理工大学;2006年
8 陈洁;同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠心梗后心室重构[D];浙江大学;2006年
9 刘弘光;尝试移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠糖尿病[D];中国医科大学;2006年
10 董玉泉;兔骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及生物学特性研究[D];青岛大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026