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《苏州大学》 2007年
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~(131)I-Herceptin对乳腺癌放射免疫显像和治疗的实验研究

杨志学  
【摘要】: 第一部分:~(131)I-Herceptin对乳腺癌细胞株的放射免疫治疗 目的(:1)获得高标记率和纯度的~(131)I-Herceptin(。2)了解~(131)I-Hercep tin对高表达Her-2基因的乳腺癌细胞株的生物学作用。 方法:(1)用Iodogen法将~(131)I标记到Herceptin,Sephadex G50柱纯化,纸层析法质量检测。(2)MTT比色法检测~(131)I-Herceptin对表达不同水平Her-2的三株乳腺癌细胞株SK-BR-3、MDA-MB-231、MCF-7的抑制作用;(3)流式细胞计数仪测量各干预组和对照组DNA倍体和凋亡率。 结果:(1)Herceptin的~(131)I标记率83.38%,放化纯94.53% (2)MTT法检测结果显示:~(131)I-Herceptin对SK-BR-3细胞的抑制作用明显强于对MDA-MB-231﹑MCF-7细胞的抑制作用(P0.05),并且明显强于~(131)I组﹑Herceptin组以及~(131)I+Herceptin组(P0.05)。(3)流式细胞分析表明:~(131)I-Herceptin组的凋亡率(37.71%)要明显高于~(131)I+Herceptin组(14.61%)(P0.05),Herceptin组(3.37%)和~(131)I组(0.93%)(P0.01),并且各干预组都出现细胞周期的阻滞,~(131)I-Herceptin最明显(73.19%)。 结论:(1)Iodogen法~(131)I标记Herceptin简单易行,标记效果可靠,标记率高(83.38%),对抗体的免疫活性影响小。 (2)人乳腺癌细胞株SK-BR-3高表达Her-2基因(99.30%) (3)~(131)I-Herceptin对人乳腺癌细胞SK-BR-3组有明显的抑制和杀伤作用。 第二部分:~(131)I-Herceptin在乳腺癌动物模型中的显像研究 目的:(1)建立Her-2高表达的乳腺癌动物模型。(2)对所建动物模型进行SPECT肿瘤原位显像。(3)了解小鼠体内~(131)I-Herceptin的生物分布并计算肿瘤与非肿瘤组织的放射性比值(T/NT)和每克组织的放射性计数占注射剂量放射性计数的百分比。 方法:(1)以对数生长期的SK-BR-3细胞皮下接种BALB/c-neu裸鼠建立动物模型。(2)于注射~(131)I-Herceptin后的2﹑4﹑8﹑12﹑24、48﹑96小时对荷溜小鼠模型进行SPECT连续显像。(3)测量小鼠注射后的4﹑12﹑24﹑48小时每克各组织每分钟的放射性计数(cpm/g),并计算T/NT以及%ID/g。 结果:(1)SK-BR-3细胞皮下接种BALB/c-neu裸鼠后成榴率96%。 (2)实验组在注射~(131)I-Herceptin 2小时后就可见肿瘤部位的显像,在24小时达到最清晰图像,与周围组织对比最明显,在96小时依然可看到肿瘤部位较清晰的图像;而注射~(131)I-mIgG的对照组,在开始4个小时可隐约看到肿瘤轮廓,随着时间推后,显像渐不清晰,96小时几乎看不到肿瘤轮廓。(3)实验组,T/NT值除了在肾脏未达到1外,在其余脏器均大于1,并且绝大多数大于3,在24小时肿瘤/肌肉的比值可达到14.87,在96小时仍然可见较大的T/NT值;在对照组,除了在骨骼和肌肉T/NT值大于1外,在其余各脏器均未达到1,并且T/NT值未见大于2的。在实验组,24小时肿瘤部位每克组织放射性计数占注射剂量放射性计数的14.85%(14.8%ID/g),而对照组为2.05%ID/g(P0.05)。 结论:(1)以SK-BR-3细胞皮下接种裸鼠成瘤率高(96%)。 (2)用~(131)I-Herceptin对荷SK-BR-3移植裸鼠模型显像能够得到清晰的图像。 (3)体内分布实验表明,~(131)I-Herceptin注射后能得到理想的T/NT值,在24小时达到最大。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R737.9

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