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《苏州大学》 2007年
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CDC2/CyclinB1在针对人胶质瘤发生发展相关组织芯片中的表达及意义

翟德忠  
【摘要】: 一、研究背景与目的:1 神经胶质瘤是中枢神经系统中最常见的肿瘤,其发生、发展是一个长期的多因素作用、分阶段过程。这个过程涉及多个基因的改变,包括癌基因的激活、抑癌基因的失活、以及凋亡调节的DNA修复基因的改变,涉及的分子成千上万。目前虽然已知数十个基因与胶质瘤发生、发展相关,但处在上游位置,起核心作用的基因仍然未明。CDC2基因是我们在胶质瘤细胞分化与去分化的基因芯片中发现的与胶质瘤发生、发展相关的基因,而CyclinB1是调节CDC2的关键蛋白。本研究旨在从蛋白表达水平验证并判断CDC2能否作为胶质瘤的病因分子做进一步研究。 二、方法: 设计布有各级别人脑胶质瘤、人脑胶质瘤体外细胞系球体及其移植瘤组织、脑肿瘤干细胞、神经干细胞和相应的对照标本共118例的的组织微阵列,应用组织芯片仪制作组织芯片蜡块,切片后进行CDC2、CyclinB1免疫组织化学染色。 三.结果: 成功制作二块相同的包含118例样本、孔径1.5mm的组织芯片蜡块,熔蜡后切成4um的组织微阵列。有5点阵发生移位,点阵无脱落。HE染色观察符合原始病理诊断。CDC2/CyclinB1染色阳性表达位于细胞核。在71例人脑胶质瘤组织中,CDC2阳性表达率为54.9%,与正常成人脑组织(18.2%)比较,有显著统计学差异(P0.05)。各级别人脑胶质瘤组织中的CDC2阳性表达率分别为Ⅰ级22.2%,Ⅱ40.0%,Ⅲ级69.6%,Ⅳ级78.6%;相邻级别间的差异有显著性(P0.01);并且,病理级别与CDC2的阳性表达率呈正相关(rs=0.982,t=7.426,P0.05)。SHG44细胞、GBM细胞的CDC2阳性表达率高于神经干细胞、脑肿瘤干细胞(P=0.0014)。71例人脑胶质瘤组织中CyclinB1表达阳性率为52.1%。11例正常成人脑组织中CyclinB1阳性率为9.0%,病例组与对照组比较差异有显著性(P0.05)。不同级别人脑胶质瘤中CyclinB1的表达差异也有显著性(P0.05),并且,病理级别与CyclinB1的阳性表达率呈正相关(rs=0.959, P0.05)。在体外培养的胶质瘤细胞球体、裸鼠皮下移植瘤、人胚胎脑和裸小鼠骨髓中均高表达,而脑肿瘤干细胞和神经干细胞球体未见表达。CDC2和CyclinB1的联合表达率为89.7%,两者表达呈正相关(rs=0.900, P0.01)。 四、结论: CDC2和CyclinB1的表达强度随着脑胶质瘤恶性度增高而表达量增加,在促进胶质瘤恶性进展中起重要作用。CDC2和CyclinB1在细胞分裂基本处于静止期的神经干细胞、脑肿瘤干细胞低表达,而在细胞增殖活跃的SHG44和GBM细胞球体中高表达,表明其在抑制细胞分化中也起重要作用。CDC2无论在mRNA和蛋白水平上都可作为胶质瘤的病因分子做进一步研究。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R739.4

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【参考文献】
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