收藏本站
《苏州大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

自噬/溶酶体途径在小鼠皮层神经元糖氧剥夺离体缺血模型中的作用

陈皎皎  
【摘要】: 目的:研究在氧气和葡萄糖被剥夺的情况下,体外培养的皮层神经元中自噬/溶酶体的变化及在神经细胞损伤中的作用。 方法:采用OGD(oxygen glucose deprivation)法建立小鼠皮层神经元体外缺血模型,用免疫细胞化学法检测模型神经元的损伤,MTT法检测神经元的存活率;MDC观察OGD处理对神经元自噬活性的影响;Western Blot和免疫细胞化学法检测自噬溶酶体途径相关蛋白LC3、Beclin-1、Lamp-2蛋白的表达;给予自噬抑制剂3-methyladenine (3-MA,10 mM),通过LDH漏出率检测3-MA对缺氧引起的神经元损伤的影响。Western Blot检测3-MA对模型中神经元自噬相关蛋白LC3、Dram、Beclin-1、Lamp-2和凋亡相关蛋白p53、PUMA、Bcl-2、DRAM蛋白的表达影响。 结果:我们利用OGD法成功建立了小鼠皮层神经元体外缺血模型。免疫细胞化学和MTT结果证实了糖氧剥夺(OGD)处理对于神经元的损伤是剧烈的,并且呈现一定的时间相关性。Western Blot和免疫细胞化学结果显示,LC3和Beclin-1在短暂OGD处理后表达降低但随后立即上升,在1 h达到峰值(P0.05),2 h又开始下降(P0.05)。同时分子伴侣自噬的标记物LAMP-2的表达也是由弱到强,同样在1 h达到峰值(P0.05),2 h表达仍较高。在加入3-MA后,缺氧时间短的神经元(1 h以内),其损伤相较于单纯缺氧进一步加剧(P0.05),提示自噬的保护作用在于OGD的早期,与自噬的高活性相关。利用Western Blot法我们检测了凋亡相关蛋白p53、PUMA和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,发现随OGD时间的延长,p53和PUMA的表达均显著增加(P0.05),而Bcl-2的表达则逐渐下降(P0.05)。DRAM蛋白的表达在OGD 2 h达到最高(P0.05),提示自噬途径在神经元OGD模型中的作用已经发生改变,凋亡成为细胞内主要的反应。 结论:1.糖氧剥夺对小鼠原代皮层神经元产生了致死性的损伤。2.此损伤过程伴随了自噬的发生,并且在短期内自噬活性达到峰值随后下降。3.自噬在神经元的OGD处理的早期起到了保护作用,晚期的作用被凋亡作掩盖。4.凋亡在OGD处理晚期被启动,可能是神经细胞在OGD条件下死亡的主要机制。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R741

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李君;龙林梅;雷陈;梁中琴;;自噬在神经胶质瘤放化疗中的作用及其分子调控机制研究进展[J];中国药理学与毒理学杂志;2011年01期
2 强强;马建芳;王晓强;潘静;赵开军;孙青芳;卞留贯;;大鼠全脑缺血再灌注损伤后海马自噬相关蛋白Beclin 1的表达变化[J];中国微侵袭神经外科杂志;2009年04期
3 孔晓霞;张宏宇;康劲松;;Bcl-2在H_2O_2诱导神经胶质瘤自噬中的作用[J];中国病理生理杂志;2010年10期
4 崔侨;田代真一;小野寺敏;池岛乔;;冬凌草甲素通过诱导人宫颈癌HeLa细胞自噬下调凋亡的机制[J];药学学报;2007年01期
5 陈亮;辛钟成;郭应禄;;Leydig细胞睾酮合成功能和自噬调控[J];中国男科学杂志;2007年11期
6 刘全;王建军;潘永成;孟利峰;詹曦;郑庆丰;;Beclin1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J];肿瘤防治研究;2008年03期
7 贾勇圣;刘彦明;王会珍;张丹参;;程序性细胞死亡与循环经济[J];河北北方学院学报(医学版);2008年06期
8 杨光;祝元刚;杨慧;;雷帕霉素抗神经退行性病研究进展[J];基础医学与临床;2008年12期
9 钟春林;陈丽;;自噬在心脏疾病中的研究[J];国际心血管病杂志;2009年05期
10 杨光明;高鹏;郑杰;;自噬——程序性细胞死亡的执行者与管理者[J];医学综述;2010年14期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 韦雪;漆永梅;张迎梅;;镉、活性氧自由基与自噬发生的分子机制[A];中国活性氧生物学效应学术会议论文集(第一册)[C];2011年
2 李康生;代剑平;;病毒感染与细胞自噬[A];新发和再发传染病防治热点研讨会论文集[C];2011年
3 王平;;骨骼肌自噬及运动对其影响机制研究进展[A];2011年中国生理学会运动生理学专业委员会会议暨“运动与骨骼肌”学术研讨会论文集[C];2011年
4 胡占英;张靖溥;孟杰;佟军威;秦伟;;斑马鱼自噬途径与帕金森病的相关性[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
5 陈永;邹珅珅;谢志平;梁永恒;;酿酒酵母中的小G蛋白Ypt51对细胞自噬的影响[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
6 ;自噬改变在锰诱导的PC12细胞毒性中的作用[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年
7 高俊玲;洪铭岩;王焕;李冉;田艳霞;都灵杰;崔建忠;;大鼠弥漫性脑创伤后脑皮质神经元自噬的变化[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
8 邹珅珅;陈永;刘玉涛;谢志平;梁永恒;;酿酒酵母中的Trs130参与细胞自噬的研究[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
9 陈加祥;伍一军;;溶血磷脂酰胆碱促进人成神经瘤SH-SY5Y细胞自噬[A];全国生化/工业与卫生毒理学学术会议论文集[C];2010年
10 胡帅尔;杨杏芬;黄俊明;周静;沈汉明;;穿心莲内酯对自噬及顺铂诱导细胞凋亡的影响[A];中国毒理学会第三届中青年学者科技论坛暨2011年全国前列腺药理毒理学研讨会论文集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 张明永;水稻自噬基因研究取得新进展[N];广东科技报;2011年
2 记者白毅;介入细胞自噬过程可减轻缺血性脑损伤[N];中国医药报;2009年
3 记者 胡德荣;肝癌患者自噬性缺陷表型与预后不良紧密相关[N];健康报;2008年
4 记者 白毅;北大揭示抑癌因子抗肿瘤新机制[N];中国医药报;2010年
5 记者 任海军;卵巢癌为何常常复活?生死命悬一基因[N];新华每日电讯;2009年
6 任海军;美找到卵巢癌易复发原因[N];大众卫生报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 谢莹;晚期糖基化终产物诱导内皮细胞中的自噬[D];苏州大学;2011年
2 易聪;乙酰化在自噬过程中的功能和分子机制的研究[D];清华大学;2012年
3 曾蓉;饥饿诱导的自噬在多发性骨髓瘤细胞中的特点及冬凌草甲素作用的机制研究[D];华中科技大学;2011年
4 张俊;自噬在肺缺血再灌注损伤中的作用及其机制研究[D];华中科技大学;2013年
5 郑芳;两种小分子化合物调节自噬及其相关生物学功能的研究[D];中国科学技术大学;2012年
6 张艳林;自噬在氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞损伤中的作用及其机制探讨[D];苏州大学;2010年
7 徐秋林;自噬在心肌缺血—再灌注损伤中的不同作用[D];南方医科大学;2012年
8 吴雅春;自噬在结肠癌及胃癌细胞体外药物干预过程中的作用研究[D];浙江大学;2010年
9 蔡增林;Dynein在α-synuclein自噬性清除中的作用[D];苏州大学;2010年
10 肖荣;自噬在严重烧伤早期心肌损害中的作用及其机制研究[D];第三军医大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 涂芊茜;自噬在脂肪酸诱导肝损伤中的作用及机制的初步研究[D];第二军医大学;2011年
2 陈哲;自噬在人骨髓间充质干细胞放射损伤过程中的作用研究[D];兰州大学;2011年
3 张晓延;肠道病毒71型诱导细胞自噬、凋亡及相互调控关系的研究[D];北京协和医学院;2011年
4 高灵素;自噬对多发性骨髓瘤细胞生存及增殖的影响及其可能机制[D];苏州大学;2012年
5 冯文峰;血小板中自噬发生及功能研究[D];浙江大学;2012年
6 周蜜;自噬与慢性阻塞性肺疾病[D];重庆医科大学;2013年
7 李媛媛;奥沙利铂诱导人肝癌细胞株自噬潮的增加及其对细胞活力的影响[D];安徽医科大学;2013年
8 刘宣宣;镉诱导人肝肾细胞自噬及相关蛋白作用初步研究[D];南京师范大学;2013年
9 陈清凤;工频磁场对中国仓鼠肺成纤维细胞自噬的诱导作用[D];浙江大学;2011年
10 解艳艳;肿瘤细胞自噬与肿瘤细胞抗药性机理的初步研究[D];山东大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026