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《苏州大学》 2008年
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鞘内注射氟代柠檬酸对骨癌痛大鼠的镇痛作用

彭艳  
【摘要】: 第一部分大鼠骨癌痛动物模型的建立 目的通过行为学、放射学、病理学等方法,建立并评价大鼠骨癌痛模型。方法将大鼠腹水传代培养的Walker-256肿瘤细胞,种植于SD大鼠左侧胫骨上端,建立骨癌痛动物模型。16只SD大鼠随机分为2组(每组8只):假手术组(Sham组)和骨癌痛组,分别于左侧胫骨注射Hanks液和Walker-256肿瘤细胞。于注射前1天、注射后1、3、7、14、21天观察大鼠的体重和疼痛痛行为学的变化。疼痛行为学包括以Von Frey纤维丝刺激足底测量机械缩足阈值(PWMT)、热辐射缩足反射潜伏期(TWL)、行走后足使用评分。骨癌痛组大鼠于建模后第6、12、18天进行X线检查评估胫骨破坏程度,第21天取罹患肿瘤的胫骨进行组织切片,HE染色光镜下观察肿瘤组织和骨结构破坏情况。结果1):骨癌痛组大鼠在建模后第14、21天的体重与基础值和假手术组比较显著下降(P<0.01),而假手术组大鼠体重与基础值比较增加(P<0.05)。2)骨癌痛组大鼠从建模后第5天开始,左后爪PWMT显著降低,低于术前的基础值(P<0.01),并持续下降至建模后第21天;与假手术组和基础值比较差异明显(P<0.01);骨癌痛组大鼠术后第3天左后爪TWL下降,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01),第5~21天,骨癌痛组大鼠TWL值又逐渐恢复,与假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05);骨癌痛组大鼠第14天开始出现行走使用评分下降,与基础值和假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。3)骨癌痛组大鼠左侧胫骨X线摄片可见明显的骨破坏,左胫骨病理切片显示肿瘤细胞生长。结论疼痛行为学、放射学、组织学多方面研究的结果表明大鼠骨癌痛模型建立成功。 第二部分脊髓胶质细胞在骨癌痛中的作用 目的:通过免疫组化方法观察脊髓胶质细胞在脊髓的表达,探讨脊髓胶质细胞在骨癌痛成因中的作用。方法20只SD大鼠分为2组:假手术组(n=5)和骨癌痛组(n=15),骨癌痛组分别在术后第7d、14d、21d各处死5只大鼠取腰段脊髓,假手术组术后7d取腰段脊髓。采用免疫组化方法分别测定脊髓星形胶质细胞的标志物胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)和小胶质细胞标志物OX-42阳性细胞在脊髓的表达。结果1)术后第7天骨癌痛组大鼠脊髓GFAP表达开始增加,至第14天明显增加,持续增加至术后21天,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。2)术后第7天骨癌痛组大鼠脊髓OX-42表达开始增加,至第14天明显增加,持续增加至术后21天,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞表达随着病程的发展逐渐增加,表明脊髓胶质细胞可能参与了大鼠骨癌痛的形成。 第三部分鞘内注射氟代柠檬酸对骨癌痛大鼠痛阈的影响 目的研究特异性胶质细胞代谢抑制剂氟代柠檬酸(Fluorocitrate,FC)对骨癌痛大鼠机械痛阈的影响。方法12只大鼠随机分为2组,PBS组,骨癌痛模型十PBS组;FC组,骨癌痛模型十FC组。大鼠骨癌痛模型建立后当天鞘内置管,置管后14d鞘内分别注射PBS10μl、FC1nmol(10μl),给药前1h(baseline)和给药后1、2、4、6、8、10、12、24h测定机械缩足反射阈值(Paw withdrawl mechanical threshold,PWMT)。结果FC组大鼠鞘内注射氟代柠檬酸1nmol后,PWMT在4h后开始升高,至8h PWMT值升至最高,与PBS组和基础值比较,差异均有统计学意义(P<0.01),之后PWMT又逐渐下降,24h时基本恢复术前基础痛阈值水平。结论鞘内注射氟代柠檬酸可提高骨癌痛大鼠的机械痛阈,减轻骨癌引起的机械性痛觉过敏。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R738.1

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