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《苏州大学》 2008年
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肺血栓栓塞症早期血液标志物变化及溶栓后肺组织缺血再灌注损伤研究

倪松石  
【摘要】: 【背景及目的】 肺血栓栓塞症是临床常见病,严重威胁着患者的生命和健康。早期诊断、早期治疗、改善预后,是临床工作者面临的重大问题。如何早期诊断肺血栓栓塞症?肺血栓栓塞后肺组织缺血再灌注损伤机制如何?通过何种措施来干预缺血再灌注并发症的发生?本研究应用多种实验方法分三个部分逐一探讨了上述问题。本研究主要观察了肺血栓栓塞症后早期血LDH同工酶与D-二聚体的动态变化,探讨其早期诊断价值;通过观察组织型纤溶酶原激活物及其抑制物-1在肺动脉中表达的变化,探讨肺动脉局部凝血与纤溶机制;同时通过检测超氧化物歧化酶、丙二醛、肺组织细胞间粘附分子-1等因子的变化探讨了急性肺血栓栓塞症溶栓治疗后再灌注损伤的发生及发生机制;此外,应用葛根素作为干预剂研究其在肺组织缺血再灌注损伤中的保护作用。 【方法】 (1)采用自体血加凝血酶及自体血加凝血酶加人纤维蛋白原制备的自体血栓由股静脉输入建立急性肺血栓栓塞的模型。作螺旋CT检查,栓塞前后做肺血管造影,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测D-二聚体的试剂盒测血浆D-二聚体浓度、用全自动生化仪及全自动快速电泳仪测LDH及其同工酶。(2)用免疫组织化学及Western blot方法检测肺动脉组织中t-PA及PAI-1蛋白表达水平。(3)测定各组血清超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)及湿/干重比值;行病理及电镜观察;用免疫组织化学及RT-PCR方法检测各组肺组织中ICAM-1的表达。 【结果】 (1)栓塞组D-二聚体于栓塞后30分钟明显上升,1-2小时达高峰,24小时后明显下降。栓塞组栓塞后2小时至4天LDH3的百分率和绝对值明显升高,24-48小时达高峰。(2)t-PA在栓塞后4h表达开始增高, 8h表达进一步增强,24h达高峰。PAI-1在栓塞后4h开始降低,8h降至低谷。PAI-1在栓塞后24h表达有所恢复。(3)病理学及SOD、MDA、肺湿/干重比值结果提示急性肺血栓栓塞溶栓治疗时发生再灌注损伤,免疫组织化学显示:ICAM-1在假手术组呈阴性表达,尿激酶溶栓组较单纯栓塞组表达增强,葛根素组较尿激酶溶栓组表达减弱。RT-PCR结果与免疫组织化学结果基本一致,ICAM-1mRNA表达在尿激酶溶栓组组较单纯栓塞组增强,葛根素组较尿激酶溶栓组表达减弱。 【结论】 (1)D-二聚体、LDH3在急性肺血栓栓塞的早期有一个相对特征性的动态变化过程,联合检测D-二聚体、LDH3有助于急性肺血栓栓塞症的早期诊断。(2)急性肺栓塞后,t-PA表达水平随时间而逐渐增高,PAI-1表达呈现一过性降低,表明了在肺动脉栓塞早期,机体的纤溶功能明显增强,这与肺血管的t-PA和PAI-1表达平衡变化有关。(3)急性肺血栓栓塞溶栓治疗时可发生再灌注损伤,粘附分子ICAM-1表达增高;葛根素可能通过抗氧化和抑制ICAM-1的表达对肺缺血再灌注损伤起保护作用。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R563.5

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