收藏本站
《苏州大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

组织工程骺板的构建及其治疗骺板损伤的实验研究

尹航  
【摘要】: 一、骺板组织工程种子细胞——兔骺板软骨细胞体外培养及其细胞表型的研究 目的探索体外培养兔骺板软骨细胞的方法,并对其细胞表型进行初步研究,为骺板组织工程寻找良好的种子细胞。 方法取两周龄,体重250g左右幼兔胫骨上端骺板,经过机械剪切、胰酶、胶原酶的消化获得细胞后,1640培养基体外培养。应用倒置显微镜、透射电镜、Alcian blue染色、蕃红花“O”--亮绿染色,免疫组织化学染色、PCR、MTT等方法,对细胞进行定性、定量检测。 结果在体外观察到了骺板软骨细胞贴壁生长及传代的生长过程,多次传代后增殖能力降低。PCR检测有II型胶原的表达、蕃红花“O”--亮绿染色阳性、Alcian blue染色显示第三代细胞蛋白聚糖含量高,MTT显示第三代细胞生长曲线呈倒“S”型,于第12天出现生长抑制。 结论成功地建立了骺板软骨细胞的体外培养方法,并证实所培养出的细胞是骺板软骨细胞。 二、组织工程骺板的构建——兔骺板软骨细胞分别与多孔聚乳酸、多孔丝素构建两种组织工程骺板并比较其体外相容性 目的探索兔骺板软骨细胞与生物支架材料复合构建组织工程骺板的可行性。 方法将体外培养的第三代兔骺板软骨细胞分别与多孔聚乳酸材料、多孔丝素材料复合,构建两种组织工程骺板。应用扫描电镜、激光共聚焦显微镜、MTT等方法,对细胞与材料的相容性进行观察,并对两种生物支架材料进行比较。 结果兔骺板软骨细胞在支架材料上生长良好,随着培养时间的延长,分裂增殖的细胞逐渐增多。细胞在两种材料上生长情况类似,统计学显示无显著性差异。 结论多孔聚乳酸材料和多孔丝素材料均具有良好的生物相容性,可以作为骺板组织工程理想的载体材料。 三、组织工程骺板治疗骺板损伤的动物实验研究——两种组织工程骺板分别治疗骺板损伤并对其进行比较 目的探索组织工程骺板在治疗骺板损伤中的作用。 方法将两种组织工程骺板分别植入骺板损伤的模型中,同时设单纯植入材料组、空白对照组。应用组织学、BrdU细胞示踪、X线等方法,观察成角畸形和短缩畸形情况。同时对两种组织工程骺板、以及两种支架材料进行比较。 结果空白组,骨桥明显,短缩畸形和成角畸形显著;单纯植入支架材料组,短缩畸形和成角畸形明显;组织工程骺板组,存在较小的短缩畸形和成角畸形。统计学显示三种方法存在显著性差异,两种组织工程骺板之间,两种支架材料之间无显著性差异。 结论组织工程骺板治疗骺板损伤是一种有效的方法,其疗效优于单纯植入生物支架材料。 四、人骨骺软骨细胞体外培养及鉴定的初步研究 目的建立体外培养及鉴定人骨骺软骨细胞的方法。 方法取人多指切除手术之多指骨骺,先行机械剪切,后用胰蛋白酶及II型胶原酶消化,再接种于1640培养基中体外培养。应用蕃红花“O”--亮绿染色,Alcian blue染色,免疫组化II型胶原染色和MTT检测,对其生物学特性进行了观察和鉴定。 结果在体外观察到了人骨骺软骨细胞贴壁生长及传代的生长过程,多次传代后增殖能力降低。蕃红花“O”--亮绿染色阳性。Alcian blue染色阳性。免疫组化II型胶原染色阳性。MTT显示生长曲线呈倒“S”型,至第15天细胞出现生长抑制。 结论成功地建立了人骨骺软骨细胞的体外培养方法,并证实所培养出的细胞是人骨骺软骨细胞。
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R318.0

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张爱明;骺板损伤的诊断与治疗进展[J];中华创伤骨科杂志;2003年04期
2 肖睿,唐强,蔡程,王义礼;儿童骺板损伤的疗效分析[J];华西医学;2005年01期
3 燕铁斌,徐斌铨;儿童骺板损伤[J];安徽医科大学学报;1990年01期
4 郭军;李晓东;马志新;李小伟;贾立周;范晓梅;;骺板损伤后修复过程中多种生长因子的表达规律[J];内蒙古医学院学报;2006年S1期
5 尹飞;郭丽;王金成;高中礼;段德生;;人工骺板软骨对家兔骺板损伤的修复作用[J];吉林大学学报(医学版);2005年06期
6 戴建宇;王朝晖;张玲莉;;儿童骺板损伤致部分骺板早闭1例[J];中国法医学杂志;2009年05期
7 陈伟,甘义明,孙丹舟;踝内翻二例报告[J];吉林大学学报(医学版);2002年04期
8 刘筠,刘志强,韩悦,廉宗溦;家兔骺板直接损伤的影像病理动态研究[J];医学影像学杂志;2005年07期
9 叶艳平;陈爱民;;可吸收聚消旋乳酸棒对兔骺板生长的影响[J];第二军医大学学报;2007年09期
10 练克俭;纪玉清;洪加源;翟文亮;丁真奇;赵卫东;;骨骺生长滑动钢板的设计及生物力学研究[J];中国临床解剖学杂志;2008年06期
中国重要报纸全文数据库 前2条
1 刘印文(曙光医院骨伤科主治医师 医学硕士);小儿骨折的治疗[N];上海中医药报;2002年
2 上海中医药大学附属曙光医院骨伤科主治医师 刘印文;小儿骨折处理与成人有区别[N];上海中医药报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 尹航;组织工程骺板的构建及其治疗骺板损伤的实验研究[D];苏州大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 李文超;微囊化骺板软骨细胞移植修复幼兔骺板损伤的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
2 廖士平;兔骺板软骨细胞体外培养、鉴定及其细胞表型的研究[D];蚌埠医学院;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026