HBV相关慢加急性肝衰竭患者共刺激分子、IFN-γ的表达及其临床意义的初步探讨

【摘要】： 第一部分HBV相关慢加急性肝衰竭患者外周血CTL上共刺激分子表达及其与预后的关系 背景慢加急性肝衰竭在我国大多由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus ,HBV)引起,其病死率高,发病机制复杂。乙型肝炎重症化的重要因素为机体对病毒产生的超强免疫应答。共刺激分子(Co-stimulator)在淋巴细胞的激活和行使效应功能中发挥重要的调节作用,国内研究表明PD-1 (programmed death1)在肝衰竭患者特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell CTL)上高表达,然而肝衰竭患者不同时期机体免疫状态是动态变化的。有关CTL上PD-1、PD-L1((programmed death1-liagnd1 )、细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4 ( Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CTLA-4)、CD28在HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)中不同时期的表达变化未有相关报导。 目的探讨PD-1/PD-L1、CTLA-4、CD28在HBV-ACLF不同时期CD8+T上的阳性表达、动态变化及其临床意义。 方法研究对象为43例HBV-ACLF患者、15例慢性乙型肝炎患者(CHB)以及15例正常人,用流式细胞术检测外周全血中CTL细胞上PD-1、PD-L1、CTLA-4、CD28的阳性表达;并观察慢加急性肝衰竭患者早期、中期、晚期共刺激分子的动态变化;比较存活组与非存活组CD8+T细胞上负性共刺激分子表达水平的差异 结果1.HBV-ACLF患者、CHB患者及正常对照外周血CTL细胞及共刺激分子的阳性表达分别如下:①CTL:(22.62±9.61)%,(13.68±3.99)%,(17.45±4.02)% ;②CD28: (25.37±11.25)%,(10.07±4.32)%,(18.10±3.70)%;③PD-1:(14.93±7.03)%, (9.95±1.93)%, (6.41±1.93)%;④CTLA-4:(15.06±4.87)%,(11.06±2.60 )% ,(6.25±2.42)%。对各分子进行HBV-ACLF与CHB,CHB与正常对照进行组间比较均具有显著性差异 2. HBV-ACLF早期、中期、晚期CTL及共刺分子表达分别为:①CTL:(31.59±6.50)%,(20.88±5.92)%,(13.21±6.58)%;②CD28:(35.94±9.09)%,(24.75±6.90)%,(13.07±3.90)%;③PD-1 (6.19±3.02)%,(13.53±3.98)%,(23.22±3.93)%;④PD-L1:(3.70±2.17)%, (7.10±2.69)%, (12.31±3.82)%;⑤CTLA-4:(8.79±2.10)%,(12.41±2.42)% , (18.21±2.23)%。对各分子早期与中期,中期与晚期进行组间比较均具有显著性差异。 3. HBV-ACLF存活组与非存活组CTLA-4、PD-1表达水平,并进行组间比较结果均具有显著性差异,结果如下:①CTLA-4:(10.12±4.71)%,(14.21±4.86)%(P= 0.004);②PD-1:(11.05±6.87)%, (18.31±5.80)% (P=0.006)。 结论HBV相关慢加急性肝衰竭患者CTL细胞上共刺激分子的表达水平能部分反映患者免疫功能状态,CD28升高可能提示免疫增强;CTLA-4,PD-1,PD-L1的升高可能提示免疫抑制,存活组CTL细胞上负性共刺激分子CTLA-4、PD-1水平低于非存活组,提示负性共刺激分子过度表达对预后不利。HBV-ACLF患者外周血共刺激分子的动态变化可以判断其免疫状态,对于指导临床治疗和判断预后可能具有一定的价值。 第二部分HBV相关慢加急性肝衰竭患者不同时期血清IFN-γ的表达及其与正性共刺激分子CD28的相关性 背景HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)时免疫损伤以细胞免疫为主,体液免疫为辅。其介导肝损害的主要机制是细胞介导的细胞毒作用。正性共刺激分子参与T淋巴细胞活化,是细胞免疫的关键信号分子,而干扰素γ( interferonγ,IFN-γ)是由活化的Th1细胞分泌的细胞因子,在病毒清除及肝细胞损伤中起着重要的作用, ACLF时两者的相关性未见有报道。 目的探讨HBV-ACLF患者不同时期外周血IFN-γ的动态变化及与CD28相关性。方法研究对象为43例ACLF患者、15例CHB患者以及15例正常对照,ELISA技术检测外周血清IFN-γ的表达水平,动态观察慢加急性肝衰竭患者早期,中期,晚期IFN-γ的动态变化,同时进行IFN-γ与正性共刺激分子CD28的相关性分析。 结果1. HBV-ACLF患者、CHB患者以及正常对照外周血清IFN-γ水平分别为:(405.2±73.4)pg/ml、(311.2±36.5)pg/ml、(356.4±36.7)pg/ml;对AFLP与CHB及CHB与正常对照分别进行两组间比较具有显著性差异,P值分别为:(0.006, 0.031)。2. ACLF患者早期、中期、晚期IFN-γ水平分别为:(474.4±85.6)pg/ml、(391.7±34.4)pg/ml、(296.5±56.1)pg/ml;对早期与中期及中期与晚期分别进行两组间比较具有显著性差异,P值分别为(0.035,0.005)。3.对HBV-ACLFA患者的血清IFN-γ水平和CTL细胞上CD28阳性表达进行直线相关分析,得出相关系数r=0.72457,P0.05,即肝衰患者的血清IFN-γ水平和正性共刺激分子CD28存在直线相关关系。 结论HBV-ACLF患者早期外周血清中血清中IFN-γ升高显著,同时患者外周血清IFN-γ的水平与CTL细胞上正性共刺激分子CD28正相关。IFN-γ对于判断肝衰竭患者免疫状态,对指导临床免疫调控治疗可能具有一定价值。

【关键词】：乙型肝炎病毒 共刺激分子 慢加急性肝衰竭 流式细胞术 乙型肝炎病毒 IFN-γ 慢加急性肝衰竭 ELISA
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R575.3
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