收藏本站
《东南大学》 2016年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

PM_(2.5)对肺部iNOS释放和NO合成的影响及其机制探究

昂盛骏  
【摘要】:[目的]探讨南京市大厂区大气细颗粒物(PM2.5)对肺部合成一氧化氮(nitricoxide, NO)、诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase, iNOS)活性的影响及其机制。[方法]采用空气总悬浮颗粒物采样器采集南京市大厂区PM2.5,用去离子水超声法提取并制成0、10、25、50、100、200、400μg/ml的悬液,用电感耦合等离子色谱质谱法(ICP-MS)测重金属元素含量,用透射电镜测定样品的粒径分布,利用气相色谱质谱仪(GC-MS)测样品中有机成分,体内实验选择C57BL/6小鼠,采用气管滴注急性染毒,用硝酸还原酶法测一氧化氮,用一氧化氮合酶测定试剂盒测一氧化氮合酶,用逆转录PCR(Real-time-PCR)法检测iNOSmRNA表达水平的改变。体外实验选A549细胞,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法测定细胞毒性,一氧化氮、一氧化氮合酶和iNOSmRNA表达水平的的测定同体内实验。用蛋白质免疫印迹(WesternBlotting)法测iNOS、核转录因子kappaB (NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(p38-MAPK)蛋白表达水平的改变,NF-κB和p38-MAPK两条通路的抑制剂分别采用PDTC和SB203580。数据以均数±标准差(χ士s)表示,用SPSS 19.0软件包进行统计学分析,采用最小极差法(LSD)比较数据,P0.05表示差异有显著性。[结果]在南京市大厂区收集的PM2.5中,Al、Pb、Mn和As占所测金属元素的93.4%,有机物中占比重较高的元素多与工业相关,粒径分析表明PM2.5的粒径大多集中在1μm以内。PM2.5染毒小鼠后,其肺部NO和iNOS的生成量随染毒剂量的增加而逐渐增多,同时iNOSmRNA表达量上调,高剂量组的NO含量为6.53±0.77μmol/gprot,约为对照组的4倍,高剂量组的iNOS含量为0.58±0.073,约为对照组的3倍。PM2.5对A549细胞的MTT实验呈剂量-反应关系(r=0.971,P0.05),且NO和iNOS释放量随剂量增加而升高,染毒剂量为100μg/ml时,NO释放量高达97.4±11.11μmol/L,是对照组的7倍;iNOS释放量为16.16±0.75M/ml,与对照组相比增加了约30%。经SB203580和PDTC两种抑制剂预处理后,iNOS释放量下降,抑制剂SB203580浓度为25μg/ml时,iNOS释放量为3.149±0.139M/ml,抑制剂PDTC浓度为25μg/ml时,iNOS释放量为4.361±0.182M/ml,约占对照组1/4;同时iNOSmRNA表达量下调,与阴性对照组相比差异具有统计学意义(P0.05)。SB203580可抑制p38蛋白表达,PDTC可抑制p65蛋白表达,两种抑制剂能够抑制PM2.5诱导的A549细胞iNOS蛋白表达。[结论]南京市大厂区PM2.s符合重工业区细颗粒物特点;PM2.5引起小鼠肺部NO和iNOS释放量升高,iNOS基因表达量上调;同时PM2.5导致A549细胞存活率降低,具有剂量-反应关系,且剂量≥25μg/ml的PM2.s可刺激A549细胞NO和iNOS的合成;SB203580和PDTC两种抑制剂可以抑制PM2.5诱导A549细胞合成NO和iNOS; PM2.5可能通过NF-κB和MAPK两条通路调控iNOS的合成。
【学位授予单位】:东南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R122;X513

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 强文安,刘捷,吕芳玲,刘枝俏,刘景生;~3H-精氨酸转化测定一氧化氮合酶活性[J];中华医学杂志;1996年08期
2 冀秀玲;王文华;程金平;赵晓祥;庄惠生;;环境汞污染暴露下大鼠肝中一氧化氮及一氧化氮合酶的变化[J];环境科学学报;2007年06期
3 马子敏,何子安;一氧化氮合酶基因缺陷动物模型的应用研究进展[J];生命的化学(中国生物化学会通讯);1997年01期
4 颜亮;一氧化氮合酶在人吞噬细胞的表达上调TNF-α生成[J];细胞与分子免疫学杂志;1997年01期
5 程金平;杨义晨;卢静;王文华;吴旦;;汞污染地区粮食对小鼠学习记忆行为的急性影响[J];毒理学杂志;2006年05期
6 赵军;;一氧化氮对三角涡虫运动和摄食行为的影响[J];安徽农业科学;2012年09期
7 胡俊峰,王丕文,张春玲,于素芳,韩惠芬,刘国庆;B(a)P对鲫鱼全脑NO、NOS水平的影响[J];中国公共卫生;2005年02期
8 郑建全;郭俊霞;金宗濂;;红曲对自发性高血压大鼠降压机理研究[J];食品工业科技;2007年03期
9 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张建新;张会欣;李兰芳;王超;李永辉;;大鼠局灶性脑缺血后一氧化氮合酶基因表达的变化[A];中国生理学会应用生理学专业委员会暨《中国应用生理学杂志》二十周年纪念大会和学术讨论会论文集[C];2005年
2 王庭槐;付晓东;杨丹;谈智;潘敬运;;膜雌激素受体介导一氧化氮合酶活性增高的快速非基因效应[A];中国病理生理学会动脉粥样硬化专业委员会五届一次会议论文集[C];2002年
3 王脉桃;黄震;杨锐;苏嘉霖;麦燕兴;周焕成;蔡德鸿;;模拟微重力诱导成骨细胞微丝变化对一氧化氮/一氧化氮合酶系统的影响[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
4 曹华;廖崇先;黄雄飞;陈道中;高凌云;;吸入一氧化氮对再灌注肺组织一氧化氮合酶表达的影响[A];第五届全国自由基生物学与自由基医学学术讨论会论文摘要汇编[C];2000年
5 罗红梅;贺丽萍;刘月顺;龙治峰;;一氧化氮合酶在大鼠附睾内的表达及其可能的作用[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
6 尤昭玲;雷磊;付灵梅;文乐兮;;益气化瘀法对置铜宫内节育器家兔子宫匀浆中一氧化氮及一氧化氮合酶的影响[A];湘鄂赣首届性与生殖健康学术研讨会论文汇编[C];2007年
7 李积胜;杨芳;杨烽;;急性给锂小鼠大脑皮层一氧化氮合酶阳性神经元的时程变化[A];中国微量元素科学研究会学术研讨会论文集[C];2004年
8 尤昭玲;马红霞;王若光;谈珍如;林洁;余建;;三七复合有效成分对恒河猴细菌感染性子宫出血模型内膜组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响[A];湘鄂赣首届性与生殖健康学术研讨会论文汇编[C];2007年
9 刘晓秋;许琦;唐惠琼;;大鼠肝细胞浆一氧化氮合酶活性的简易测定法[A];2003'中华中医药科技成果论坛中华中医药学会科学技术奖颁奖大会论文集[C];2004年
10 陈延民;张健;李健;段相林;;原生型一氧化氮合酶在大鼠空肠分布的研究[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 肖志宏;内质网钙释放与内皮型一氧化氮合酶在血管内皮调节中的作用和机制[D];华中科技大学;2011年
2 戴军;蛋白涂层支架携带质粒介导的一氧化氮合酶基因抑制小型猪冠状动脉球囊扩张后新生内膜增生的实验研究[D];中国协和医科大学;1999年
3 孙炜;一氧化氮合酶抑制剂对关节软骨修复组织的影响[D];第一军医大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨冰;一氧化氮合酶在拟黑多刺蚁脑部的表达分布研究[D];陕西师范大学;2008年
2 汪婷婷;神经元性一氧化氮合酶在电针调节抑郁症双重状态的作用研究[D];南京中医药大学;2016年
3 昂盛骏;PM_(2.5)对肺部iNOS释放和NO合成的影响及其机制探究[D];东南大学;2016年
4 孙隽;阿维链霉菌一氧化氮合酶的基因克隆及生物功能初步研究[D];浙江工商大学;2012年
5 吴中华;一氧化氮合酶在肾盂输尿管连接部梗阻中的表达及意义[D];福建医科大学;2005年
6 安静;益心胶囊对家兔急性心肌缺血模型血清和心肌组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响[D];黑龙江中医药大学;2003年
7 赵阳;参附注射液对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后肝组织中一氧化氮合酶、一氧化氮的影响[D];中国医科大学;2005年
8 王辉清;新合成一氧化氮合酶抑制剂硝基—精氨酸—赖氨酸三肽的作用机理与作用效果研究[D];第一军医大学;2006年
9 杨贵栋;一氧化氮合酶在创伤性急性呼吸窘迫综合症中的变化的实验研究[D];第二军医大学;2000年
10 王志学;内皮素-1和一氧化氮/一氧化氮合酶与Eales病的相关研究[D];河北医科大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026