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《东南大学》 2006年
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不同情况下大鼠脑组织中MHC、CD4及CD8分子表达的变化及意义

阎蓉  
【摘要】: 第一部分不同年龄大鼠脑组织中MHC、CD4及CD8分子的表达及其意义 目的:观察不同年龄大鼠脑组织中MHCI、MHCII、CD4及CD8分子的表达,并探讨其意义。方法:将实验大鼠按胎龄和日龄分为7组:E15d、E19d、P0d、P7d、P14d、P28d及老年组(24月龄),每组6只,共42只大鼠。经灌流取材冰冻切片,选取顶叶大脑皮质、海马、黑质、纹状体、小脑及脉络丛等部位,采用免疫组化染色方法,检测MHCI、MHCII、CD4和CD8分子在上述部位的表达情况。 结果:(1)E15d大鼠脑组织未见MHCI类分子的表达;其他年龄组在结缔组织和脉络丛有MHCI类分子的表达。其中从P0~P14d组海马和顶叶大脑皮质神经元上MHCI类分子的表达随着日龄的增加而逐渐升高,P14d组的表达最高(P0.05);P28d组的表达明显下降(P0.05);老年组大鼠海马神经元上的表达再次升高(P0.05)。(2)E15d组大鼠脑组织中未见MHCII、CD4和CD8分子的表达;其他年龄组MHCII、CD4和CD8除在结缔组织和脉络丛表达外,在神经元上未见表达。(3)各年龄组在小脑皮质神经元、黑质、纹状体等区域未见MHCI、MHCII、CD4和CD8分子的表达。 结论:(1)胚胎后期脑内开始有MHC、CD4和CD8分子的表达,表明此时脑内已有可能出现免疫反应;(2)在新生鼠及出生早期,部分皮质和海马神经元上有MHCI类分子的表达,可能与调节神经元活动和突触可塑性连接有关;(3)老年组大鼠MHCI类分子在海马神经元上的表达升高,可能与神经元的功能衰退和记忆识别能力下降有关。 第二部分帕金森病大鼠及NSCs联合GDNF移植后脑组织中MHC、CD4及CD8分子的表达变化 目的:观察帕金森病(PD)模型大鼠黑质区MHCI、CD4和CD8免疫分子的表达变化和NSCs联合GDNF移植后移植区及免疫反应情况并探讨其意义。 方法:(1)将成功PD模型大鼠按时程分为3组:7d、14d、30d,每组4只,共12只;正常对照组4只。经灌流取材冰冻切片,选取黑质区,采用免疫组化染色方法,检测MHCI、CD4和CD8分子表达情况。(2)取E14.5d大鼠腹侧中脑(VM)组织进行原代培养,经鉴定为具有增殖分化能力的神经干细胞(NSCs)后,制备成细胞悬液,加入GDNF,借助脑立体定位仪移植到PD模型大鼠的纹状体内。按照移植的时间点分为3组:2w、4w、6w,经行为学检测后分批处死,每组4只,共12只;假手术对照组4只。经灌流取材冰冻切片,选取移植针道区及周围区域,采用免疫组化染色方法,检测MHCII、CD4和CD8分子表达情况。 结果:(1)PD模型大鼠组,MHCI、CD4和CD8阳性细胞在黑质区可见表达,与7d组比较,14d和30d组这三种阳性细胞的表达量升高(P0.05),其中30d组最高(P0.05);纹状体区未见表达;对照组在各时间点均未见上述三种阳性细胞。(2)NSCs联合GDNF组,移植区及周围区域MHCII、CD4和CD8阳性细胞在2w组大量出现,4w组下降(P0.05),6w组基本消失(P0.05);假手术对照组在各时间点均未见阳性细胞。 结论: PD模型大鼠损毁侧黑质区存在MHCI、CD4和CD8阳性细胞,可能是由于该侧多巴胺(DA)能神经元受到损害,引起周围的小胶质细胞等激活表达MHCI分子,同时出现T淋巴细胞渗透进入黑质区,因为这三种阳性细胞的表达变化与同时期DA能神经元丧失程度呈正相关。NSCs
【学位授予单位】:东南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R329

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