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~(99m)Tc-TRODAT-1显像诊断帕金森病的实验研究

贾鹏  
【摘要】: 题目:~(99m)Tc-TRODAT-1显像诊断帕金森病的实验研究 目的:研究多巴胺转运蛋白(DAT)显像剂~(99m)Tc-2β-[N,N’-双(2-巯乙基)乙撑二胺基]甲基,3β-(4-氯苯基)托烷( ~(99m)Tc-TRODAT-1)用于帕金森病(PD)早期诊断的价值。 方法:实验(一)动物模型的制作:将SD大鼠分成三组:①正常组30只。②单侧PD模型组:本研究将40μg6-羟基多巴注射到65只SD大鼠一侧纹状体制作单侧PD动物模型,采用阿朴吗啡(APO)诱导旋转实验,观察术后1,7,14,21d行为学变化。采用阿朴吗啡诱导旋转实验,注射5min后用旋转检测仪记录动物40min内的旋转情况(旋转次数以大鼠向对侧不改变方向旋转3600为一次计算标准),每次旋转次数达7圈以上为成功的PD模型鼠。③多发性腔梗模型组:颈动脉注射自体血栓术,观察术后行为学变化。对22只大鼠做了处理,成模标准为大鼠行动迟缓,呆滞,出现逆时针绕圈(追尾现象),旋转次数少于6次/min为标准。实验(二)单侧PD模型组的病理学研究:利用免疫组织化学观察单侧PD模型组(术后1、7、14、21d)各时间点黑质形态学变化。对单侧PD模型组(术后14d)健侧及毁损侧纹状体行电镜观察分别(含正常组对比实验)。实验(三)三组大鼠的核医学及影像学研究:于24只正常SD大鼠尾静脉注入37MBq(2ml)~(99m)Tc-TRODAT-1,注射后0.5,1.0,2.0,4.0h后,取出血、心、肺、肾、肝、纹状体、小脑、海马、大脑皮质称重,测放射性计数,计算体内放射性分布百分比(%ID/organ)以及纹状体与小脑(ST/CB)摄取比值。于16只单侧PD模型鼠(毁损术后14d)尾静脉注入37MBq(2ml)~(99m)Tc-TRODAT-1,注射后0.5,1.0,2.0,4.0h后,取出纹状体毁损侧及健侧称重,测放射性计数,计算两者的摄取比值,多发性腔梗模型组(无特殊时间要求,本实验为术后14d,注射后测量时间同前)做与PD模型组同样的处理。将74MBq(2ml) ~(99m)Tc -TRODAT-1从尾静脉注入三组实验动物(PD模型8只,正常组4只,腔梗1只,共计12只)分别对纹状体部行放射性自显影(其中PD模型鼠为毁损术后1、7、14、21d),并进行析光度分析测定。对正常组及PD模型组(术后14d)行MRI显像。 结果:实验(一)两种动物模型成功建立(行为学指标均符合标准)。共对65只正常大鼠做了毁损手术,有37只制成PD模型;共对22只正常大鼠做了注射血栓处理,成模16只。实验(二)免疫组织化学观察,阳性细胞(多巴胺神经元细胞)明显减少,在毁损术后1、7、14、21d分别损失55%,55-65%,75-85%,85%,于行为学观察结果基本一致。电镜图片示于PD模型毁损侧图中清晰可见毁损的多巴胺神经元细胞。(三)三组大鼠的核医学及影像学研究:正常大鼠脑内及体内分布实验结果,纹状体与小脑、海马和大脑皮质的放射性摄取的相互比值分别为1.74,1.26,1.15;2.38, 1.76,2.06;4.25, 2.55,3.10;3.01,2.17,2.45(注射后0.5,1.0,2.0,4.0h),表明纹状体明显摄取~(99m)Tc-TRODAT-1。PD模型鼠分布实验表明毁损侧纹状体放射性摄取较健侧明显减少,并随毁损时间延长日趋明显。放射性自显影结果表明正常大鼠在纹状体内的摄取明显高于大脑皮质自显影(图片上在纹状体区只可见额叶皮质),两者比值为2.52,正常大鼠两侧纹状体比值为1.02,无明显差异,多发性腔梗模型大鼠结果与正常组相同。PD模型大鼠(术后1、7、14、21d,注射后2h)健侧的摄取明显高于毁损侧比值为2.19,2.51,4.12,5.21。MRI显像中,正常组与PD模型组图像结果无明显差别。 结论:两种制作模型的方法可靠,成模率高。~(99m)Tc-TRODAT-1显像剂体外稳定,制备方便,安全可靠,特异性强,因此~(99m)Tc-TRODAT-1 SPECT脑显像能为PD早期诊断提供了有利依据。


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