收藏本站
《江南大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

BL0033与BL0034在长双歧杆菌果糖ABC转运系统中功能的研究

郭燕红  
【摘要】:双歧杆菌是人和动物肠道内栖居数量最多、功能最重要的生理性细菌,作为微生态学研究的核心,对宿主具有生物屏障、营养、免疫、控制内毒素血症、延缓衰老、抗肿瘤等生理作用,同时也是肿瘤基因治疗的一个十分理想的导向载体。目前,发酵活菌乳制品是双歧杆菌工业化生产的技术瓶颈,也是国际上发展双歧杆菌产业必须解决的关键问题。双歧杆菌在体内的营养主要来源于含果糖基的植物材料,因此探明双歧杆菌对果糖的转运及代谢机制,可以揭示其在肠道中的适应性,具有一定的理论意义和潜在的应用价值。 本研究利用蛋白质组学和生物信息学确定了受果糖诱导调控的果糖转运相关蛋白,通过其基因克隆与表达,体外实验研究其与底物结合的特异性,采用GST沉降研究果糖转运系统蛋白质之间的相互作用。取得了以下主要结果: (1)采用pH4-7的IPG胶条对双歧杆菌的蛋白质样品进行双向电泳分析,明确其蛋白质在凝胶上的分布,结果表明在以果糖为碳源时其ABC转运系统中糖结合蛋白(BL0033)表达水平较高。 (2)构建了bl0033基因表达载体pGEX-4T-1-b10033,成功转化BL21并大量表达融合蛋白GST-BL0033;采用谷胱甘肽-Sepharose 4B树脂珠粒对GST标签融合的蛋白进行了纯化,并发现BL0033能与果糖发生特异性结合。 (3)构建了bl0034基因表达载体pGEX-4T-1-b10034,成功转化BL21并大量表达融合蛋白GST-BL0034;采用谷胱甘肽-Sepharose 4B树脂珠粒对该蛋白进行纯化,确定BL0034能结合ATP分子。 (4)构建了bl0033、bl0034两基因表达载体pET32a-bl0033/bl0034,成功转化BL21并大量表达两蛋白;用镍柱对其进行纯化。采用GST沉降方法研究BL0033与BL0034之间的相互作用,发现BL0033和BL0034存在相互作用。 表明双歧杆菌对果糖的吸收可能是通过BL0033和BL0034共同作用的一个特殊的转运系统来完成的。
【学位授予单位】:江南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q935

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈威;赵良友;郑世民;;双歧杆菌质粒载体的研究进展[J];黑龙江畜牧兽医;2008年02期
2 周芳烨;梁国光;刘吉成;;双歧杆菌种类鉴定的基因学方法[J];齐齐哈尔医学院学报;2006年09期
3 郭燕红;刘大伟;何湘;陈宣男;黄留玉;廖祥儒;袁静;;长双歧杆菌NCC2705株果糖结合蛋白BL0033基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];生物技术通讯;2009年06期
4 孙忠科;卜歆;何湘;姜铮;王芳;赵红庆;刘大伟;袁静;;长双歧杆菌NCC2705葡萄糖与果糖代谢的比较蛋白质组学[J];生物工程学报;2008年08期
5 刘萍萍,史兆兴,陈宗德,黄留玉;周质结合蛋白依赖的转运系统研究进展[J];生物技术通讯;2005年03期
6 李平兰;马长伟;江志杰;张篪;戴蕴青;;长双歧杆菌TTF菌株增强机体免疫活性研究[J];微生物学通报;2006年02期
7 郭燕红;刘大伟;孙忠科;邵长林;何湘;王雪松;姜铮;赵江丽;刘威;魏晓;廖祥儒;袁静;;长双歧杆菌BL0033与BL0034的相互作用研究[J];军事医学科学院院刊;2010年06期
8 龚义台;;细胞膜上钙转运分子机制的研究进展[J];医学分子生物学杂志;1982年05期
9 姜蔚宇;陈荣忠;;四氢嘧啶类物质的生物合成与转运途径及其生物学功能[J];生命的化学;2007年04期
10 王伟,肖明;微生物嗜铁素介导的铁摄取[J];生物学杂志;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 鲁海峰;吴仲文;李兰娟;左键;盛吉芳;郑树森;梁廷波;卢安卫;;肝移植患者肠道双歧杆菌生态结构研究[A];2006年浙江省感染病、肝病学术会议论文汇编[C];2006年
2 李平兰;张篪;马长伟;;长双歧杆菌TT—F菌株不同处理物润肠通便作用研究[A];中国老年学学会2006年老年学学术高峰论坛论文集[C];2006年
3 邵建宁;麻和平;彭章普;龚伟中;;耐酸耐氧双歧杆菌选育研究[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
4 李继光;W Rutherford;;美国空中急救转运系统与生命线[A];中华医学会全国第五次急诊医学学术会议论文集[C];1994年
5 龚芳红;贺松;张德纯;郭亚楠;;菊花水煎液对长双歧杆菌促生长作用的探讨[A];重庆市预防医学会2009年论文集[C];2009年
6 范鹏飞;马泉生;;邮区中心局转运系统优化的理论分析及模型[A];2001年中国管理科学学术会议论文集[C];2001年
7 张玉华;张星星;凌沛学;籍保平;;海藻糖和透明质酸对长双歧杆菌的保护作用[A];山东省药学会2006年生化与生物技术药物学术研讨会论文集[C];2006年
8 李建华;崔胜;;Gly和β转运系统底物对ICR小鼠2-细胞阻滞和胚胎发育的影响[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
9 张和春;倪新华;杨国;王劲松;范小兵;杭晓敏;;婴儿肠道双歧杆菌种群多样性分析[A];上海市预防医学会第二届学术年会论文汇编[C];2006年
10 郭赟;吕宾;;微生态制剂的临床应用[A];首届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 晋灵 编译;澳大利亚的煤炭转运系统[N];中国煤炭报;2005年
2 张彤;身边的RFID更有感染力[N];网络世界;2008年
3 本报记者 殷陆君通讯员 许美华;货物“零滞港”是怎样实现的[N];经济日报;2008年
4 香红星;走进微生物世界让这个“小精灵”为你增效[N];中国畜牧兽医报;2007年
5 指导专家 重庆医科大学附属第二院药剂科主任 赵春景 记者 江麓;腹胀,分清“气”、“水”再用药[N];医药导报;2007年
6 本报记者 林妍;双轮驱动提速北京城乡一体化[N];中国经济导报;2008年
7 记者 孟为;全市将在乡镇推10项惠民工程,力促城乡一体化[N];北京日报;2008年
8 王润华;腹胀病因多 用药细斟酌[N];家庭医生报;2006年
9 肖永红;细菌为啥会耐药[N];中国医药报;2008年
10 张庆慧;思南将建立县城生活垃圾卫生填埋场[N];铜仁日报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张学彬;厌氧菌联合介入治疗肝癌的实验研究[D];复旦大学;2009年
2 刘大伟;长双歧杆菌NCC2705果糖ABC转运系统的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
3 金颖;棉酚所致低钾血症机制的研究[D];中国协和医科大学;1988年
4 周诗毅;糖类和氨基酸对水稻诱导型高亲和力硝酸盐转运系统的影响[D];华中科技大学;2009年
5 王世珍;大肠杆菌镁离子转运蛋白CorA结构与功能的研究[D];清华大学;2006年
6 李平兰;长寿老人源双歧杆菌优良菌株的筛选及生理功能研究[D];中国农业大学;2004年
7 李劲;转录偶联修复在UVC和顺铂诱导的SupF基因突变中作用机制的研究[D];第三军医大学;2008年
8 龙菊英;水稻黄单胞Xanthomonas oryzae pv. oryzicola RS105 LPS合成基因簇的功能分析[D];南京农业大学;2005年
9 职爱民;猪碱性氨基酸转运载体cDNA克隆及其mRNA表达与调控[D];华南农业大学;2008年
10 鲁黎明;AtCIPK23在烟草中过表达的钾效率响应及NtHAK1的克隆与表达模式研究[D];河南农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭燕红;BL0033与BL0034在长双歧杆菌果糖ABC转运系统中功能的研究[D];江南大学;2010年
2 姜铮;长双歧杆菌NCC2705肠道适应性机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
3 王元刚;城镇垃圾转运系统设备配置研究[D];华中科技大学;2004年
4 孙忠科;长双歧杆菌NCC2705果糖代谢研究[D];西北农林科技大学;2008年
5 侯东军;长双歧杆菌在泡菜中增殖情况研究[D];西南农业大学;2003年
6 李云梅;长双歧杆菌NCC2705胆盐水解酶基因(bsh)的克隆表达及其特性研究[D];西北农林科技大学;2012年
7 赵鹏程;海上浅吃水滚装转运系统研究[D];天津大学;2004年
8 丁喜顺;长双歧杆菌细胞壁完整肽聚糖的分离及其免疫、抑瘤活性的研究[D];内蒙古农业大学;2009年
9 孙艳玲;两歧双歧杆菌干预治疗鼠伤寒沙门菌感染小鼠的生物保护作用[D];新疆医科大学;2006年
10 邓成;城镇垃圾转运系统布局及规模设置研究[D];华中科技大学;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026