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《江南大学》 2011年 硕士论文
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银杏外种皮中黄酮类物质的分离纯化及抗氧化活性研究

李思斯  
【摘要】:银杏树富含黄酮类物质,但是银杏各个部位所含的黄酮类物质的种类和含量并不尽相同。目前对银杏的研究开发主要集中于银杏叶上,而对于银杏外种皮的研究较少,影响了对银杏资源的充分开发利用。 本文主要探讨了银杏外种皮中的黄酮类物质的提取和纯化工艺条件的优化,并在此基础上对其抗氧化活性进行了初步的研究。 通过使用乙醇溶液作为提取剂,考察了温度、乙醇体积分数、液固比、提取时间以及提取次数对银杏外种皮总黄酮提取率的影响,并设计正交实验表进行实验,确定最佳提取条件为:提取温度70℃,乙醇体积分数80%,液固比(v/w)25:1,提取时间2h,回流提取3次。在此条件下,提取率为91.01%,得率为1.10%,纯度为10.38%。 采取萃取的方法进行脱脂实验。对比了四种有机溶剂的萃取效果,通过比较脱脂率和黄酮损失率,确定环己烷为最适萃取剂。结合静态实验的吸附量、解吸率、回收量、产品纯度的指标以及动力学曲线来看,最宜进行银杏外种皮总黄酮的分离纯化动态实验的树脂型号为ADS-17。进行动态实验,得到银杏外种皮总黄酮动态吸附洗脱最佳条件为:ADS-17树脂柱径高比1:10,样液浓度为1.4mg/mL,上样2BV,pH值4.0,吸附流速3BV/h,洗脱剂为80%乙醇且用量4BV,洗脱流速1.5BV/h。经过分光光度法测定,此时黄酮纯度为53.1%。 得到高效液相(HPLC)法的最优条件:流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(v/v,60:40),流速1.0mL/min,检测波长335nm。并就此条件进行了精密性、重现性、稳定性和回收率的检验。 通过对银杏外种皮总黄酮的还原力、清除1,1-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)能力、清除羟基自由基(·OH)能力、清除超氧阴离子自由基(O_2ˉ·)能力、以及抗大豆油氧化能力等的研究,测定了其抗氧化活性。当黄酮浓度为0.75mg/mL时,和0.1mg/mL的抗坏血酸的还原能力相当。在一定的实验方法条件下,银杏外种皮总黄酮样品对自由基的清除能力大小排序为:DPPH··OHO_2ˉ·。加入黄酮的大豆油氧化速率要远远小于空白大豆油氧化速率,表明银杏外种皮总黄酮具有一定的抑制油脂氧化能力。


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