硝基呋喃类抗菌素代谢物免疫学快速检测方法的建立

【摘要】：具有潜在“三致”作用的硝基呋喃类抗菌素在国内外虽已禁用二十余年，但时至今日硝基呋喃类抗菌素及其代谢物残留仍时有检出。本文旨在基于免疫学原理，研究出硝基呋喃类代谢物的一种快速检测方法，为此，本研究的重点是先制备出灵敏度高、特异性强的单克隆抗体，然后建立间接竞争ELISA (icELISA)检测方法并对其进行优化，最后对优化条件下的icELISA进行鉴定。首先，将硝基呋喃类代谢物与乙醛酸、对醛基苯甲酸及对硝基苯甲醛进行衍生合成半抗原及标准品并用液相色谱串联四级杆飞行时间质谱仪进行鉴定；采用活泼酯法及混合酸酐法将半抗原与载体蛋白偶联合成完全抗原，并用紫外进行表征。用免疫原免疫小鼠，通过不断地免疫、血清检测筛选出效价高、抑制效果好的小鼠，取其脾脏进行细胞融合并筛选出效果最好的细胞株，制备腹水、纯化，得到单克隆抗体。建立icELISA并对包被原、标准品溶解用溶剂、标准品稀释液的pH及NaCl浓度进行了一系列的优化，将优化好的icELISA进行灵敏度、特异性、准确性的鉴定。优化结果显示，样品稀释液的pH及NaCl浓度对抗体的IC50均有较大影响。通过icELISA条件的优化，成功地将SEM、AHD、AOZ、AMOZ抗体的IC50由0.061ng ml-1、0.17ngml-1、0.12ng ml-1、0.54ng ml-1优化到了0.011ng ml-1、0.07ng ml-1、0.10ng ml-1、0.54ngml-1，优化后的最低检测限LOD分别为0.0013ng ml-1、0.022ng ml-1、0.011ng ml-1、0.067ng ml-1。

【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：O657;R967

下载全文更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

	【参考文献】
	【参考文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	孙贝贝;房文红;;高效液相色谱技术在食品检测中的应用[J];安徽农业科学;2010年35期
2	刘期湘;张斌;;论食品安全监督过失责任[J];法学杂志;2012年02期
3	任海涛;沈玉栋;徐振林;杨金易;雷红涛;肖治理;王弘;孙远明;;呋喃唑酮代谢物单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法[J];分析化学;2012年05期
4	;Antigens synthesis and antibodies preparation for furazolidone and its metabolite 3-amino-2-oxazolidinone[J];Chinese Chemical Letters;2010年09期
5	叶健强;严玉宝;余华;谢晶;胡娟;廖党金;周岷江;崔鹏博;;我国进出口动物性产品兽药残留、检测的现状与对策[J];湖北农业科学;2011年14期
6	周玉;李岩松;潘风光;谭建华;柳增善;王哲;;小鼠腹水IgG类单克隆抗体纯化方法的研究[J];黑龙江畜牧兽医;2006年10期
7	魏红波;李崇瑛;闫海全;钮松召;白亚之;余朝琦;褚奇;;食品中抗生素类兽药残留的分析方法[J];粮食与饲料工业;2008年04期
8	李平;邓省亮;杨曙明;刘洪斌;;改变半抗原与载体间隔臂的长度对环丙沙星抗体特性的影响[J];免疫学杂志;2011年04期
9	施海燕;王鸣华;;半抗原的间隔臂长度对免疫识别的影响[J];农药学学报;2008年02期
10	陶洪华;;食品中的化学性危害[J];河北化工;2011年09期

中国博士学位论文全文数据库

前1条

1	孙凤霞;三聚氰胺单克隆抗体制备及其高灵敏快速检测技术研究[D];江南大学;2011年

	【共引文献】
	【共引文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	李正锋;陈兆国;何生虎;米荣升;;抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J];动物医学进展;2010年10期
2	樊海平;杨燕燕;辛志明;吴斌;曾占壮;余培建;;环丙沙星单克隆抗体的制备及其特性分析[J];福建水产;2011年02期
3	陈天助;;风险社会:传媒危机报道的可行框架[J];国际新闻界;2010年12期
4	蔡卓;江彩英;谢梅冬;赵静;;毛细管电泳在兽医药品分析中的应用[J];广西农业生物科学;2008年01期
5	陈敏艳;王香敏;朱弘;谭学超;郭抗抗;;畜禽产品兽药残留危害现状与分析[J];动物医学进展;2012年09期
6	刘昌云;;浅谈化工与食品安全[J];广东化工;2012年13期
7	赵秉志;黄晓亮;安如喜;;论防制假冒伪劣商品犯罪的刑事政策[J];法学杂志;2012年12期
8	柳爱春;刘超;桑丽雅;王振国;;硝基呋喃类代谢物抗原合成及在胶体金试纸条上的应用[J];现代农业科技;2012年23期
9	张向阳;;争议性食品安全事件的媒介议程之争——以“速生鸡”事件为例[J];今传媒;2013年04期
10	刘期湘;廖剑聪;;略论食品安全监督过失犯罪中的注意义务[J];法学评论;2013年04期

中国重要会议论文全文数据库

前3条

1	周文海;屈健;;饲料中药物检测技术研究进展[A];首届中国兽药大会动物药品学暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008学术年会论文集[C];2008年
2	李正锋;陈兆国;何生虎;米荣升;;抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
3	冯小丽;卢士英;李乐;刘东;任洪林;柳增善;;邻苯二甲酸单乙基己酯单克隆抗体的制备与鉴定[A];中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十二届学术研讨会论文集[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	邓省亮;己烯雌酚和双烯雌酚单克隆抗体的制备及ELISA方法的研究[D];中国农业科学院;2011年
2	张代辉;液相色谱—串联质谱技术对食品中主要兽药残留的研究[D];吉林大学;2011年
3	韩小虎;狂犬病毒单克隆抗体的研制及应用研究[D];吉林大学;2007年
4	王长青;东台市蛋鸡兽药使用现状和残留分析及控制对策研究[D];南京农业大学;2006年
5	李玉冰;对美国禽肉检验检疫制度与我国相关制度的比对与应对研究[D];华中农业大学;2007年
6	雷红宇;圆弧青霉菌毒素—青霉酸的单克隆抗体及免疫毒理学研究[D];湖南农业大学;2009年
7	李研东;食品中弧菌免疫学筛检方法建立研究[D];吉林大学;2009年
8	李彩霞;美国媒体对“中国制造”的建构与风险应对[D];复旦大学;2010年
9	吴公平;湖南省药品监督与供应网络现状分析与综合评价研究[D];中南大学;2011年
10	康贞花;食品安全行政检查制度研究[D];吉林大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	袁伟;我国公共危机中媒体管理研究[D];华东政法大学;2010年
2	王媛;从“三聚氰胺”奶粉事件报道看专家群体的公共性[D];西北大学;2011年
3	王里奇;短裸甲藻毒素单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立[D];吉林大学;2011年
4	陈一鸣;猪繁殖与呼吸综合征抗体免疫胶体金快速诊断试纸的研制[D];四川农业大学;2011年
5	徐欢;胶体金免疫层析方法快速检测食品中氯霉素的残留研究[D];广东药学院;2010年
6	卜丽媛;食品安全事件中的网络舆论监督[D];南京师范大学;2011年
7	乔海娇;Zhangfei蛋白在小鼠发情周期卵巢及子宫中的表达[D];西北农林科技大学;2011年
8	张朋;鲤春病毒血症病毒单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立[D];华中农业大学;2011年
9	方松;氯噻啉酶联免疫吸附分析方法研究[D];南京农业大学;2011年
10	付云洁;食品中苏丹红Ⅰ的免疫学快速检测方法研究[D];武汉工业学院;2011年

	【二级参考文献】
	【二级参考文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	徐佩;黄龙峰;李瑞忠;;不同pH的三聚氰胺水溶液溶解性能研究[J];安徽化工;2008年06期
2	张雪荣;池利民;李素霞;;高效液相色谱法测定麦芽糖含量[J];安徽农业科学;2009年24期
3	萧晟;杨艳丽;;兽药管理存在的问题及对策[J];安徽科技学院学报;2007年01期
4	蔡家利;陈昕;徐社会;;三聚氰胺单克隆抗体的制备及鉴定[J];重庆理工大学学报(自然科学版);2010年04期
5	刘德炎;;动物性食品中兽药残留的现状、问题及对策[J];浙江畜牧兽医;2009年02期
6	耿天霖;国内外兽药残留限量标准差异性及技术壁垒措施研究[J];家禽科学;2005年07期
7	李军;曾年英;;兽药管理与畜产品安全[J];动物保健;2006年09期
8	金忠辉;;我国动物性食品兽药残留现状浅析[J];兽医导刊;2009年12期
9	黄邦富;;兽药残留的危害及原因分析[J];福建畜牧兽医;2008年02期
10	王征;;GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺[J];福建分析测试;2008年02期

中国重要报纸全文数据库

前2条

1	记者徐日丹;[N];检察日报;2011年
2	本报驻印度记者廖政军;[N];人民日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库

前2条

1	孙秀兰;食品中黄曲霉毒素B_1金标免疫层析检测方法研究[D];江南大学;2005年
2	张奇;倍硫磷和速灭威半抗原分子设计及其免疫效果研究[D];南京农业大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库

前3条

1	刘丽强;19-去甲睾酮胶体金免疫层析试纸条的研制[D];江南大学;2007年
2	李春媛;三聚氰胺单克隆抗体制备及其在ELISA检测中的应用[D];吉林大学;2009年
3	袁媛;糖皮质激素多残留免疫研究与量子点在免疫分析中的应用[D];江南大学;2009年

	【相似文献】
	【相似文献】

中国期刊全文数据库

前10条

1	王汝龙;;硝基呋喃类抗感染药物[J];中国药学杂志;1963年09期
2	陆见明;雷兴翰;章元琅;;3-甲基-5-硝基呋喃类衍生物的合成及其生物活性[J];医药工业;1983年01期
3	王璟;杨楠;赵晶;权伍英;杨军;;液相色谱-串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物[J];中国卫生检验杂志;2008年06期
4	梁希扬;张林田;罗惠明;张冬辉;陈建伟;;液相色谱-串联质谱测定水产品中残留硝基呋喃类药物含量[J];中国卫生检验杂志;2007年11期
5	何艳玲;刘敏;王丽哲;;EP硝基呋喃类代谢物ELISA检测试剂盒:检测更快速、更准确[J];食品安全导刊;2010年05期
6	尹江伟;刘红河;刘桂华;;HPLC-MS/MS法测定水产品中硝基呋喃类化合物代谢物[J];中国卫生检验杂志;2007年12期
7	傅国,李宁毅;硝基呋喃类和硝基咪唑类药物的研究进展[J];青岛大学医学院学报;2003年04期
8	潘心红;侯建荣;邓艳芬;罗晓燕;;兽肉中硝基呋喃类残留物的检测方法[J];职业与健康;2011年07期
9	黄常刚;肖永华;吴晓旻;;熟肉制品中硝基呋喃类代谢物残留的UPLC-MS/MS检测方法[J];公共卫生与预防医学;2014年03期
10	刘正才;杨方;余孔捷;赵芳;林永辉;邱元进;张峰;;硝基呋喃类代谢物残留量检测标准的比较[J];分析试验室;2011年11期

中国重要报纸全文数据库

前1条

1	记者蔡美峰通讯员李海华;提高自检和送检频率[N];湄洲日报;2008年

中国硕士学位论文全文数据库

前3条

1	裴红;硝基呋喃类兽药残留分析技术研究[D];河北科技大学;2009年
2	丘建华;高效液相色谱—串连质谱法测定鳗鱼中硝基呋喃类代谢物残留研究[D];扬州大学;2006年
3	尹玉云;硝基呋喃类抗菌素代谢物免疫学快速检测方法的建立[D];江南大学;2014年

	快捷付款方式		订购知网充值卡	订购热线	帮助中心
	微信支付支付宝银行卡	知网卡神州行卡更多>>	免费送卡上门银行汇款购卡邮局汇款购卡	400-819-9993 010-62791813 010-62985026	常见问题在线咨询阅读器下载	充值中心知网卡新手指南