收藏本站
《江南大学》 2014年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

茶多酚中EGCG单体的制备纯化及其抑制铜绿假单胞菌生物膜的研究

王伟涛  
【摘要】:表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)是茶多酚中主要的功能活性成分,具有消炎、抑菌、防突变、抗癌、抗病毒、抗氧化、神经保护等特性。本文以EGCG含量50%的茶多酚为原料,研究了吸附柱色谱法制备纯化EGCG单体的方法,以及制备出的EGCG单体对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa, P. a)生物膜的抑制效果,为其在医药领域的应用提供一些参考。 首先,考察选用的吸附填料对儿茶素的选择吸附性,筛选出适合选择性分离儿茶素的极性吸附填料LX-8和中极性吸附填料LSA-10。研究了儿茶素在LSA-10树脂上的吸附行为,为开展动态柱色谱研究提供参考,结果表明:吸附过程在120min后到达平衡,属中速吸附,拟二级动力学模型拟合效果优于拟一级模型,总儿茶素速率常数为0.0019g/mg/min,稍低的温度利于儿茶素在LSA-10树脂上的吸附,较高的儿茶素浓度利于实现酯化和非酯化形式儿茶素的选择性吸附,其吸附行为更符合Freundlich模型,得到EGCG的kF大于43.0473mg(n-1)/n/g/mL-1/n,较其他儿茶素高,说明LSA-10树脂对各儿茶素的吸附有选择性。 其次,优化吸附柱色谱法制备纯化EGCG单体的工艺,确定如下工艺条件:先经极性树脂LX-8树脂柱色谱实现非酯化和酯化儿茶素分离,柱体积600mL,300mg/mL茶多酚上样,流速1.5BV/h,上样量60mL,1.5BV/h流速下采用蒸馏水、10%乙醇、25%乙醇和80%乙醇洗脱,体积为4BV、6BV、6BV、4BV,25%乙醇组分干燥后产品中EGCG纯度达(73.13±0.64)%,收率为(61.21±0.48)%。再经中极性树脂LSA-10柱色谱法实现EGCG与ECG分离,柱体积210mL,LX-8柱25%乙醇组分上样,流速1.5BV/h,浓度20mg/mL,上样量1.5BV,1.5BV/h流速下采用5%乙醇、15%乙醇、80%乙醇洗脱,体积为3BV、5BV、3BV,15%乙醇组分干燥产品中EGCG纯度达(93.16±1.04)%,收率为(89.82±0.82)%,结晶后可制备出纯度95.37%的EGCG单体,总收率为49.58%。经放大试验后,得到EGCG单体纯度也可达95%,说明此生产工艺具有放大应用前景,工业化生产可操作性。 最后,研究了EGCG对P. a生物膜的抑制效果,结果表明:EGCG对P. a的最小抑菌浓度MIC值为0.125mg/mL,最小抑制生物膜浓度MBIC值为0.0625mg/mL,经MBIC浓度EGCG处理后,P. a毒力因子弹性蛋白酶活性、鼠李糖酯以及绿脓菌素产生被抑制率分别达(37.73±1.25)%、(41.70±1.92)%、(35.98±1.34)%,菌体数量感应信号分子C4-HSL和3-oxo-C12-HSL被抑制率分别达(31.98±1.26)%和(15.91±0.82)%,EGCG可通过抑制菌体数量感应信号分子的产生进而抑制其毒力因子的释放以及生物膜的形成。
【学位授予单位】:江南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:TS201.2

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 姜绍通;李慧星;马道荣;陈晓燕;潘丽军;;AB-8树脂吸附分离EGCG和ECG的研究[J];安徽农业科学;2006年05期
2 刘晓辉;江和源;尧渝;;茶叶功能成分提取制备专题(七) 高纯度儿茶素的制备技术[J];中国茶叶;2009年08期
3 张星海,郭碧花,沈生荣;儿茶素富集和EGCG单体纯化新工艺研究[J];茶叶;2002年03期
4 黄永东;江和源;江用文;张建勇;王斌;白艳;文志浩;王伟伟;;传统SMB、Varicol和Partial-discard工艺分离纯化ECG和EGCG的比较研究[J];茶叶科学;2011年03期
5 龚志华;黄甜;庞月兰;肖文军;;HP-20大孔吸附树脂分离纯化儿茶素EGCg的效果[J];湖南农业大学学报(自然科学版);2010年01期
6 朱斌;陈晓光;;二次柱层析制备高纯度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的工艺研究[J];食品与机械;2009年04期
7 王洪新,戴军,张家骊,吕源玲;茶叶儿茶素单体的分离纯化及鉴定[J];无锡轻工大学学报;2001年02期
8 王传金;魏运洋;朱广军;杜杨艳;;聚酰胺色谱法分离制备高纯度表没食子儿茶素没食子酸酯[J];应用化学;2007年04期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 陈一强;绿原酸对铜绿假单胞菌生物膜抑制作用及其机制的体内外研究[D];广西医科大学;2010年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜绍通;李慧星;马道荣;陈晓燕;潘丽军;;AB-8树脂吸附分离EGCG和ECG的研究[J];安徽农业科学;2006年05期
2 刘晓辉;江和源;尧渝;;茶叶功能成分提取制备专题(七) 高纯度儿茶素的制备技术[J];中国茶叶;2009年08期
3 唐德松,沈生荣;儿茶素的富集及单体分离研究进展[J];茶叶;2003年03期
4 束鲁燕;汤一;;茶多酚提取和纯化技术研究进展[J];茶叶;2009年02期
5 刘仲华;;中国茶叶深加工产业发展趋势[J];茶世界;2010年12期
6 黄永东;江和源;江用文;张建勇;王斌;白艳;文志浩;王伟伟;;传统SMB、Varicol和Partial-discard工艺分离纯化ECG和EGCG的比较研究[J];茶叶科学;2011年03期
7 龚雨顺,刘仲华,黄建安;茶叶中儿茶素制备纯化研究进展[J];茶叶通讯;2003年01期
8 李楠;傅滨;肖玉梅;;儿茶素——健康护卫者[J];大学化学;2010年S1期
9 于华忠,龚竹琼,张东山;茶多酚的研究进展[J];福建茶叶;2004年04期
10 王霞,高丽娟,林炳昌;模拟移动床色谱(SMBC)分离表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的预处理工艺研究[J];福建分析测试;2005年03期
中国重要会议论文全文数据库 前4条
1 刘仲华;;中国茶叶深加工的技术与产品创新[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第二卷)[C];2010年
2 张星海;王岳飞;邬新荣;刘春杰;孙达;杨贤强;;木质纤维树脂分离提纯儿茶素的中试工艺研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第二卷)[C];2010年
3 王丽;梁名志;罗正飞;王立波;;儿茶素提取、分离纯化及其分析技术研究进展[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第二卷)[C];2010年
4 肖文军;黄甜;谭君;龚志华;;HP-20大孔吸附树脂分离纯化儿茶素EGCG研究[A];2008茶学青年科学家论坛论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 梁进;纳米茶多酚的制备及其抗肿瘤作用研究[D];南京农业大学;2011年
2 董俊杰;脱咖啡因儿茶素类化合物制备及其抗血管紧张转换酶活性研究[D];浙江大学;2011年
3 林金科;茶树高EGCG的种质资源及外源诱导研究[D];福建农林大学;2003年
4 钟世安;天然酯型儿茶素的色谱分离行为、结构表征及其生物活性研究[D];中南大学;2002年
5 刘莉华;儿茶素及其氧化产物的分离制备、化学特性及对红茶品质的影响[D];安徽农业大学;2003年
6 梁慧玲;茶叶功能成分制备和分离新工艺研究[D];浙江大学;2006年
7 梁钢;儿茶素成分的提取纯化与逆转人肝癌和口腔鳞癌多药耐药性及其作用机制研究[D];广西医科大学;2006年
8 毛清黎;Ri质粒对茶树和苦瓜的遗传转化及相关功能成分研究[D];湖南农业大学;2006年
9 汪小钢;功能高分子在茶叶深加工中的应用基础研究[D];中国科学技术大学;2007年
10 张晓鸥;琼脂糖亲水相互作用色谱在多肽分离纯化中的应用[D];大连理工大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姜绍通;李慧星;马道荣;陈晓燕;潘丽军;;AB-8树脂吸附分离EGCG和ECG的研究[J];安徽农业科学;2006年05期
2 张瑜,邹国林,彭少君;表没食子儿茶素没食子酸酯研究进展[J];氨基酸和生物资源;1998年04期
3 赵雪飞;高丽娟;赖仕全;;模拟移动床色谱法分离C_(60)的条件选择[J];辽宁科技大学学报;2008年Z1期
4 张家元,林炳昌;三带模拟移动床色谱的实验研究[J];鞍山钢铁学院学报;1999年03期
5 杜琪珍,李名君,程启坤;高速逆流色谱法分离茶叶中的儿茶素[J];中国茶叶;1996年02期
6 宓晓黎,杨焱,袁建新,成恒嵩;超临界二氧化碳萃取茶叶中EGCG等儿茶素组分的工艺研究[J];中国茶叶;1997年06期
7 张星海,郭碧花,沈生荣;儿茶素富集和EGCG单体纯化新工艺研究[J];茶叶;2002年03期
8 于海宁,沈生荣,臧荣春,冯萍;茶多酚中儿茶素类的HPLC分析方法学考察[J];茶叶科学;2001年01期
9 张盛,刘仲华,黄建安,刘爱玲,施兆鹏;吸附树脂法制备高纯儿茶素的研究[J];茶叶科学;2002年02期
10 徐向群,陈瑞锋,王华夫;吸附茶多酚树脂的筛选[J];茶叶科学;1995年02期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 杜琪珍;沈星荣;蒋迎;;茶叶中EGCG的制备化分离新技术[A];海峡两岸茶叶科技学术研讨会论文集[C];2000年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 罗正飞;龚正礼;汪毅;刘勤晋;;茶叶中甲基化EGCG的研究[J];西南大学学报(自然科学版);2008年03期
2 魏冰;白厚增;杨则宜;;表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)减肥机制的研究进展[J];中国食品学报;2012年03期
3 于华忠,张东山,龚竹琼;茶叶中EGCG含量分析研究[J];福建茶叶;2004年04期
4 徐向群;;茶叶抗氧化剂中EGCG氧化反应动力学研究[J];中国茶叶;1992年06期
5 黄磊;杨军国;付杰;夏小欢;裘珺琳;陈旭东;;一种EGCG单体纯化新工艺[J];茶叶科学技术;2014年02期
6 王霞,高丽娟,林炳昌;表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的分离与制备[J];食品科学;2005年09期
7 蔡飞;李彩蓉;吴基良;陈金和;;EGCG对局灶性脑缺血损伤的作用研究[J];食品科学;2006年09期
8 袁勇军;张英;戚向阳;;高活性EGCG氧化产物制备条件的优化[J];中国食品学报;2009年01期
9 朱斌;陈晓光;;二次柱层析制备高纯度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的工艺研究[J];食品与机械;2009年04期
10 徐菲菲;段玉清;张海晖;秦宇;张灿;马海乐;闫永胜;;EGCG-硅胶表面分子印迹聚合物的制备及吸附性能[J];过程工程学报;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郑红发;黄亚辉;黄怀生;;高EGCG茶的研究与开发[A];湖南省茶叶优势区域建设会议暨湖南省茶叶学会2006年学术年会论文集[C];2006年
2 杜琪珍;沈星荣;蒋迎;;茶叶中EGCG的制备化分离新技术[A];海峡两岸茶叶科技学术研讨会论文集[C];2000年
3 陈伟强;李树田;侯玥;赵小玲;王冬兰;洪燕;程义勇;;EGCG和EGC对心理应激大鼠行为表现的干预作用[A];中国营养学会第十次全国营养学术会议暨第七届会员代表大会论文摘要汇编[C];2008年
4 方淑环;荣翠平;于旭华;侯雪芹;陈云波;王奇;;EGCG上调神经内肽酶表达抑制Aβ神经毒性作用的研究[A];2013年全国老年性痴呆与相关疾病学术会议论文汇编[C];2013年
5 杨贞;沃兴德;卢德赵;;EGCG对巨噬细胞源性泡沫细胞蛋白质组影响的研究[A];第十二届全国脂质与脂蛋白学术会议论文汇编[C];2014年
6 ;Effect of(-)-Epigallocatechin-3-gallate(EGCG)on the development of atherosclerosis and Toll-like receptor 4-nuclear factor kappa B(TLR4/NF-kB)signaling pathways in Apolipoprotein E(apoE)-deficient mice(apoE-/-)[A];中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议论文汇编[C];2008年
7 梅雪婷;苏畅;许东晖;;茶多酚修饰物EGCG-Zn对肝纤维化的保护作用研究[A];“亚运食品安全与广东食品产业创新发展”学术研讨会暨2009年广东省食品学会年会论文集[C];2009年
8 杨洁;李润明;毛芹超;陈之朋;姜世勃;姜志宏;刘叔文;;乙酰化EGCG作为前药抑制HIV的感染[A];第十届全国抗炎免疫药理学学术会议论文集[C];2010年
9 杨新林;袁海燕;陈霖;朱鹤孙;;EGCG对HeLa细胞生长的作用及其机理研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
10 吴蓉花;张伟;谢亚男;张运海;;表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对环磷酰胺诱导的小鼠精子畸形的影响[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集[C];2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 于斐;绿茶活性物质EGCG科研成果实现产业化[N];医药经济报;2006年
2 ;EGCG:早期防癌的希望[N];人民政协报;2003年
3 刘涛先;EGCG具有延缓神经元衰老的作用[N];中国医药报;2002年
4 中国食品添加剂和配料协会 尤新;绿茶提取物儿茶素及EGCG的功能和发展状况[N];中国食品报;2010年
5 中国食品添加剂和配料协会名誉理事长 尤新;绿茶提取物儿茶素及EGCG功能和发展状况[N];中国食品质量报;2010年
6 尤新;国内茶多酚儿茶素EGCG研发状况[N];消费日报;2010年
7 中国食品添加剂和配料协会 尤新;绿茶提取物儿茶素及EGCG的功能和发展状况(续)[N];中国食品报;2010年
8 蒲昭和;饮茶防癌的奥秘[N];中国医药报;2001年
9 本报记者 曹玉祥;谈饮茶防病之功用[N];医药养生保健报;2009年
10 黄静;绿茶:敢与癌说不![N];人民政协报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宋爽;EGCG实验条件的探索以及EGCG对胰岛素受体的激活作用[D];吉林大学;2013年
2 李银花;茶树中甲基化EGCG的分离纯化与相关基因的克隆及其表达研究[D];湖南农业大学;2013年
3 于海宁;EGCG与铜离子的相互作用及其细胞生物学行为[D];浙江大学;2004年
4 朱松;表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)酶法乙酰化分子修饰及其产物的抗氧化性能研究[D];江南大学;2014年
5 常翔;EGCG对痴呆模型小鼠学习记忆能力的作用及其机制研究[D];广州中医药大学;2014年
6 何苗;EGCG对阿尔茨海默病小鼠的保护作用及其可能机制[D];中国医科大学;2008年
7 谢涛;EGCG对戊四氮致痫大鼠的保护作用及机制探讨[D];河北医科大学;2012年
8 李晶晶;EGCG通过Ku70及其乙酰化诱导人肺腺癌细胞株凋亡的初步研究[D];中南大学;2013年
9 喻冬柯;化合物B192和EGCG的药效和药理作用机制研究[D];北京协和医学院;2013年
10 尹述婷;EGCG对铅致大鼠海马神经元突触可塑性和氧化损伤的修复作用及机制[D];中国科学技术大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 伍妍俊;甲基化EGCG的合成及其稳定性研究[D];安徽农业大学;2010年
2 黄学敏;高EGCG茶树活性成分提取工艺优化及其茶多酚抗衰老作用的研究[D];福建农林大学;2008年
3 武珊珊;利用EGCG分散制备纳米硒及其生物利用度的研究[D];安徽农业大学;2013年
4 高小刚;茶叶提取物(EGCG)在表面活性剂胶束体系中的性质研究[D];扬州大学;2008年
5 唐娜;茶叶中甲基化EGCG的分析方法建立与资源化学研究[D];湖南农业大学;2010年
6 李学敏;全甲基化EGCG类似物的设计合成及抗肿瘤MDR活性研究[D];中国海洋大学;2011年
7 李哲;乙酰化EGCG的酶法制备及其在油脂中抗氧化应用研究[D];江南大学;2013年
8 汤淋淋;EGCG-精氨酸交联涂层的制备及其生物相容性的探究[D];西南交通大学;2014年
9 李萍;EGCG对镉诱导的肝细胞损伤的保护作用[D];兰州大学;2010年
10 张文彩;EGCG对原代培养的海马神经元电压门控钾通道的影响[D];中国科学技术大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026