收藏本站
《江南大学》 2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

佛手多糖的提取纯化及其对酒精性肝细胞损伤保护作用研究

陈孝云  
【摘要】:佛手[Citrus medica L.var.sarcodactylis(Noot.)Swingle]系芸香科柑橘属植物,《本草纲目》等记载,佛手具有醒酒护肝等功效。多糖是佛手的主要功能成分,课题首先研究不同提取方法对佛手多糖性质的影响,采用响应面优化超声-微波协同提取佛手多糖的工艺,其次纯化获得佛手多糖分级组分,探讨佛手多糖及分级组分对酒精性肝损伤的保护作用,为佛手的深度开发利用奠定理论基础。论文主要内容和结论如下:(1)分别采用传统热水浸提法、超声辅助法、超声-微波协同提取法、微波辅助法和复合酶法提取佛手多糖,探讨不同提取方法对佛手多糖得率、糖醛酸含量、分子量、单糖组成、红外光谱和乙醇脱氢酶活性的影响。结果表明:超声-微波协同提取多糖得率高,可达4.15%;不同方法提取的多糖相对分子量大小存在差异;不同方法提取的多糖均为α-型糖苷键的吡喃型多糖,单糖组成均以阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖为主;超声-微波协同提取多糖对乙醇脱氢酶激活能力最强为46.58%,而传统水提多糖抑制乙醇脱氢酶活性。因此,确定采用超声-微波协同提取法提取佛手多糖。(2)采用Box-Behnken响应面法优化超声-微波协同提取佛手多糖(FCP)工艺条件,研究微波功率、料液比和提取时间对FCP得率的影响,结果表明:微波功率700 W,料液比1:57(g/mL),提取时间910 s,FCP的平均得率为5.68%。与微波提取法和热水浸提法相比,超声-微波协同提取法提取FCP得率分别提高了51.06%和37.86%。(3)将上述FCP除蛋白和脱色后,先经Cellulose DE-52分离获得FCP-1、FCP-2、FCP-3,再采用Sephadex G-200分别对FCP-2和FCP-3进一步分离,获得FCP-2A、FCP-3A。其中,FCP-1、FCP-2A和FCP-3A是均一多糖,苯酚硫酸法测得多糖纯度分别为82.7%、86.5%和88.4%。再分别进行超滤离心,三种多糖的纯度分别提高至88.6%、91.7%和93.6%。采用高效凝胶过滤色谱法、高效离子色谱法、红外光谱、糖醛酸含量来分析上述均一多糖,结果表明:FCP-1、FCP-2A和FCP-3A的重均分子量分别为1.96×10~4 Da、1.47×10~5Da和2.06×10~5 Da;FCP-2A和FCP-3A均由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖组成,FCP-1由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成;三种多糖均为吡喃型多糖,FCP-1含有α-D-半乳糖,FCP-2A含有α-D-葡萄糖和β-D-葡萄糖,FCP-3A含有α-D-葡萄糖。FCP-1,FCP-2A和FCP-3A的糖醛酸含量分别是5.20%,23.01%和29.54%。(4)从体外抗氧化活性、对乙醇脱氢酶活性影响和对体外酒精性肝细胞损伤保护这三个方面对佛手多糖及分级组分的护肝活性进行了研究。在体外抗氧化活性方面,由于酒精性肝损伤的主要机制是氧化应激,故以清除DPPH自由基、ABTS自由基和还原力为抗氧化能力测定指标,研究FCP及分级组分的体外抗氧化活性。结果表明,抗氧化能力强弱次序为:FCP-3AFCP-3FCPFCP-1FCP-2AFCP-2。在乙醇脱氢酶活性方面,当多糖浓度为1.0 mg/m L~10.0 mg/m L时,FCP及分级组分对ADH均表现为激活作用,激活强弱次序为:FCP-2AFCP-2FCPFCP-3AFCP-3FCP-1。在体外酒精性肝细胞损伤方面,以存活率为20%的酒精性损伤HepG2细胞作为模型组,以细胞存活率、谷草转氨酶含量、谷胱甘肽含量、超氧化物歧化酶含量和丙二醛含量为评价指标,探讨FCP及分级组分对体外酒精性肝细胞损伤的保护作用。研究表明:当多糖浓度37.5μg/mL~150.0μg/m L时,FCP及分级组分对体外酒精性肝细胞损伤均具有保护作用,其中FCP-3和FCP-3A的保护作用最强。
【学位授予单位】:江南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R285.5

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 秦亚东;汪荣斌;周娟娟;;白芍多糖脱色工艺研究[J];中成药;2015年12期
2 龚力民;刘伟;卓海燕;张红刚;李森;何琴;林丽美;李顺祥;;五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定[J];中国实验方剂学杂志;2015年24期
3 罗燕梅;黄立红;黄妙惠;林俍杜;林秋明;邱龙新;;仙草多糖对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用[J];食品科技;2015年09期
4 陈冠;程琳;张岩;王文彤;任荣;陶遵威;;硫酸苦豆子多糖构象及抗凝血活性[J];中国实验方剂学杂志;2015年17期
5 张丽红;谢三都;徐芳;林晓燕;高宁;;紫苏叶多糖活性炭脱色工艺优化[J];食品与机械;2015年03期
6 孙波;李海鑫;樊庆;孙盛;任庆;孔庆敏;赵晓;;超滤离心在双水相萃取技术中的应用[J];东北农业大学学报;2015年04期
7 陈庆敏;于辉;姜桂传;于克学;郝征红;岳凤丽;;超声波-微波协同提取毛木耳粉中多糖的工艺优化[J];食品科技;2014年11期
8 Ki Tae Suk;Moon Young Kim;Soon Koo Baik;;Alcoholic liver disease: Treatment[J];World Journal of Gastroenterology;2014年36期
9 苗慧琴;霍秀文;王阳;周翼虎;张灵超;刘向宇;李鑫;郁文慧;;山药多糖脱蛋白方法的研究[J];食品科技;2014年01期
10 秦垂新;姚松君;唐青涛;李德灵;郑志娟;李文治;;抗氧化肽及其化学活性测定方法的研究概述[J];食品工业科技;2014年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 张忠华;菊芋多糖的提取、分离、纯化及分析研究[D];吉林大学;2015年
2 邹胜;佛手多糖的分离纯化及抗氧化活性研究[D];重庆大学;2015年
3 林梦川;齿瓣石斛多糖提取工艺及抗氧化活性研究[D];四川农业大学;2015年
4 张丽美;茶粕多糖提纯工艺、结构初探及体外抗氧化研究[D];南昌大学;2013年
5 李文娟;佛手中活性成分提取分离及其体外活性测试研究[D];重庆大学;2013年
6 许传芹;α酮戊二酸对酒精性肝病的干预作用及其相关机制研究[D];浙江大学;2012年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 Shuai Chen;Yujia Kang;Yan Sun;Yanhong Zhong;Yanli Li;Lijuan Deng;Jin Tao;Yang Li;Yingpu Tian;Yinan Zhao;Jianghong Cheng;Wenjie Liu;Gen-Sheng Feng;Zhongxian Lu;;Deletion of Gab2 in mice protects against hepatic steatosis and steatohepatitis:a novel therapeutic target for fatty liver disease[J];Journal of Molecular Cell Biology;2016年06期
2 杨柳;;山药多糖提取与纯化工艺研究进展[J];农业科技与装备;2015年10期
3 刘兵;丁世洪;王荣甲;张守军;李万忠;;韭菜子多糖提取工艺及体外抗氧化活性研究[J];国际中医中药杂志;2015年12期
4 张风;夏旭;周爱梅;刘欣;曹庸;;虾头虾壳蛋白质酶解制备抗氧化肽的研究[J];南方水产科学;2015年06期
5 杨柳;;山药多糖生物活性研究进展[J];农业科技与装备;2015年11期
6 黄碧燕;肖桂珍;朱鹏;;酒精性肝炎的临床治疗研究进展[J];临床军医杂志;2015年11期
7 潘莹;;冬枣多糖脱蛋白工艺研究[J];食品工业;2015年09期
8 翁艳英;黄丹丽;周春月;;正交试验对甘蔗渣多糖超声波提取工艺的优化[J];湖北农业科学;2015年16期
9 魏玲;张小莉;何正;武会娟;;酒精性肝病治疗研究进展[J];中华临床医师杂志(电子版);2015年13期
10 黄超;任婷婷;王豫萍;程明亮;;蓝莓对酒精性肝损伤大鼠肝组织TLR4表达的影响[J];世界华人消化杂志;2015年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈孝云;佛手多糖的提取纯化及其对酒精性肝细胞损伤保护作用研究[D];江南大学;2018年
2 黄仁贵;零余子多糖的分离鉴定及生物活性研究[D];中南林业科技大学;2017年
3 朱晓静;茶多糖氟测定方法及多糖与氟结合方式的初步研究[D];华中农业大学;2017年
4 王协和;通脉复方颗粒药学研究[D];成都中医药大学;2017年
5 徐长跃;短链酮酸对断奶仔猪和育肥猪生长及血清指标的影响[D];东北农业大学;2016年
6 陈桂冰;茶籽多糖提取及其与DNA相互作用研究[D];江南大学;2016年
7 吴宪玲;西洋参多糖提取纯化及其胶囊制备[D];哈尔滨商业大学;2016年
8 孙丹丹;阶段性改变模式在酒精性肝病患者健康促进生活方式中的应用[D];吉林大学;2016年
9 陈晟;菊芋水溶性膳食纤维的制备、改性及降血脂效果研究[D];福建农林大学;2016年
10 王雪;白屈菜生物碱的提取及生物活性的研究[D];吉林农业大学;2016年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 秦亚东;周娟娟;李飞;周宙;;白芍生品及其炮制品中多糖及总糖的含量测定[J];长春中医药大学学报;2014年05期
2 秦亚东;李飞;周宙;;不同提取方式对白芍化学成分含量的影响[J];现代中药研究与实践;2014年04期
3 叶文斌;;葫芦巴胶与中草药纹党可食用复合膜对无花果常温贮藏的影响[J];西北农业学报;2014年08期
4 叶文斌;;苦豆子多糖与大黄和黄连提取液复合涂膜对鸡蛋常温贮藏的影响[J];甘肃农业大学学报;2014年03期
5 申林卉;刘丽侠;陈冠;赵永安;陶遵威;;苦豆子多糖羧甲基化修饰及其抗氧化活性的研究[J];天津中医药大学学报;2014年03期
6 赵雪珂;穆茂;程明亮;;酒精性肝病与氧化应激[J];临床肝胆病杂志;2014年02期
7 罗仕华;郑传胜;黎维勇;卫乐乐;王勇;夏向文;周国锋;冯敢生;;白及多糖体外抗肿瘤实验研究[J];中成药;2014年01期
8 林丽莎;张珅;詹岳霖;王增焜;林河通;;仙草的化学成分和药理作用研究进展[J];生物技术进展;2013年06期
9 王书华;饶娜;安芳;;金莲花多糖的分离纯化及其抗氧化作用研究[J];中成药;2013年11期
10 刘俊果;;人血清白蛋白在双水相法体系中的分配规律研究[J];煤炭与化工;2013年08期
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 孔凡伟;蒜渣多糖的提取纯化及功能性研究[D];扬州大学;2012年
2 鲍素华;铁皮石斛多糖体外抗氧化活性的研究[D];合肥工业大学;2009年
3 庄玮婧;薏米多糖结构与理化性质的研究[D];福建农林大学;2008年
4 廖洪梅;丹皮多糖的一级结构研究与显微结构的观察[D];安徽大学;2007年
5 罗傲雪;迭鞘石斛抗肿瘤作用研究[D];重庆大学;2005年
6 米造吉;膜分离技术在维生素C生产中的应用研究[D];天津大学;2003年
7 李春英;甘草多糖提取纯化工艺研究[D];东北林业大学;2002年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 孙福仁;焦安妮;焦连庆;于敏;田义新;;人参五味子片保护小鼠酒精性肝细胞损伤研究[J];人参研究;2015年03期
2 赵小琳;杨文燕;刘进;;调控内源性大麻素系统对酒精性肝细胞损伤模型的影响[J];昆明医科大学学报;2016年04期
3 王法治;;酒精性肝细胞膜抗体改变和丙型肝炎病毒感染在酒精性肝病进展中的作用[J];国外医学(流行病学传染病学分册);1993年04期
4 郑淑芳;酒精性肝细胞损伤的病理形态学改变[J];承德医学院学报;1998年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 张媛;于喆;任刚;刘富丹;王楠;崔玉影;邹伟;;Caveolin-1蛋白在酒精性肝细胞损伤修复中的作用[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 陈孝云;佛手多糖的提取纯化及其对酒精性肝细胞损伤保护作用研究[D];江南大学;2018年
2 韩晴;小鼠酒精性肝细胞损伤中GSTA1分析及龙葵保肝作用研究[D];东北农业大学;2014年
相关机构
>江南大学
相关作者
>陈孝云
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026