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羊栖菜褐藻糖胶的提取纯化和结构研究

李波  
【摘要】:羊栖菜属褐藻门马尾藻科植物,营养价值高,既能食用又能药用,是我国的特色海藻,资源十分丰富。羊栖菜褐藻糖胶是一种含岩藻糖的硫酸酯杂多糖,具有多样的生理功能,是羊栖菜中重要的生物活性物质。目前国内对羊栖菜褐藻糖胶的研究很少,且不够深入。本论文对采自浙江洞头县的羊栖菜中褐藻糖胶的提取纯化方法、结构以及抗凝血活性进行了研究,结果如下: 分析了原料羊栖菜粉的化学组成:水分12.2%,灰分15.4%,蛋白质12.3%,粗脂肪1.6%,粗纤维40.4%。羊栖菜多糖的组成为:褐藻胶28.4%,褐藻糖胶8.1%,褐藻淀粉0.5%。 比较了酸提法和水提法的提取效果及其对褐藻糖胶大分子结构的影响,结果表明酸提法和水提法各有优缺点:酸提法提取效率高,但会使褐藻糖胶发生部分水解,水提法提取效率低,但能保持褐藻糖胶大分子的结构。酸提法粗多糖宜选择乙醇分级沉淀法进行纯化,水提法粗多糖宜采用CaCl_2法进行纯化。 羊栖菜褐藻糖胶的化学组成为:岩藻糖18-20%,糖醛酸12-19%,硫酸根11-13%,灰分24-34%,中性糖以岩藻糖、半乳糖和甘露糖为主,其次是葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖,金属元素主要是K、Ca、Na。 对水提法褐藻糖胶的分级纯化和物化性质进行了研究。水提法褐藻糖胶经DEAE Sepharose CL-6B柱层析得F1、F2和F3三个级分,F3又经Sepharose CL-6B柱层析得F31、F32和F33三个级分,凝胶过滤色谱和琼脂糖凝胶电泳显示F31、F32和F33为均一组分。 化学组成分析表明,F1、F2、F31、F32、F33均为岩藻糖、半乳糖和甘露糖等糖基组成的杂多糖,并含硫酸基、糖醛酸以及少量的蛋白质。其中,岩藻糖含量为18-33%,糖醛酸含量13-32%,硫酸基含量3-24%,蛋白质含量1-2%,相对分子质量范围26 kDa-959kDa。F32和水提法褐藻糖胶中的糖醛酸主要由葡萄糖醛酸和少量的甘露糖醛酸构成,而F33中甘露糖醛酸的比例较高。F33含有2%的N元素,氨基酸分析、核酸酶解和紫外扫描暗示这些N可能来自核酸。红外光谱分析表明,F31、F32和F33的糖苷键类型以α为主,并有少量的β-糖苷键。旋光性分析也表明,F32和F33中的岩藻糖主要是α-L构型。


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