大叶紫薇叶降血糖作用及机理的研究
【摘要】:大叶紫薇(Lagerstroemia specious L.)为千屈菜科的落叶乔木,在菲律宾和亚洲其他国家被用来预防和治疗糖尿病。近年来,大叶紫薇降血糖活性作用受到广泛关注和研究。在我国广东和广西地区有较丰富的大叶紫薇资源,但对其降血糖成分的研究还不多。本论文研究我国大叶紫薇叶降血糖活性成分,对于阐明大叶紫薇叶降血糖作用机理和开发成功能食品有重要的学术意义和实践价值。
首先采用3T3-L1细胞葡萄糖消耗模型对大叶紫薇叶提取物的降血糖活性进行了分析。分别采用树脂分离和溶剂萃取将大叶紫薇水提取物和乙醇提取物分成了不同的级分,同时采用3T3-L1细胞葡萄糖消耗模型对不同的级分进行降血糖活性测定,结果表明:乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物具有较高的降糖活性,化学分析表明,乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物中的主要成分为三萜化合物。
建立了薄层-分光光度法测定大叶紫薇叶中总三萜含量和薄层-HPLC测定大叶紫薇叶中corosolic acid含量的方法。将大叶紫薇叶中甲醇提取物先采用薄层色谱进行分离,有效去除杂质,然后分别采用分光光度法测定总三萜含量和HPLC法测定corosolic acid含量。薄层色谱分离大叶紫薇叶中总三萜的适宜展开剂组成为V_(氯仿):V_(丙酮)=4:1。分光光度法测定总三萜的适宜条件为:5 %香草醛醋酸溶液0.3ml,高氯酸1ml,60℃反应15min,测定波长542nm;HPLC测定大叶紫薇叶中的corosolic acid含量的适宜的条件为:LunaC_(18)柱,流动相: V_(乙腈):V_(0.2%甲酸水溶液)=60:40,流速1.0ml/min,检测波长204nm ,进样量10μl。两种方法都具有较高的精密度、准确性及可靠性。
采用超声辅助方法提取大叶紫薇叶中的三萜化合物,探讨了提取条件对大叶紫薇叶总三萜和corosolic acid得率的影响,结果表明:超声辅助提取的最佳条件为:提取前浸泡120min,提取时间为25分钟,超声功率为200 W。总三萜和corosolic acid的得率分别为2.12%和0.71%。
采用树脂吸附法对大叶紫薇叶中的三萜化合物进行了纯化。通过对5种不同类型树脂的筛选,发现HPD100树脂对大叶紫薇中总三萜类化合物具有较好的吸附与解吸性能。对HPD100树脂对三萜化合物的吸附性能进行了研究,得到了吸附等温线、动力学曲线和穿透曲线。树脂纯化后总三萜和corosolic acid纯化倍数分别达到2.08和2.15倍,总三萜和corosolic acid的回收率分别达到83.2%和86.3%。
对树脂纯化的总三萜化合物,采用TLC分离和3T3-L1细胞葡萄糖消耗模型筛选相结合的方法,筛选出了两种具有较高降血糖活性的单体化合物,通过采用标准品对照、UV、MS、~1H NMR、~(13)C NMR和DEPT-NMR进行结构分析,表明这两种单体化合物分
【关键词】:大叶紫薇 三萜化合物 提取 纯化 降血糖 机理 指纹图谱 【学位授予单位】:江南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R285
【目录】:
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-11
- 第一章 绪论11-30
- 1.1 立题背景11-12
- 1.2 大叶紫薇活性成分国内外研究概况12-21
- 1.2.1 大叶紫薇叶的化学成分12-14
- 1.2.1.1 萜类化合物12
- 1.2.1.2 酚类化合物12-14
- 1.2.1.3 其它化合物14
- 1.2.2 大叶紫薇叶的生理功能14-16
- 1.2.2.1 降血糖作用14-15
- 1.2.2.2 减脂作用15-16
- 1.2.2.3 抗氧化作用16
- 1.2.2.4 抗菌作用16
- 1.2.2.5 抗肿瘤作用16
- 1.2.3 大叶紫薇叶降血糖成分的研究16-20
- 1.2.4 大叶紫薇产品的开发及安全性20-21
- 1.2.4.1 大叶紫薇产品的安全性20
- 1.2.4.2 大叶紫薇粉的制备20-21
- 1.2.4.3 大叶紫薇粉的应用21
- 1.3 课题的意义21-22
- 1.4 本课题的研究内容22-23
- 参考文献23-30
- 第二章 大叶紫薇叶中降血糖活性成分的确定30-40
- 2.1 前言30-31
- 2.2 材料与设备31
- 2.3 实验方法31-34
- 2.4 结果和讨论34-37
- 2.4.1 水提取物和醇提取物活性的测定34-35
- 2.4.2 水提取物中各级分活性的测定和成分分析35-36
- 2.4.3 醇提取物中各级分活性的测定和成分分析36
- 2.4.4 乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物成分分析36-37
- 2.5 主要结论37
- 参考文献37-40
- 第三章 大叶紫薇叶中总三萜和corosolic acid含量测定方法的建立40-54
- 3.1 引言40-41
- 3.2 材料与设备41
- 3.3 实验方法41-44
- 3.4 结果与讨论44-52
- 3.4.1 薄层层析分离条件的选择44-46
- 3.4.2 分光光度法测定总三萜46-49
- 3.4.3 HPLC测定corosolic acid49-51
- 3.4.4 实际样品总三萜和corosolic acid含量测定51-52
- 3.5 主要结论52
- 参考文献52-54
- 第四章 大叶紫薇叶中三萜化合物的提取和纯化54-74
- 4.1 引言54
- 4.2 材料与设备54-55
- 4.3 实验方法55-58
- 4.4 结果与讨论58-71
- 4.4.1 不同影响因素对提取的影响58-61
- 4.4.2 超声辅助提取和直接回流提取的比较61-62
- 4.4.3 五种树脂吸附能力的比较62-63
- 4.4.4 五种树脂解吸能力的比较63-64
- 4.4.5 静态吸附64-68
- 4.4.6 动态吸附68-69
- 4.4.7 树脂再生性能69
- 4.4.8 不同纯化方法的比较69-70
- 4.4.9 纯化前后总三萜质量分析70-71
- 4.5 主要结论71-72
- 参考文献72-74
- 第五章 大叶紫薇降血糖成分的分离及体外降血糖作用研究74-92
- 5.1 引言74
- 5.2 材料与设备74
- 5.3 实验方法74-75
- 5.4 结果与讨论75-89
- 5.4.1 第一次TLC分离75-77
- 5.4.2 第二次TLC分离77-78
- 5.4.3 PTLC_3 和 PTLC_(6A)的纯度鉴定78
- 5.4.4 PTLC_3 和 PTLC_(6A)的结构确证78-87
- 5.4.5 三萜化合物降糖作用的研究87-89
- 5.5 主要结论89
- 参考文献89-92
- 第六章 大叶紫微三萜化合物体内降糖作用及降糖机理的探讨92-109
- 6.1 引言92
- 6.2 材料与设备92
- 6.3 实验方法92-94
- 6.4 结果与讨论94-105
- 6.4.1 总三萜化合物对大鼠降糖作用的体内实验94-98
- 6.4.2 大叶紫薇三萜化合物体外降糖机理研究98-105
- 6.5 主要结论105-106
- 参考文献106-109
- 第七章 大叶紫薇叶和果实三萜化合物的比较109-119
- 7.1 引言109-110
- 7.2 材料和设备110
- 7.3 实验方法110
- 7.4 结果和讨论110-117
- 7.4.1 总三萜的TLC 指纹图谱110-111
- 7.4.2 总三萜的HPLC/UV/MS指纹图谱111-117
- 7.4.3 大叶紫薇叶和果实的指纹图谱的比较117
- 7.5 主要结论117-118
- 参考文献118-119
- 全文主要结论119-120
- 论文创新点120-121
- 博士期间发表的与课题相关的论文121-122
- 致谢122