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《江南大学》 2006年
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何首乌中二苯乙烯苷的制备及抗氧化机理研究

吕丽爽  
【摘要】: 何首乌(Polygonum multiflorum Thunb)为蓼科多年生草本植物的块根,是我国传统的延年益寿的中草药。何首乌中主要的功效性成分二苯乙烯苷近年来成为研究的热点。文献报道了其多项生理功能:抗氧化、清除自由基;抗肿瘤;降低胆固醇;抑制动脉粥样状硬化;保护肝脏;具有血管舒张作用;防治老年痴呆;提高记忆等功效。其间以抗氧化、清除自由基性能最为突出。故本课题以贵州何首乌为原料,建立了分离纯化的工艺路线,分离制备得到二苯乙烯苷晶体,深入探讨了二苯乙烯苷抗氧化性能及抗氧化机理,为进一步研究何首乌的药理提供了理论基础。 在分析选取何首乌原料后,研究二苯乙烯苷的分离提取工艺。运用溶剂提取、壳聚糖絮凝澄清、大孔吸附树脂分离技术分离纯化何首乌中二苯乙烯苷。首先,通过单因素、中心组合实验,运用响应面分析法优化了水提取工艺条件,得到最佳条件为:固-液比1:15,温度50℃,时间40min。而后,对水提浓缩液选用壳聚糖为絮凝剂进行了澄清以除去蛋白、果胶等大分子杂质,通过正交实验得到最佳条件为:壳聚糖添加量:0.3mg/mL,pH值4.5,温度20℃。最后,对15种大孔吸附树脂进行静态吸附实验,优选出5种吸附率高,解吸效果良好的树脂进行了静态吸附动力学、静态吸附等温线方程的拟和实验,考察了树脂的吸附速率以及溶液浓度与饱和吸附量了的关系,最终选出大孔吸附树脂HPD100作为分离纯化二苯乙烯苷的最佳树脂。继而分别对树脂的动态吸附条件:进样浓度、流速、进样pH值、洗脱溶液进行了优化,最终确定相关柱条件,洗脱方式为先用20%乙醇洗脱除去部分杂质,在用40%乙醇洗脱目标产物二苯乙烯苷,使得最终产物纯度为84.47%,得率为75.12%。 应用聚酰胺柱层析系统初步纯化了何首乌的乙醇粗提液,而后通过溶剂结晶技术,首次分离得到了二苯乙烯苷白色针状晶体,液-质(LC-MS)联用测定纯度为99.49%,相对分子质量为406;通过核磁共振分析(NMR)鉴定其结构;并运用X-射线衍射、差示扫描量热分析(DSC)、热重分析(TGA)等技术对晶体性质进行了初步测定,证明二苯乙烯苷不存在同质多晶现象,仅有一种针状晶体存在形式,且不含结晶水,熔点为151.33℃。 以BHT、Vc、白藜芦醇(RE)为对照,分别对二苯乙烯苷(SG)、大孔吸附树脂分离样品(RF-SG)、何首乌粗提物(C-SG)体外抗氧化性能进行测定。考察了亚油酸体系抗氧化性,还原性,DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基、H_2O_2清除能力以及金属鏊合性。得出结论:从何首乌中提取的不同纯度的二苯乙烯苷样品均具有抗氧化、清除自由基功能。其活性强弱依次为SG、RF-SG、C-SG。与常用抗氧化剂BHT、Vc对照,SG亚油酸体系抗氧化性、还原性、清除DPPH自由基能力相对较弱;而清除超氧阴离子、羟基自由基、H_2O_2能力要高于BHT、Vc。而与结构相似的RE对照,SG优于RE,原因是在结构上SG比RE多形成了一个(2-O-Glu)糖苷;由此2-糖苷的推电子效应,可以使对位羟基(C5-OH)所形成的苯氧自由基更为稳定,以便终止自由基链反
【学位授予单位】:江南大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:TQ461

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前7条
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5 徐雅贞;杨兆祥;张伟;;紫外分光光度法测定曲札茋苷的解离常数[J];云南中医学院学报;2012年03期
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7 卢照凯;卢昶年;周晓青;谢冬养;钟德品;应启实;罗习;;高效提取高纯度何首乌二苯乙烯苷的新工艺[J];企业科技与发展;2012年11期
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
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6 赵芳;广西产何首乌有效成分分离纯化及生物活性研究[D];广西医科大学;2008年
7 张旭;硫脲类催化剂催化不对称Aza-Henry反应研究和四羟基二苯乙烯苷提取纯化工艺研究[D];第四军医大学;2012年
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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3 刘卫兵,王建民,谢安莉,朱惠娟;1例重症天疱疮的救治体会[J];皮肤病与性病;2001年02期
4 杨洪沛;胡人杰;齐云;于苏萍;;中药顽银灵对实验小鼠影响的研究[J];皮肤病与性病;2006年01期
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10 刘晓秋,吴立军,田作明;5-羧甲基-7-羟基-2-甲基色原酮核磁共振研究[J];波谱学杂志;2002年03期
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2 王兆基;关锡耀;徐树棋;丁大伦;粟晓黎;林瑞超;郑秀云;冯国培;;毒性中药雄黄质量检测方法研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
3 肖明良;钟润琪;谢朝霞;杨晓忱;李君玲;周宇;田楠;袁红;;艾灸“足三里”对亚急性衰老小鼠DNA影响的实验研究[A];2011中国针灸学会年会论文集(摘要)[C];2011年
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7 王开发;;我国常见八种花粉的功效探讨[A];花粉·可持续发展(纪念联络组成立20周年)——第十一届全国花粉资源开发与利用研讨会论文集[C];2010年
8 方清茂;崔光红;黄璐琦;张美;周先建;;栽培与野生何首乌种质资源遗传多样性的ISSR分析[A];中药饮片质量分析与中药鉴别技术交流研讨会论文集[C];2009年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 鲍淑兰;超氧化物歧化酶与其抗衰老功能[J];曲阜师范大学学报(自然科学版);2000年03期
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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4 王常青;任海伟;王海凤;刘佳璐;吕鹏;;黑豆多肽对D-半乳糖衰老小鼠抗氧化能力的影响[J];食品科学;2010年03期
5 李起弘;郑铁松;王华清;;响应面分析法优化普通茶籽中抗氧化物质的水提工艺[J];食品科学;2010年18期
6 陈英;朱科学;彭伟;刘洪涛;顾耀兴;周惠明;;小麦胚活性肽对D-半乳糖衰老模型小鼠抗氧化作用研究[J];食品科学;2010年19期
7 罗红波;杨金升;石向群;;二苯乙烯苷对AD模型鼠老年斑和行为障碍的影响[J];现代生物医学进展;2010年05期
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 熊治清;连续酶解花生蛋白及其花生多肽抗氧化活性研究[D];华中农业大学;2010年
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【相似文献】
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2 王春华;沈燕;张伟;;首乌精口服液制备与质量控制研究[J];时珍国医国药;2007年03期
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10 吴建中;大豆蛋白的酶法水解及产物抗氧化活性的研究[D];华南理工大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韦晓华;何首乌中二苯乙烯苷的分离纯化及缓释微囊的制备[D];西南交通大学;2010年
2 鲁坚;大孔吸附树脂分离何首乌中二苯乙烯苷的工艺研究[D];合肥工业大学;2006年
3 秦波;发酵何首乌与制首乌等质量对比研究[D];成都中医药大学;2011年
4 陈怡;积雪草苷、二苯乙烯苷提取纯化工艺及何首乌化学成分的研究[D];天津大学;2006年
5 郭海霞;何首乌的膨化炮制与质量研究[D];西南交通大学;2008年
6 蔡丽芬;何首乌质量标准的研究[D];北京中医药大学;2009年
7 朱宽鹏;芪合酶基因Fm-STS在何首乌毛状根中过量表达与dsRNA干扰[D];华南理工大学;2012年
8 张又枝;二苯乙烯苷的抗炎作用及其机制研究[D];华中科技大学;2006年
9 王莉莉;何首乌组织培养的研究[D];广西师范大学;2008年
10 苏建;何首乌、夜交藤药材质量控制研究[D];河北医科大学;2007年
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