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《江南大学》 2008年
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香菇中一种抗氧化活性成分的分离及组成分析

彭冬兵  
【摘要】: 天然抗氧化剂在医药、食品等领域有着广阔的应用前景,香菇是著名的药食两用菌,开展从香菇中提取抗氧化物质的研究有一定的理论和应用价值。本论文主要对香菇中的抗氧化物质开展了分离和基本特性方面的研究。论文首先对两种分离方法分离抗氧化组分进行了研究。第一种方案如下:热水抽提→醇沉→凝胶过滤层析→离子交换层析→凝胶过滤层析,获得样品Le-2。第二种方案如下:加入保护剂抽提→离子交换层析→凝胶过滤层析,获得样品Le-Ⅱ。Le-2、Le-Ⅱ对DPPH自由基的半清除浓度EC50分别为0.98 mol/L、0.44 mol/L。并对抗氧化活性较高的Le-Ⅱ样品进行了进一步的研究分析。 Ultrogel ACA-44分子筛层析表明样品分子量分布范围约为28 kD。红外光谱(中红外)分析表明Le-Ⅱ是一个既含糖又含蛋白质的复合物。气相色谱分析表明Le-Ⅱ糖链组成中含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖四种单糖。糖链中以葡萄糖为主。Le-Ⅱ中多糖的总含量约为1.29%。几种单糖的摩尔比为鼠李糖:阿拉伯糖:甘露糖:葡萄糖=0.58: 0.67: 0.78: 3.69。氨基酸组成分析结果表明Le-Ⅱ中含有种类齐全的常见氨基酸,蛋白质含量为14.29%。Le-Ⅱ中可能存在蛋白质链为主的糖蛋白。Le-Ⅱ中具有抗氧化活性的氨基酸在样品蛋白质中的含量为33.4%。β-消去反应的结果初步表明Le-Ⅱ为一种糖蛋白,且糖苷键为O-型糖苷键。刚果红实验结果表明Le-Ⅱ中糖链部分存在三股螺旋构象。不同浓度碱处理结果证明Le-Ⅱ糖链的空间结构与其抗氧化活性存在着一定的联系。 Le-Ⅱ清除DPPH的最佳条件为:缓冲液pH6.5,温度70℃,反应时间23min。其在37℃纯水溶解时的EC50为0.44mg/ml。光线对Le-Ⅱ清除DPPH几乎没有影响,但木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、曲霉菌蛋白酶和胰蛋白酶四种蛋白酶以及β-1,3-葡聚糖酶水解Le-Ⅱ后对其抗氧化活性有着较大的影响,其中胰蛋白酶水解效果低于其他三种蛋白酶。
【学位授予单位】:江南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:TS255.1

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