杨盘二孢菌侵染后杨树叶片差异表达蛋白质的鉴定

【摘要】： 杨树是重要的速生用材树种，具有颇高的经济价值和生态效益。然而，杨树在生长过程中不断受到病虫害的威胁。杨树黑斑病是由真菌引起的叶部病害，其主要致病菌为杨盘二孢菌(Marssonina brunnea f.sp.multigermtubi)。目前有关杨树与黑斑病菌相互作用的分子机制仍不清楚。为了鉴定与抗病相关的蛋白质，初步了解杨树抗病的分子基础，以对杨盘二孢菌高抗的无性系NL895杨(P.×euramericana CL“NL 895”)为实验材料，利用蛋白质双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis，2-DE)技术和质谱(mass spectrometry，MS)技术等蛋白质组学方法研究了该无性系接种杨盘二孢菌0、12、24、48、72h后叶片蛋白表达谱的变化。PDQuest~(TM)(Bio-Rad)软件分析后，共获得了约500个重复性表达的蛋白点，其中有40个蛋白点差异表达。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption／ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS)对这些差异蛋白点进行了分析和数据库搜索。所鉴定的蛋白主要包括推测的抗坏血酸过氧化物酶(putative ascorbate peroxidase)，S-腺苷甲硫胺酸合成酶(S-adenosyl methionine synthetase)，钙调素结合蛋白(calmodulin binding protein)，醌氧化还原酶类蛋白(quinone oxidoreductase-like protein)，赖氨酸酮戊二酸酯还原酶／酵母氨酸脱氢酶(Lysine-ketoglutarate reductase／saccharopine dehydrogenase)，F-box蛋白(F-box protein)，UMP／CMP激酶(UMP／CMP kinase)，乙烯反应传感蛋白(ethylene response sensor)，翻译起始因子(translation initiation factor)等，这些蛋白可能与植物的防御应答密切相关。此外，还有一些蛋白属于核酮糖二磷酸羧化酶／加氧酶(ribulose-1，5-bisphosphate carboxylase／oxygenase，RuBisCO)家系成员，这些蛋白中的多数在病原胁迫下表达下调。根据功能，所鉴定的蛋白主要分成五类，包括与光和合成、蛋白合成、能量代谢、防御应答相关蛋白及未分类的蛋白等。最后对这些蛋白的生物学功能进行了探讨。

【关键词】：杨树黑斑病 2-DE MALDI-TOF MS 防御应答
【学位授予单位】：南京林业大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：S763.7
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