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《南京林业大学》 2007年
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杨盘二孢菌侵染后杨树叶片差异表达蛋白质的鉴定

袁坤  
【摘要】: 杨树是重要的速生用材树种,具有颇高的经济价值和生态效益。然而,杨树在生长过程中不断受到病虫害的威胁。杨树黑斑病是由真菌引起的叶部病害,其主要致病菌为杨盘二孢菌(Marssonina brunnea f.sp.multigermtubi)。目前有关杨树与黑斑病菌相互作用的分子机制仍不清楚。为了鉴定与抗病相关的蛋白质,初步了解杨树抗病的分子基础,以对杨盘二孢菌高抗的无性系NL895杨(P.×euramericana CL“NL 895”)为实验材料,利用蛋白质双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术和质谱(mass spectrometry,MS)技术等蛋白质组学方法研究了该无性系接种杨盘二孢菌0、12、24、48、72h后叶片蛋白表达谱的变化。PDQuest~(TM)(Bio-Rad)软件分析后,共获得了约500个重复性表达的蛋白点,其中有40个蛋白点差异表达。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对这些差异蛋白点进行了分析和数据库搜索。所鉴定的蛋白主要包括推测的抗坏血酸过氧化物酶(putative ascorbate peroxidase),S-腺苷甲硫胺酸合成酶(S-adenosyl methionine synthetase),钙调素结合蛋白(calmodulin binding protein),醌氧化还原酶类蛋白(quinone oxidoreductase-like protein),赖氨酸酮戊二酸酯还原酶/酵母氨酸脱氢酶(Lysine-ketoglutarate reductase/saccharopine dehydrogenase),F-box蛋白(F-box protein),UMP/CMP激酶(UMP/CMP kinase),乙烯反应传感蛋白(ethylene response sensor),翻译起始因子(translation initiation factor)等,这些蛋白可能与植物的防御应答密切相关。此外,还有一些蛋白属于核酮糖二磷酸羧化酶/加氧酶(ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase,RuBisCO)家系成员,这些蛋白中的多数在病原胁迫下表达下调。根据功能,所鉴定的蛋白主要分成五类,包括与光和合成、蛋白合成、能量代谢、防御应答相关蛋白及未分类的蛋白等。最后对这些蛋白的生物学功能进行了探讨。
【学位授予单位】:南京林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S763.7

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