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《南京林业大学》 2008年
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杨树染色体加倍技术研究

蒋岩峰  
【摘要】:多倍体对物种进化及育种都具有重要意义,多倍体诱导是多倍体育种的基础。本研究以南林895杨(Populus×euramericana cv.‘Nanlin895')组培苗为试验材料,在离体条件下,选择组培苗的叶盘、叶柄、茎段等作为诱导受体材料,利用秋水仙素进行不同处理,开展人工诱导多倍体研究,旨在初步建立南林895杨体细胞多倍体诱导体系,为多倍体育种提供依据。主要研究结果如下: 1.本研究以叶盘为受体材料,设置了不同秋水仙素浓度和不同处理方式。筛选结果显示:采用光照条件下预培养3d,在含2%秋水仙素的固体培养基上暗培养3d后,再置于光照下培养3d的处理方式得到的多倍体诱导率最高,为18.75%; 2.在以不同浓度的秋水仙素处理不同诱导受体材料时发现:随着处理浓度的提高,受体材料芽诱导率降低,褐化率增加。不同诱导受体材料筛选结果显示:相对其他受体材料、处理方式、秋水仙素浓度,采用叶盘为材料,在光照条件下预培养3d后,转移到含0.5%秋水仙素浓度的固体培养基上暗培养3d后,再转移至光照条件下培养3d的处理方式得到的受体材料芽诱导率最高;采用叶柄为材料,在0.5%的秋水仙素浓度下,光照条件下预培养7d,转移至秋水仙素固体培养基上培养3d和7d的处理方式得到的受体材料褐化率最低; 3.观察组培苗在分化不同时期的形态时发现:秋水仙素提高了各分化时期的组培苗形态畸变的频率。5%浓度秋水仙素对受体材料的毒害作用非常明显,再生植株几乎全部死亡; 4.对南林895杨的倍性鉴定结果显示:对体细胞染色体计数可直接观察染色体倍性变化。实验同时发现经秋水仙素处理后的受体材料分化得到的再生植株气孔的内长轴/内短轴的数值比对照组小,可能也是染色体加倍后植株的形态特征之一; 5.杨属植物由于染色体数目多,难以观察计数,良好的染色体制片技术是多倍体分析的关键。本研究表明:取材时以芽尖为制片材料优于根尖,可在一天中任意时间段取材,采用冰水预处理24~48h,4℃下固定24h以上,65℃下用盐酸解离7min的处理方式可获得较好制片效果,为杨树染色体倍性鉴定工作提供了基础。
【学位授予单位】:南京林业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:Q943

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