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《南京林业大学》 2010年
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杂交鹅掌楸营养器官体细胞胚胎发生研究

崔燕华  
【摘要】: 杂交鹅掌楸是一种珍稀的观赏风景树种和重要的工业用材树种。但由于该树种天然结实率低,繁殖能力差,杂交种供不应求。通过建立杂交鹅掌楸营养器官的体细胞胚胎发生体系,为解决鹅掌楸种苗供应不足提供一条新的途径。 本文以杂交鹅掌楸营养器官为材料,包括两年生冬枝、一年生幼嫩枝条及叶片、叶柄等,以植物细胞全能性作为理论依据,根据已有的杂交鹅掌楸未成熟胚体细胞胚胎发生体系为指导,进行了营养器官体细胞胚胎发生的研究。分析并了解了营养器官基因型、培养基激素配比、培养条件,渗透压等对体细胞胚胎发生的影响。结果表明:以3/4MS为基本培养基,添加2.0mg/L浓度的2,4-D,0.3mg/L的6-BA诱导愈伤组织较好,分别以KT浓度0.5mg/L,IAA浓度0.2 mg/L,6-BA浓度0.5 mg/L和ZT浓度4.0 mg/L,IAA浓度1.0 mg/L,可诱导较致密的胚性愈伤。在诱导体胚发生过程中,ABA可以给体胚的生长制造一种胁迫环境,从而抑制畸形胚的产生。光照条件是体胚形成后期及体胚苗产生的必要因素。 通过杂交鹅掌楸液体悬浮系的建立,在固体培养体系研究的基础上,对体细胞胚胎做进一步研究。试验中,研究了转速对愈伤组织的影响,得出95 r/min为最佳转速。研究了愈伤组织在悬浮培养过程中的增殖情况,从而得出理想的继代时间为25天。同时对悬浮系进行了诱导,得到了球形胚,为营养器官体细胞胚胎发生研究可行性进行了探索。 通过对杂交鹅掌楸营养器官体胚发生诱导过程,以及未成熟胚体胚发生诱导过程中,各阶段生理生化研究,从横向和纵向进行了对比和分析了。结果表明,试验材料中编号为NE04和NE55两个系号的可溶性蛋白含量和可溶性糖含量较高,在所选择的五个基因型中,具有相对较强的体胚发生能力,但本实验所得的结果表明,体胚发生能力等各项指标远不及未成熟体胚所得的结果。利用成熟器官进行体细胞胚胎发生还需要进一步的探索。
【学位授予单位】:南京林业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S792.21

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