不同生长年限霍山石斛主要药用成分和保肝抗炎作用的研究

【摘要】：霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)在我国有着悠久的药用历史,是石斛中的珍品,具有抗炎、抗氧化、提高人体免疫力、抗白内障和保肝等多种生物活性,主要药用成分包括多糖、生物碱类、黄酮类和微量元素等。近年来,野生霍山石斛被过度采挖,已濒临灭绝,目前市场上流通的霍山石斛多为人工种植,霍山石斛的采收月份多为每年10月至次年6月。药用植物的最佳采收时间是保证中药材质量的关键因素之一,不同采收时间的药材药性差异较大,因此药用植物的采收年限和采收月份直接影响到药材的临床疗效。但是关于霍山石斛的具体采收年限,却只有较少相关文献报道。因此对不同生长年限的霍山石斛有效成分和药效的研究将对霍山石斛资源发展提供依据。故本研究采用一年生、二年生和三年生霍山石斛,利用紫外分光光度法和高效液相色谱法等方法测定不同生长年限霍山石斛多糖、总黄酮、总生物碱和石斛酚的含量。本研究通过构建小鼠对乙酰氨基酚(APAP)肝损伤模型研究不同生长年限霍山石斛保肝活性,分析不同生长年限霍山石斛成分和药效间的关系。此外,本研究通过耳肿胀炎症模型初步探索了不同生长年限霍山石斛抗炎活性的差异。本研究为霍山石斛合理采收期提供依据,为霍山石斛资源开发提供参考。主要研究内容及结论如下:1.不同生长年限霍山石斛主要药用成分的含量差异本研究采用紫外分光光度法测定不同生长年限霍山石斛多糖、总黄酮和总生物碱的含量,并采用高效液相色谱法测定不同生长年限霍山石斛石斛酚的含量。实验结果表明,不同生长年限霍山石斛化学成分含量存在差异。二年生霍山石斛多糖含量最高,达到159.34 mg·g~(-1),一年和三年生霍山石斛多糖含量分别为141.17 mg·g~(-1)和101.23mg·g~(-1)。二年生霍山石斛石斛酚含量也为最高,达到12.58μg·g~(-1),一年和三年生霍山石斛石斛酚含量分别为5.93μg·g~(-1)和4.60μg·g~(-1)。三年生霍山石斛总黄酮含量达到7.41 mg·g~(-1),总生物碱含量为0.58 mg·g~(-1),三年生霍山石斛总黄酮和总生物碱含量在不同年限霍山石斛中含量最高,二年生霍山石斛次之,两者含量分别为4.91 mg·g~(-1)和0.48 mg·g~(-1),一年生霍山石斛最低,两者含量分别为3.28 mg·g~(-1)和0.09 mg·g~(-1)。2.不同生长年限霍山石斛保肝药效的比较研究对乙酰氨基酚是一种常见的解热镇痛消炎药,但大量或长期用药会导致肝损伤。本研究采用对乙酰氨基酚肝损伤模型评价不同生长年限霍山石斛的保肝药效差异。实验结果表明,各给药组均能降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷丙转氨酶(AST)含量,同时升高肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性并降低丙二醛(MDA)水平,减轻对乙酰氨基酚对肝脏的病理损伤,但不同生长年限的霍山石斛保肝效果不同,二年生霍山石斛药效最佳。结合不同生长年限霍山石斛成分进行多成分SPSS配对分析的结果表明,多糖和石斛酚很可能在小鼠急性肝损伤保护作用中起主导作用。3.不同生长年限霍山石斛抗炎药效的比较研究本研究采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,评价了不同生长年限霍山石斛的抗炎作用。实验结果表明,与模型组比较,不同生长年限霍山石斛均能降低小鼠耳肿胀度,肿胀抑制率良好,表现出较好的抗炎效果。同时,不同生长年限的霍山石斛抗炎效果不同,二年生和三年生霍山石斛抗炎效果更为明显。